1、2021.03.07*歐陽光明*創編2021.03.07*歐陽光明*創編鄰二貌務憲光度法測建薇量鐵歐陽光明(2021.03.07)二、實驗目的K 學會吸收曲線及標準曲線的繪制，了解分光光度法的基本原理。2、掌握用鄰二氮菲分光光度法測定微量鐵的方法原理。3721型分光光度計的正確使用，了解其工作原理。4、 學會數據處理的基本方法。5三、實驗原理根據朗伯-比耳定律：A=wbc,當入射光波長入及光程 b 定Ac成 正比。只Ac為橫坐標的標準曲 線，測出試液的吸光相關的回歸分析軟件，將數據輸入 計算機，得到相應的分析結果。用分光光度法測定試樣中的微量鐵，可選用顯色劑鄰二氮菲 （又稱鄰菲羅麻pH2-9的

2、溶液中，鄰二氮菲和二價鐵離子接合 Th成紅色配合物：lgK穩=21.3,摩爾吸光系數5101.1x104Lmol-lcm-1,Fe3+能與鄰二氮菲Th31 配合物，呈淡藍色，lgK*歐陽光明*創編2021.03.07*歐陽光明*創編2021.03.07穩=14.1。所以在加入顯色劑之前，應用鹽酸輕胺(NH2OH HC1)將 Fe3+Fc2+,其反映式如下：2Fe3+2NH2OHHC12Fe2+N2+H2O+4H+2C1-測定時酸度高，反映進行較慢；酸度太低，則離子易水解。本 實驗采用HAc-NaAcpH=5.0,為判斷待測溶液中鐵元素含量，需首先繪制標準曲線，根據標 準曲線中不同濃度鐵離子引起

3、的吸光度的變化，關于應實測樣本引起 的吸光度，計算樣本中鐵離子濃度。40Sn2+、A13+、 62+、Mg2+、Zn2+、SiO32-;20倍的 Cr3+、Mn2+.VO3-、 PO43-;5倍的Co2+、Ni2+、Cu2+-Bi3+C2+、Hg2+、Zn2+.Ag+等離子與鄰二氮菲作用Th成沉淀干擾測 定四、實驗儀器與試劑：721型分光光度計、酸度計、50ml比色管、吸量管(ImL.2mL、5mL、10 mL).比色 K 洗耳球。l.lxl0-3mol L-l鐵標準溶液、lOOug-ml-1胺、醋酸鈉.0.15%鄰二氮菲水溶液。五、實驗步()準備工作打開儀器電源開關，預熱，調節儀器。10,的

4、透射光I,T,T A 值1、吸收曲線的繪制和測量波長的選擇用吸量管吸取2.00 mLl.0 xl0-3mol.L-l50 mL比色管中，1.00 mL 10%2.00 mL0.15%5.0mLNaAc 1 cm 比色皿，采用試劑440-560 nm10 nm測量一次吸光度，以波長為max 為測定波長。2、顯色劑條件的選擇（顯色劑用量）6 2.00mL 1.0 xl0-3mol L-l 鐵標準溶液 和l.OOmL 10%0.10, 0.50, 1.00, 2.00, 3.00 4.00mL0.15%鄰二氮菲溶液，5.0 mL NaAc 溶液，以水稀釋至刻度，搖勻。在光 度計上用1cm比色皿，采用

5、試劑溶液為參比溶液，測吸光度。以鄰二氮菲體積為 橫坐標， 吸光度為縱坐標，繪制吸光度試劑用量曲線，從而確定最佳顯色劑用 量。3.pH的確定8 50 mL 2mL 1.00 x10-3mol/L-1 mL 10%2 min,再加入特定體積2021.03.07*歐陽光明*創編2021.03.07*歐陽光明*創編（2中探究出的最適量）0.15% L0.0、 0.20、0.50、1.00、1.50、2.00、3.00mL0.15%NaAclcni的比色皿，選擇適宜（T”所決定的）參比，訣別測其吸光度。在坐標紙上以加入的 NaAc溶液體積數為橫坐標，相應的ApH pH范圍。4、 顯色時間及有色溶液的穩定

6、性2mL1.00 xl0-3mol/L-l50mL1 mL（2mL 鄰二氮菲溶液，加入特定體積的（3中探究出的）NaAc1mL 510nm之間測定吸A-t 間。5、 標準曲線的制作650mL10mL0.000.20.0.40、0.60、0.80、1.00niL100ngniL-l1mL10%鹽酸徑月安，搖勻（原則上每加入一種試劑都要搖勻）2mL0.15%的鄰二氮菲溶液和特1mobL-lNaAc（4中探）510nmlcm定各溶液的吸光度。繪制標準曲線。*歐陽光*創編2021.03.07*歐陽光明*創編2021.03.07*歐陽光明*創編2021.03.076、試液含鐵量的測定準確吸取適量試液（如

7、水樣或工業鹽酸、石灰石樣本制備液等） 代替標準溶液， 其他步驟同上，平行三次測定其吸光度。記錄計算 機顯示的含鐵量，計算試液中鐵的含量（mg-L-1表示）。六、數據處理1、鄰二氮菲-Fc2+吸收曲線的繪制（1）數據紀錄不同波長吸光度4404454504554604654704754800.3400.3530.36403770.3950.4150.4330.4470.4544854904955005055105155205250.4570.4600.4670.4770.4900.4970.4910.4680.4285305355405455505555600.3740.3100.2460.188

8、0.1400040.077波長A/mn吸光度 波長波長A/mn吸光度 波長A/mn吸光度 波長VmnA由圖可知，最大吸收波長入 max= 510nm2、顯色劑用量的測定鄰二氮菲的體積（ml）000.501.002.003.00鄰二氮菲的體積（ml）000.501.002.003.004.00A0.0480.2820.4970.5000.4910.485據上面數據，作得標準曲線圖如下：1-00mL0.15%鄰二氮菲溶液。2021.03.07*歐陽光明*創編*歐陽光明*創編2021.03.072021.03.07*歐陽光明*創編2021.03.07*歐陽光明*創編2021.03.07pH與吸光度的

9、關系濃度濃度ug/ml00.20.511.522.5Abs0.0060.060.2310.420.4060.4020395NaAc1.00mL。顯色時間及有色溶液的穩定性tmin03691215A0.4800.4770.4780.4790.4800.47912分鐘后鐵離子與鄰二氮菲基本完全接合。2、工業鹽酸中鐵含量的測定標準曲線的制作試液中鐵含量與吸光度的關系VlOOug/mLVlOOug/mLmLA0.000.000.600.2180.800.2891.000.3551.200.4301.400.494試液含鐵量的測定測試次數123吸光度 A0.4820.4830.483鐵的濃度/ug/mL

103574鐵水樣濃度的平均值/ug/mL鐵水樣濃度的平均值/ug/mL13564相關于偏差0.095%0.05%0.05%六.實驗注意事項*歐陽光明*創編2021.03.072021.03.07*歐陽光明*創編2021.03.07*歐陽光明*創編1、不能顛倒各種試劑的加入順序。2AT所關于應的數據。透射比與吸光度的 關系為:A=log(I0/I)=log(l/T);3、最佳波長選擇好后不要再改變。4、每次測定前要注意調滿刻度。七、思考題1、鄰二氮菲分光光度法測定微量鐵時為何要加入鹽酸輕胺溶 液？Fe2+Fe3+,Fe2+與鄰二氮菲(phen) 能Th成穩定的桔紅色配合物Fe(phen)32+lgK穩=21.3,摩爾吸光系數510=l.lxl04L mol-l cm-l,Fe3+能與鄰二氮菲 Th31配合物，呈淡藍色，lgK穩=14.1以在加入顯色劑之 前，應用鹽酸輕胺(NH2OH.HC1)Fe3+Fe2+,然后，進行 鐵的總量的測定。2.參比溶液的作用是什么？在本實驗中可否用蒸徭水作參 比？答：參比溶液的作用是扣除背景干