1、電解質(zhì)與藥物對離體蛙心活動的影響第1頁，共30頁，2022年，5月20日，0點27分，星期六【實驗目的】掌握Straub離體蛙心的灌流方法 觀察高鉀、低鈣、高鈣、腎上腺素、乙酰膽堿與酸、堿等對離體心臟活動的影響第2頁，共30頁，2022年，5月20日，0點27分，星期六蛙心起搏點：靜脈竇蛙心的正常節(jié)律活動的維持需要一個適宜的理化性質(zhì)：任氏液心臟的正?；顒佑匈囉趦?nèi)環(huán)境的相對穩(wěn)定，改變灌流液的成分可引起其活動的改變。心肌生理特性：興奮性、自律性、傳導性、收縮性【實驗原理】第3頁，共30頁，2022年，5月20日，0點27分，星期六影響心肌生理特性的主要因素1. 興奮性：靜息電位與閾電位的差距；Na

2、+通道的性狀2. 自律性：最大復極電位與閾電位的差距；4期自動去極的速度3. 傳導性：動作電位0期去極的速度和幅度4. 收縮性：細胞外鈣離子濃度第4頁，共30頁，2022年，5月20日，0點27分，星期六對心肌活動的影響：（1）離子：K+、Ca2+（2）腎上腺素（adr）和乙酰膽堿（ACh）（3）酸和堿：第5頁，共30頁，2022年，5月20日，0點27分，星期六1.離體蛙心的制備2.離體蛙心固定3.加樣及觀察記錄【實驗方法與步驟】第6頁，共30頁，2022年，5月20日，0點27分，星期六（1）記錄正常蛙心波動曲線（幅度、頻率）（2）更換為無鈣任氏液（0.65%NaCl ）（3）加2%CaC

3、l2 12滴（4）加1%KCl 12滴（5）加1:10000的adr 12滴（6）加1:100000的ACh 12滴（7）加2.5%的NaHCO312滴，有變化后加3%的乳酸半滴，待效應明顯后，再加12滴2.5NaHCO3， 第7頁，共30頁，2022年，5月20日，0點27分，星期六【注意事項】1.蛙心插管一定要插入心室，勿用力過大損傷心肌2.結(jié)扎靜脈時，要遠離靜脈竇3.換能器頭端應向下傾斜以免液體進入換能器4. 實驗各項目，一旦出現(xiàn)變化就應立即用任氏液換洗（沖洗3次）；必須待心功能恢復正常后方能進行下一步實驗5.蛙心插管液面應保持恒定以保證心臟固定的負荷第8頁，共30頁，2022年，5月2

4、0日，0點27分，星期六6.隨時滴加任氏液在心臟表面使之保持濕潤7.滴加藥品和換取任氏液須及時標記，以便觀察分析8.吸任氏液和吸蛙心插管內(nèi)廢液的滴管應區(qū)分專用，不可混淆使用，以免影響實驗結(jié)果9.藥物作用不明顯時，可適量增加，密切觀察藥物劑量添加后的實驗結(jié)果 【注意事項】第9頁，共30頁，2022年，5月20日，0點27分，星期六【實驗結(jié)果】項目心率收縮幅度（收縮力）無鈣任氏液3%CaCl2 1%KCl1：10000腎上腺素1：100000Ach2.5%NaHCO33%乳酸（“鈣僵”）(甚至停于舒張期)第10頁，共30頁，2022年，5月20日，0點27分，星期六【討論】1.無鈣任氏液無鈣任氏液

5、灌流 細胞外液Ca2+ 心肌細胞動作電位期間 Ca2+ 內(nèi)流 心肌細胞胞漿Ca2+ 心肌收縮力收縮 第11頁，共30頁，2022年，5月20日，0點27分，星期六細胞外液Ca2濃度升高工作細胞動作電位期間Ca2內(nèi)流增加肌漿Ca2濃度增加興奮收縮耦聯(lián)增強心肌收縮力增強2. 3%CaCl2慢反應細胞4期自動除極化速度增加自律性增加心率增快第12頁，共30頁，2022年，5月20日，0點27分，星期六細胞外液K濃度升高K抑制Ca2內(nèi)流收縮力Ca2內(nèi)流興奮收縮耦聯(lián)削弱3. 1%KCl浦氏細胞最大復極電位去極，If電流激活程度自律性IK1通道通透性， K易于外流，對抗了If內(nèi)流的舒張去極第13頁，共30

6、頁，2022年，5月20日，0點27分，星期六如果任氏液中鉀離子濃度明顯增高，蛙心會處于什么狀態(tài)？當細胞外顯著高鉀時，細胞膜內(nèi)外鉀濃度梯度減小，使得靜息電位絕對值減小至55mv，使得鈉通道失活，從而使心肌細胞興奮性喪失，心臟可停搏在舒張狀態(tài)（當細胞外輕度高鉀時，膜內(nèi)外K濃度梯度，靜息電位， RP與TP的差，興奮性）第14頁，共30頁，2022年，5月20日，0點27分，星期六心肌細胞膜1受體結(jié)合adr肌漿網(wǎng)對Ca2通透性動作電位期間Ca2內(nèi)流性收縮力細胞膜對Ca2通透性4期自動除極化速度自律性心率4.腎上腺素（adr）Ca2與肌鈣蛋白親和力，肌漿網(wǎng)攝鈣速度舒張速度復極期肌漿Ca2濃度降低速度第

7、15頁，共30頁，2022年，5月20日，0點27分，星期六心肌細胞膜M受體結(jié)合細胞膜對K通透性增加自律性降低心率減慢細胞膜對Ca2通透性下降動作電位期間Ca2內(nèi)流減少心肌收縮力降低竇房結(jié)細胞最大復極電位絕對值增大4期K+外流增加ACh抑制鈣通道5. 乙酰膽堿 （Ach）第16頁，共30頁，2022年，5月20日，0點27分，星期六6.酸和堿乳酸和2.5%NaHCO3：H+進入心肌內(nèi)膜后，可降低鈣離子與肌鈣蛋白的親和力，促使鈣離子的解離，收縮力。 NaHCO3中和了乳酸，解除了鈣離子與肌鈣蛋白親和力的抑制，收縮力恢復 。第17頁，共30頁，2022年，5月20日，0點27分，星期六Thank

8、you!第18頁，共30頁，2022年，5月20日，0點27分，星期六 母液 成分 20%NaCl(ml)10% KCl(ml)10%CaCl2(ml)5%NaHCO3 (ml)1%NaH2PO4 (ml)葡萄糖 (g)蒸餾水加至(ml)任氏液 32.5 1.4 1.2 4.0 1.0 2.01000任氏液的組成成分表第19頁，共30頁，2022年，5月20日，0點27分，星期六破壞腦和脊髓第20頁，共30頁，2022年，5月20日，0點27分，星期六第21頁，共30頁，2022年，5月20日，0點27分，星期六 蛙心的解剖結(jié)構第22頁，共30頁，2022年，5月20日，0點27分，星期六第23頁，共30頁，2022年，5月20日，0點27分，星期六第24頁，共30頁，2022年，5月20日，0點27分，星期六AB蛙心插管在心室收縮時插入心室第25頁，共30頁，2022年，5月20日，0點27分，星期六第26頁，共30頁，2022年，5月20日，0點27分，星期六蛙心夾在