1、黃芪等中藥總黃酮與金屬元素含量測定及聚類分析【摘要】目的運用模糊聚類分析方法分析藥物中總黃酮、金屬元素與藥物療效關系的相關性，驗證其藥物成效的相似性及不同種類中藥定量指標評價方面的作用。方法采用紫外分光光度法測定黃芪、澤蘭、川芎、酸棗仁、人參、燈盞花、回心草、月季花、黨參、銀杏葉等10種中藥總黃酮的含量，原子吸收分光光度法測定藥物中鈣、鎂、鐵、鉻、鎳、錳、銅、鋅金屬元素的含量，以數據極差法進展統計指標的標準化處理，以數量積法算出衡量被分類對象之間的相關系數，確定論域上的模糊矩陣。結果相關系數r=0.55時，有5種藥物聚類相似;相關系數r=0.65時，有4種藥物聚類相似;相關系數r=0.90時，

2、有3種藥物聚類相似。藥物中含有豐富的金屬元素和較高的總黃酮，相關系數較大的藥物其藥物療效的相似性較大。結論藥物中黃酮、微量元素的含量與藥物療效具有親密關系，為討論中藥的質量評價提供了一種新的方法，為進一步研究中藥黃酮類化合物及微量元素與藥物作用機理的關系提供了科學的根據。【關鍵詞】中藥;總黃酮;金屬元素;紫外分光光度法;原子吸收分光光度法;模糊聚類分析Abstrat：bjetiveTinvestigatetherrelatinftheflavneandtheetaleleentntentsinseediinesandthEirtherapeutieffetbyeansfblurredlassi

3、fiatin,stverifythesiilarityftheediineeffetandthEIrrlesinthequantitativeevaluatinftheseediines.ethdsThententsfflavneinhinesetraditinalediinessuhasHuangqi,Zelan,huanxing,Suanzaren,Renshen,Dengzhanhua,Huixina,Yuejihua,DangshenandYinxingyeeredeterinedbyultraviletspetrphetry.Thententfaliu,agnesiu,irn,hri

4、u,nikel,anganese,pperandzininhinesetraditinalediineseredeterinedbyflaeatiabsrptinspetrphtetry.Thestandardpressingfstatistialtargetasarriedutthrughthedataextreediffereneethd.Therelativeeffiientsfthesubjetsinvestigatederealulatedbythedtprdutethdandtherelativefuzzyatrixasbtained.ResultsTheresultsshedth

5、atthelusterin5kindsfediinesassiilarhentherelativeeffiientas0.55;lusterin4kindsfediinesassiilarhentherelativeeffiientas0.65;lusterin3kindsfediinesassiilarhentherelativeeffiientas0.90.Thereereparativelyrihetaleleentsandhighflavneinhinesetraditinalediines,anghihtheirtherapeutieffetassiilarhentherelativ

6、eeffiientasnsiderablygreat.nlusinThissuggeststhatflavneandtraeeleenthaveuhtdiththetherapeutieffet.Itprvidedusefuldatafrdisussingtherelatinshipbeteenthententfflavneandthetraeeleentsandtheirehanisfediines,anddevelpinganeethdfrevaluatingqualityfhinesetraditinalediines.Keyrds：hinesetraditinalediines;Fla

7、vne;etaleleent;Ultraviletspetrphetry;Atiabsrptinspetrphtetry;Blurredlassifiatin中醫藥學是具有我國特色的重要學科，中藥藥效的特點是多效性和整體平衡調節性。研究發現，中藥中含有豐富的微量元素，中藥中的金屬元素經常是有機有效成分的中心原子，是中藥中重要的物質基矗本研究選擇了黃芪等10種常用的治療心腦血管疾病的中草藥，用紫外分光光度法測定了藥物中總黃酮的含量，用原子吸收分光光度法測定了藥物中鈣、鎂、鐵、鉻、鎳、錳、銅、鋅金屬元素的含量，結合中藥的有機有效成分黃酮類化合物，運用化學計量學方法進展微量元素的模糊聚類分析，從總黃

8、酮和金屬元素整體的角度對藥物藥效的相似性作出了定量指標的明確評價。1器材1.1藥品和試劑黃芪(內蒙)，澤蘭(湖北)，川芎(四川)，酸棗仁(山東)，人參(吉林)，燈盞花(云南)，回心草(云南)，月季花(吉林)，黨參(甘肅)，銀杏葉(云南)。HN3，Hl4，均為優級純。2方法與結果2.1金屬元素含量的測定2.1.1樣品處理隨機取樣品100g，研碎，充分混勻，準確稱取1.0000g，平行稱取3份，于50l容量瓶中，加濃HN310l，密封過夜，次日加濃HN310l，Hl45l，置電熱板上緩慢加熱，當剩余1l左右時，再分別參加濃HN320l，Hl45l繼續消化，至溶液呈無色透明，近干為止。冷卻后，用4%

9、HN3轉移至25l容量瓶中，定容至刻度，混勻備用。2.1.2標準溶液標準儲藏液：a、g、Fe、r、Ni、u、Zn均為國家標準溶液(NS)，濃度為1.000gL-1(國家鋼鐵材料測試中心);n標準液濃度為500gL-1(中國環境檢測總站)。使用液濃度：a、g、Fe、r、Ni、u、Zn均為50gL-1;n為20gL-1。表1儀器工作條件2.1.3標準系列各元素標準系列工作液，a：0.00，1.00，2.00，4.00，6.00，8.00gl-1;g：0.00，0.50，1.00，2.00，3.00，4.00gl-1;Fe：0.00，0.50，1.00，2.00，4.00，6.00gl-1;r：0.

10、00，0.10，0.20，0.40，0.60，0.80gl-1;Ni0.00，0.10，0.20，0.30，0.40，0.50gl-1;n：0.00，0.10，0.20，0.40，0.80，1.60gl-1;u：0.00，0.10，0.20，0.30，0.04，0.50gl-1;Zn：0.00，0.50，1.00，2.00，4.00，6.00gl-1。按表1儀器工作條件，分別測定各標準系列工作液。計算機繪出標準工作曲線，算出回歸方程和相關系數。在本工作范圍內，各元素線形關系良好。各元素回歸方程和相關系數。aA=0.019+0.001r=0.998gA=0.326+0.086r=0.992FeA

11、=0.025+0.001r=0.999rA=0.010+0.001r=0.995NiA=0.026+0.000r=0.998nA=0.044+0.001r=1.000uA=0.058-0.001r=0.999ZnA=0.101+0.033r=0.9912.1.4樣品測定按表1所列儀器工作條件，用火焰原子分光光度法吸收法測定樣品溶液中r，n，Ni，u，Zn的含量，測定Fe時需將樣品稀釋10倍后再行測定。a，g的測定加10%的La(N3)3抗干擾，稀釋10倍后再行測定。結果見表2。2.2總黃酮的測定2.2.1乙醇提取藥物中總黃酮準確稱取各中藥10.0g于索氏提取器中，120l乙醚回流4h，至無色，

12、換成70%乙醇提取10h，過濾，減壓濃縮至20l左右，等體積石油醚萃取，用70%乙醇定容至100l。回歸方程：A=9.250+0.001，相關系數：r=1.000轉貼于論文聯盟.ll.2.2.3藥物中總黃酮的測定準確量取各提取液0.50l于25l容量瓶中，加30%乙醇至12.5l，參加0.8l5%NaN2溶液，放置5in，加0.8l5%Al(N3)3溶液，放置6in，加5l4%NaH溶液，30%乙醇稀釋至刻線，放置10in，于510n處測定吸收度A。結果見表2。表210種中藥金屬元素與總黃酮的含量測定結果2.3黃酮與元素的模糊聚類分析從測定結果分析，不同中藥的黃酮類化合物與各種元素的含量數據離

13、散，要對不同藥物的藥效的相似性進展比擬，從含量數據上很難說明問題，我們不能以某一元素含量的上下對其藥物的質量作出明確評價，建立模糊聚類分析方法可以把離散的數據標準化處理，可以對藥物的藥效相似性進展定量指標的明確評價。待分類對象是10種藥物樣品，每種樣品選擇鈣、鎂、鐵、鉻、鎳、錳、銅、鋅、總黃酮的含量共9個因素程度作為分析指標，將各樣品總黃酮及金屬元素含量數據以數據極差法進展統計指標的標準化處理1，即Xij=Xij-XijinXijax-Xijin處理結果見表3。以數量積法算出衡量被分類對象S1S10間相關系數，確定論域上的模糊矩陣R。Rij=1i=j1ikXjk10K=1ij為使0rij1，取

14、=3，得矩陣R論域上的模糊矩陣RR=10.1480.0940.1740.2550.0970.1180.2000.0600.15110.6870.4910.3220.9520.9690.3670.2370.56010.4500.2870.4630.4370.2950.3610.23610.3520.3660.4390.2980.2850.22310.1850.2200.3400.1930.30010.9930.4090.1480.39110.2310.2550.35010.1930.23210.0481用最大樹的方法進展聚類分析，得相應因素的最大樹圖(略)。取r=0.55，去掉權重低于0.55的

15、值，聚類為：2，3，6，7，10;1;4;5;8;9相類似藥物：澤蘭，川芎，燈盞花，回心草，銀杏葉。取r=0.65，去掉權重低于0.65的值，聚類為：2，3，6，7;1;4;5;8;9;10相類似藥物：澤蘭，川芎，燈盞花，回心草。取r=0.90，去掉權重低于0.90的值，聚類為：2，6，7;1;4;5;8;9相類似藥物：澤蘭，燈盞花，回心草。通過矩陣R分析得各藥物聚類分析相關系數，發現相似系數較大的藥物，藥物成效的相似程度也較大。燈盞花與回心草，r=0.993，燈盞花具有活血舒筋，止痛消積等成效，明顯擴張微細血管，降低血管阻力，增加腦血流量;回心草具有疏通血管，改善血液循環之作用。澤蘭與回心草

16、，r=0.969，澤蘭具有活血化瘀，通經活絡之成效;澤蘭與燈盞花，r=0.952;澤蘭與川芎，r=0.687;澤蘭與銀杏葉，r=0.560。聚類分析方法對中藥的藥效關系作出了定量指標的明確評價，對于中醫中藥的現代化研究，中藥的質量控制，尤其是新型中藥制劑的開發，將具有重要的指導意義。3討論中藥中的黃酮類化合物是中藥的有效成分之一2，能使SD活性增加，進步機體的抗氧化才能，增加心腦血管血流量，去除自由基，促進腦神經細胞的恢復。微量元素是中藥重要的物質根底，臨床微量元素研究說明，鈣參與維持體內細胞的內外平衡，維持神經細胞的膜的生物興奮性，傳遞信息功能;鎂能穩定核糖體和核酸的構造，改善心肌能量，有效

17、去除氧自由基3;錳參與人體氧化復原和磷酸化過程4，是SD的重要組成局部，在增強機體免疫功能方面具有重要作用;鎳對冠脈血流量具有重要影響，擴張冠狀動脈收縮，減少心肌缺氧反響;銅是血紅蛋白的活化劑，體內銅缺乏會引起心肌細胞氧化代謝紊亂，誘發動脈硬化。中藥中的總黃酮與微量元素具有協同作用，尤其是銅、錳、鉻等元素可以有效進步中藥的藥物藥效功能。微量元素作為中藥的質量控制和研究中藥的藥理藥效根據是因為中藥微量元素的含量與分布與中藥的品種親密相關。不同屬的藥材，不同種類的中藥從土壤中選擇性的吸收各種元素的才能不同，同種類藥材由于具有一樣的生長基因，藥物在生長過程中從土壤中攝取和積累在藥材內的微量元素在種類

18、、分布及含量上下有一定的規律。結合中藥的有機有效成分，利用這種規律研究中藥的藥理藥效機制，研究控制中藥質量的方法，是推動中藥產業現代化的有效途徑。本研究選取了黃芪等10種治療心腦血管疾病的常用中藥，分析了藥物中總黃酮與鈣、鎂、鐵、鉻、鎳、錳、銅、鋅金屬元素的含量，運用模糊聚類分析方法研究了藥物中黃酮類化合物與微量元素與藥物療效的相關性，相關系數r=0.55時，有5種藥物聚類相似;相關系數r=0.65時，有4種藥物聚類相似;相關系數r=0.90時，有3種藥物聚類相似。藥物中含有豐富的金屬元素和較高的總黃酮，相關系數較大的藥物其藥物療效的相似性較大。提醒藥物中黃酮、微量元素的含量與藥物療效具有親密關系，研究結果為討論中藥的質量評價提供了一種新的方法，為進一步研究中藥黃酮類化合物及微量元素與藥物作用機理的關系提供了科學的根據。用原子吸收分光光度法測定藥用植物中微量元素5是當前的一種重要課題，本實驗采用原子吸收分光光度法測定了黃芪等10種中藥中a，g，Fe，r，Ni，n，u，Zn的含量，結果說明，本方法準確快速，靈敏度高，精細度好，對于測定藥用植物中的微量元素含量，