1、寄生蟲病診斷流行防治與臨床寄生蟲病診斷流行防治與臨床 患者，男，59歲，高校教師，長沙市人，因生食魚片1月余在腹部皮膚出現匍行疹。經皮膚組織活檢，在切片中發現棘顎口線蟲幼蟲切面，后從組織塊中分離到殘存的蟲體。 患者，男，59歲，高校教師，長沙市人，因生食一、寄生蟲病診斷(Diagnosis of Parasitosis)(1)詢問病史 ( Taking History) 感染史、排蟲史及臨床癥狀(2)體格檢查 ( Physical Examination) 皮下包塊、皮疹(3)實驗室檢查 (Laboratory test) 一、寄生蟲病診斷(Diagnosis of Parasito實驗室檢查

2、 (Laboratory test)1、基本原則 ( Basic principle )2、注意事項 (Note)3、病原學檢查方法 ( Etiological test)實驗室檢查 (Laboratory test)1、基本原則 (1)寄生蟲通過宿主的排泄物、分泌物、 血 液離開人體,繁殖力強,感染較 重 直截了當到宿主的排泄物、分泌 物、血液中 查找離體時期。 1、基本原則( Basic principle )A. Lumbricoides eggS. Japonicum eggB. Malayi MicrofilariaTrichomonas vaginalis(1)寄生蟲通過宿主的排泄

3、物、分泌物、 血 1、基本原則( (2)寄生蟲通過宿主的排泄物、分泌物、 血液離開人體。對感染較輕、數量較 少或離體時期個體太小者,可采取濃 集法查找離體時期。 1、基本原則( Basic principle )Ancylostoma eggClonorchis. sinensis egg(2)寄生蟲通過宿主的排泄物、分泌物、1、基本原則( Bas(3)寄生于體內卻在肛周產卵或蟲卵在 經過肛門時粘附在肛門周圍采 用肛門拭子法查蟲卵。 1、基本原則( Basic principle )Enterobius.vermicularis eggTaenia egg(3)寄生于體內卻在肛周產卵或蟲卵在

4、1、基本原則( Bas(4)有離體時期的寄生蟲在查不到離體 時期時,又高度懷疑為感染者或進 行大面積人群調查可采納免疫 學檢查。 1、基本原則( Basic principle )Circumoval precipitin test (COPT)(4)有離體時期的寄生蟲在查不到離體 1、基本原則( (5)寄生于體內卻無離體時期或呈隱性 感染可采納組織活檢法查寄生 時期和血清學檢查。 1、基本原則( Basic principle )Toxoplasma gondii trophozoite Trichinella spiralis cyst(5)寄生于體內卻無離體時期或呈隱性 1、基本原則(

5、Bas(1)注意蠕蟲卵之間和原蟲包囊之間的鑒別, 以及蠕蟲卵與各種相似物之間的鑒別; 2、注意事項 (Note)(2)注意各種檢查方法的習慣對象。(3)有些寄生蟲要注意采集標本的時間及 送檢的時間。 (1)注意蠕蟲卵之間和原蟲包囊之間的鑒別,2、注意事項 (N(4)有些寄生蟲的離體時期有間隙性排放 的特點,應反復多次檢查。 (5)有些寄生蟲的離體時期具有感染性, 實驗室檢查時應防止實驗室感染。(6)血清學檢查應考慮交叉反應、假陽性 和假陰性的存在,僅有輔助診斷意義。2、注意事項 (Note)(4)有些寄生蟲的離體時期有間隙性排放 (5)有些寄生蟲的離 寄生蟲病實驗室診斷Laboratory d

6、iagnosis of parasitic diseases 病原學診斷 免疫學診斷 分子生物學診斷 寄生蟲病實驗室診斷 病原學診斷1、糞便檢查*2、血液檢查*3、活體組織檢查4、其他排泄物或抽取液的檢查5、動物接種病原學診斷1、糞便檢查*病原學診斷病原學診斷 糞便檢查 原蟲的滋養體 多種蠕蟲卵生理鹽水直截了當涂片法1、直截了當涂片法病原學診斷 糞便檢查 原蟲的滋養體生理鹽水直截了當涂片法 原蟲的包囊生理鹽水直截了當涂片法碘液直截了當涂片法1、直截了當涂片法病原學診斷 糞便檢查 原蟲的包囊生理鹽水直截了當涂片法1、直截了當涂片法病原學 直截了當涂片法簡便易行,但若用糞量過少,則存在一定的漏檢率

7、。1、直截了當涂片法病原學診斷 糞便檢查 直截了當涂片法簡便易行,但若用糞量過少,則存在一定的漏檢重力沉淀法 適合于比重大于水的原蟲包囊及各種蠕蟲卵。 重力沉淀法1、直截了當涂片法2、濃集法病原學診斷 糞便檢查重力沉淀法 適合于比重大于水的原蟲包囊及各種蠕蟲卵。 1、直截了當涂片法2、濃集法病原學診斷 糞便檢查1、直截了當涂片法病原學診斷 糞便檢查浮聚法飽和鹽水浮聚法硫酸鋅浮聚法飽和鹽水浮聚法病原學診斷 糞便檢查1、直截了當涂片法2、濃集法浮聚法飽和鹽水浮聚法飽和鹽水浮聚法病原學診斷 糞便檢查1、 鉤蟲 糞類圓線蟲 毛圓線蟲鉤蚴培養法1、直截了當涂片法2、改良加藤氏法3、濃集法4、線蟲幼蟲培養

8、法病原學診斷 糞便檢查 鉤蟲鉤蚴培養法1、直截了當涂片法病原學診斷 糞便檢查1、直截了當涂片法2、改良加藤氏法3、濃集法4、線蟲幼蟲培養法5、毛蚴孵化法病原學診斷 糞便檢查1、直截了當涂片法病原學診斷 糞便檢查 棉拭子法 透明膠紙法1、直截了當涂片法2、改良加藤氏法3、濃集法4、線蟲幼蟲培養法5、毛蚴孵化法6、肛門拭子法病原學診斷 糞便檢查 棉拭子法1、直截了當涂片法病原學診斷 糞便檢查生理鹽水直接涂片沉淀法飽和鹽水浮聚法硫酸鋅離心浮聚法蔗糖離心浮聚法尼龍絹篩集卵法毛蚴孵化法鉤蚴培養法肛門拭子法蠕蟲卵.原蟲滋養體/包囊比重較大的蠕蟲卵鉤蟲卵.短膜殼絳蟲卵原蟲包囊.線蟲卵.短膜殼絳蟲卵隱孢子蟲卵

9、囊血吸蟲卵血吸蟲卵鉤蟲幼蟲蟯蟲卵.帶絳蟲卵病原學診斷 糞便檢查生理鹽水直接涂片蠕蟲卵.原蟲滋養體/包囊病原學診斷 糞便檢病原學診斷 血液檢查瘧原蟲絲蟲利什曼原蟲弓形蟲病原學診斷 血液檢查瘧原蟲病原學診斷 血液檢查1、薄血膜法(查瘧原蟲)采血推片畫線染色鏡檢病原學診斷 血液檢查1、薄血膜法(查瘧原蟲)采血推片畫線染病原學診斷 血液檢查2、厚血膜法(查瘧原蟲和微絲蚴)采血涂片溶血染色鏡檢1、薄血膜法(查瘧原蟲)病原學診斷 血液檢查2、厚血膜法(查瘧原蟲和微絲蚴)采血涂病原學診斷 血液檢查 注意事項:1、玻片的潔凈程度對涂制血膜的質量有直截了當關系,因此要求嚴格按規程清洗玻片。2、 采血時間:瘧疾現

10、癥病人可隨時取血,一般以 寒熱發作時或發作后數小時取血為好;夜現周 期型淋巴絲蟲感染調查則應在212時之間采 血。病原學診斷 血液檢查 注意事項:2、 采血時間:瘧疾現癥病病原學診斷 組織活檢 皮膚 皮膚利什曼病 皮膚阿米巴病 豬囊尾蚴病 肺吸蟲病 棘腭口線蟲病 盤尾絲蟲病 疥瘡病原學診斷 組織活檢 皮膚 皮膚利什曼病病原學診斷 組織活檢 皮膚 骨髓 杜氏利什曼原蟲病原學診斷 組織活檢 皮膚 杜氏利什曼原蟲病原學診斷 組織活檢 皮膚 骨髓 淋巴結 內臟利什曼病 錐蟲病 弓形蟲病 絲蟲病病原學診斷 組織活檢 皮膚 內臟利什曼病病原學診斷 組織活檢 皮膚 骨髓 淋巴結 肌肉 旋毛蟲病 囊蟲病 裂頭

11、蚴病 肺吸蟲病病原學診斷 組織活檢 皮膚 旋毛蟲病病原學診斷 組織活檢 皮膚 骨髓 淋巴結 肌肉 直腸 溶組織內阿米巴 血吸蟲卵病原學診斷 組織活檢 皮膚 溶組織內阿米巴病原學診斷 組織活檢 皮膚 骨髓 淋巴結 肌肉 直腸 肺 衛氏并殖吸蟲成蟲/蟲卵 溶組織內阿米巴 卡氏肺孢子蟲病原學診斷 組織活檢 皮膚 衛氏并殖吸蟲成蟲/蟲卵痰液病原學診斷 其他標本檢查 衛氏并殖吸蟲 蛔蟲幼蟲 鉤蟲幼蟲 糞類圓線蟲幼蟲 卡氏肺孢子蟲 溶組織內阿米巴滋養體痰液病原學診斷 其他標本檢查 衛氏并殖吸蟲痰液尿液 埃及血吸蟲卵 腎膨結線蟲卵 陰道毛滴蟲 艾氏小桿線蟲成蟲病原學診斷 其他標本檢查痰液 埃及血吸蟲卵病原學

12、診斷 其他標本檢查痰液尿液陰道分泌物 陰道毛滴蟲 溶組織內阿米巴滋養體病原學診斷 其他標本檢查痰液 陰道毛滴蟲病原學診斷 其他標本檢查痰液尿液陰道分泌物十二指腸抽取液 藍氏賈第鞭毛蟲 華支睪吸蟲卵 肝片形吸蟲卵 布氏姜片蟲卵 溶組織內阿米巴大滋養體病原學診斷 其他標本檢查痰液 藍氏賈第鞭毛蟲病原學診斷 其他標本檢查痰液尿液陰道分泌物十二指腸抽取液鞘膜積液 班氏微絲蚴病原學診斷 其他標本檢查痰液 班氏微絲蚴病原學診斷 其他標本檢查痰液尿液陰道分泌物十二指腸抽取液鞘膜積液腦脊液 弓形蟲 耐格里屬阿米巴 廣州圓線蟲病原學診斷 其他標本檢查痰液 弓形蟲病原學診斷 其他標本檢查病原學診斷 動物接種 在懷

13、疑弓形蟲感染時,可采取血液、骨髓、淋巴結、腦脊液沉淀的涂片染色鏡檢,但陽性機會不大,因此常將上述材料接種小白鼠以分離病原體。病原學診斷 動物接種 在懷疑弓形蟲感染時,可1、皮內試驗(IDT)2、間接血凝試驗(IHA)3、免疫熒光法(IF)4、免疫酶染色試驗(IEST)5、酶聯免疫吸附試驗(ELISA)6、膠體金免疫測定技術(CGIA)免疫學診斷1、皮內試驗(IDT)免疫學診斷免疫學診斷酶聯免疫吸附試驗(ELISA)1) 抗原包被2) 加樣(一抗)3) 洗滌4) 加酶標抗體(二抗)5) 洗滌6) 加底物顯色7) 觀察結果免疫學診斷酶聯免疫吸附試驗(ELISA)1) 抗原包被免疫學診斷膠體金免疫測

14、定技術(CGIA) Dipstick+ CT免疫學診斷膠體金免疫測定技術(CGIA) Dipstick+免疫學診斷 存在的問題 1、 不同寄生蟲之間的交叉反應, 2、 難以區分現癥感染與既往感染。 解決方法 1、 單一組分抗原, 2、 檢測短程抗體。免疫學診斷 存在的問題 解決方法分子生物學診斷1、核酸分子雜交技術*蟲體 DNA模板標記的 DNA 探針分子生物學診斷1、核酸分子雜交技術*蟲體 DNA模板標記的 分子生物學診斷2、 PCR技術分子生物學診斷2、 PCR技術分子生物學診斷2、 PCR技術 50l反應體系10PCR緩沖液 5lP1 0、2mol/LP2 0、2mol/LdNTP 20

15、0mol/LTaq酶 2U樣本DNA 0、1g H2O 補足50l分子生物學診斷2、 PCR技術 50l反應體分子生物學診斷2、 PCR技術94 494 156 172 172 835 Cycles分子生物學診斷2、 PCR技術94 435 Cycl分子生物學診斷2、 PCR技術 PCR技術具有高度的敏感性,有嚴格的操作要求,若操作不當,特別容易出現假陽性和假陰性,因此,在試驗中應嚴格遵守操作規程,并同時設立陽性、陰性和空白對比。分子生物學診斷2、 PCR技術 PCR技術具有高度（一） 我國寄生蟲病的流行情況 分 類 蟲 種 數 全國調查 病例報告 合計 原 蟲 20 21 41 線 蟲 13

16、 22 35 吸 蟲 17 30 47 絳 蟲 9 7 16 棘頭蟲 1 2 3 節肢動物 66 66 自由生活動物 21 21 合 計 60 169 229我國已報道的人體寄生蟲蟲種數 二、寄 生 蟲 病 流 行（一） 我國寄生蟲病的流行情況我國已報道的人體寄生蟲蟲種數 省（區、市） 檢查人數 感染率（%） 推算感染人數（萬） 北 京 41633 34.778 376.3 天 津 22142 38.574 338.3 黑龍江 52131 17.521 617.0 上 海 62134 45.704 609.8 江 蘇 63699 63.532 4260.2 湖 南 63794 76.705 4

17、652.9 廣 東 61517 72.126 4531.6 廣 西 51883 86.165 3640.1 海 南 7958 94.735 621.2 西 藏 10303 52.033 114.3 新 疆 26301 42.976 651.3 總 計 1477742 59.690 我國各省、區、市的人體寄生蟲總感染率（1992）湖 南 63794 76、705 4652、9湖 南 63794 76、705 4652、9我國各省、區、市的人體寄生蟲總感染率（1992）湖 南 感染蟲種數 感染人數 平均感染率(%) 構成比(%) 1 499871 33、8267 56、6709 2 256684

18、17、3700 29、1005 3 96225 7、3009 10、9091 4 24109 1、6315 2、7332 5 4372 0、2959 0、4957 6 686 0、0464 0、0778 7 95 0、0064 0、0108 8 16 0、0011 0、0018 9 2 0、0001 0、0002單一與多蟲感染的感染率及構成比感染蟲種數 感染人數 平均感染率(%) 構成比(%(二)寄生蟲病的流行特點1、地方性:a、 中間宿主與媒介昆蟲的分布(二)寄生蟲病的流行特點1、地方性:a、 中間宿主與媒介昆蟲血吸蟲感染的地區分布釘螺的地區分布血吸蟲感染的地區分布釘螺的地區分布(二)寄生蟲

19、病的流行特點1、地方性:a、 中間宿主與媒介昆蟲的分布b、 生活習慣和生產方式 ( 血吸蟲的感染方式)(二)寄生蟲病的流行特點1、地方性:a、 中間宿主與媒介昆蟲(二)寄生蟲病的流行特點1、地方性:a、 中間宿主與媒介昆蟲的分布b、 生活習慣和生產方式 ( 血吸蟲的感染方式)c、 氣候 (二)寄生蟲病的流行特點1、地方性:a、 中間宿主與媒介昆蟲2、季節性: a、 媒介昆蟲的季節性所致 b、 人類生產、生活活動形成感染季節性 (二)寄生蟲病的流行特點2、季節性: a、 媒介昆蟲的季節性所致 b、 人類生產、寄生蟲病診斷流行防治與臨床-課件2、季節性: a、 媒介昆蟲的季節性所致 b、 人類生產

20、、生活活動形成感染季節性 c、 寄生蟲在外界發育及活動的季節性(二)寄生蟲病的流行特點2、季節性: a、 媒介昆蟲的季節性所致 b、 人類生產、3、自然疫源性 a、 基本概念: 有些人體寄生蟲無明顯宿主特異性, 可寄生于多種動物,這些寄生蟲可在 無人參與的情況下在動物之間相互傳 播。這種性狀稱自然疫源性。 b、 人獸共患寄生蟲病(parasitic zoonoses): 在脊椎動物與人之間自 然傳播的寄生蟲病。 c、 意義:(a) 反映寄生蟲在自然界的演化過程; (b) 反映寄生蟲病在流行病學和防治中 的復雜性; (二)寄生蟲病的流行特點3、自然疫源性 a、 基本概念: 有些人體寄生蟲無明顯宿(三)流行三環節 1、傳 染 源 體內有寄生蟲生存、繁殖,并能將 寄生蟲排出體外的人和動物。 2、傳播途徑 寄生蟲由傳染源排出以后,經過一 定的方式再侵入其他易感者所經過 的途徑。 (三)流行三環節 1、傳 染 源 體內有寄生蟲生存、 經口感染蛔蟲、蟯蟲、溶組織內阿米巴、肺吸蟲、肝吸蟲、帶絳蟲等感染方式小結 經口感染蛔蟲、蟯蟲、溶組織內阿米巴、肺吸蟲、感染方寄生蟲病診斷流行防治與臨床-課件寄生蟲病診斷流行防治與臨床-課件寄生蟲病診斷流行防治與臨床-課件寄生蟲病診斷流行防治與臨床-課件寄生蟲病診斷流行防治與臨床-課件寄生蟲病診斷流行防治與臨床-課件寄生蟲病診斷流行防