1、高效液相色譜法測(cè)定喘平滴丸中東莨菪堿的含量李曉燕，馮中，吳燕紅，朱盛山，霍務(wù)貞【摘要】目的創(chuàng)立測(cè)定喘平滴丸中東莨菪堿含量的高效液相色譜法。要領(lǐng)接納ZRBAXSB-184.6250，5為色譜柱，以甲醇0.001lL-1磷酸7030活動(dòng)相含0.02lL-1十二烷基硫酸鈉為活動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)：216n，流速：1.0lin-1，外標(biāo)法定量。結(jié)果東莨菪堿在0.02850.285g范疇內(nèi)呈線性干系，要領(lǐng)接納率為98.86%n=6，RSD為2.54%。結(jié)論此法輕便、正確，重復(fù)性好，可用于喘平滴丸中東莨菪堿含量測(cè)定。【關(guān)鍵詞】高效液相色譜法喘平滴丸東莨菪堿喘平滴丸由麻黃、洋金花等中藥構(gòu)成的中藥復(fù)方制劑。此中洋金

2、花的重要化學(xué)身分東莨菪堿，有明顯的中樞按捺、麻醉作用，一樣平常劑量就能消除感情沖動(dòng)，使人產(chǎn)生倦意，進(jìn)入無(wú)夢(mèng)的就寢狀態(tài)，產(chǎn)生“忘記等癥，嚴(yán)峻者嗜睡、昏倒，末了死于呼吸中樞按捺或麻木，呼吸和循環(huán)衰竭。方中洋金花處方量固然比例小，為了該復(fù)方制劑的用藥寧?kù)o，本課題組對(duì)該復(fù)方制劑中微量的東莨菪堿舉行含量監(jiān)控，為該藥的寧?kù)o利用提供數(shù)據(jù)參考。1儀器與試藥1.1儀器Agilent1100高效液相色譜儀系列(G1311A四元泵、G1313A主動(dòng)進(jìn)樣器、G1314A-VD檢測(cè)器)；色譜柱:ZRBAXSB-184.6250，5，SN:USL017850，BP211D電子闡發(fā)天平(Sartrius)。1.2試藥甲醇為

3、色譜純?cè)噭疄槿羲瑒e的試劑均為闡發(fā)純。氫溴酸東莨菪堿比擬品由中國(guó)藥品生物成品檢定所提供(批號(hào)：100049-202208)，喘平滴丸3批本所研制，批號(hào)：20220516，20220518，20220520。2要領(lǐng)與結(jié)果2.1溶液的制備2.2色譜條件及體系實(shí)用性試驗(yàn)色譜柱為ZRBAXSB-184.6250，5；活動(dòng)相甲醇0.001lL-1磷酸活動(dòng)相含0.02lL-1十二烷基硫酸鈉70：30，檢測(cè)波長(zhǎng)216n，流速1.0lin-1。在上述色譜條件下，別離汲取比擬品溶液12l，供試品溶液和陰性比擬溶液各3l，注入液相色譜儀，色譜圖見(jiàn)圖13。供試品與氫溴酸東莨菪堿比擬品雷同的保存時(shí)間有一對(duì)應(yīng)色譜

4、峰，陰性比擬溶液在對(duì)應(yīng)位置無(wú)滋擾；以氫溴酸東莨菪堿盤(pán)算，理論塔板數(shù)在3000以上。分散度1.5，故此色譜條件滿意測(cè)定要求。2.3線性干系觀察細(xì)密汲取上述比擬品溶液0.0214gl-11，2，4，8，12，16，20l進(jìn)樣，測(cè)定其峰面積積分值，以進(jìn)樣量Xg為橫坐標(biāo)，峰面積積分值Y為縱坐標(biāo)，繪制尺度曲線，氫溴酸東莨菪堿回歸方程為：Y743.95X+3.47867，r0.9999。結(jié)果表白氫溴酸東莨菪堿在0.02850.285g范疇內(nèi)線性干系精良。2.4細(xì)密度實(shí)行細(xì)密汲取供試品溶液3l，按上述色譜條件重復(fù)進(jìn)樣6次，測(cè)定其峰面積，RSD=0.71，表白細(xì)密度精良。2.6不變性實(shí)行取新制備的供試品溶液批

5、號(hào)20220516，按上述色譜條件于0，1，2，4，8，12h別離進(jìn)樣3l，測(cè)定其峰面積，RSD為1.73，表白本品在12h內(nèi)不變性較好。2.7接納率實(shí)行細(xì)密稱取含量的同一批樣品20220516，含量為0.08495%6份，每份8丸，別離細(xì)密參加0.8l的東莨菪堿比擬品溶液0.285gl-1，按供試品溶液制備項(xiàng)下操縱，末了定容為10l，依法測(cè)定含量，盤(pán)算接納率。結(jié)果見(jiàn)表1。表1氫溴酸東莨菪堿接納率測(cè)定結(jié)果略3討論3.1供試品純化要領(lǐng)的挑選本品處方中洋金花比例較低，目的身分東莨菪堿含量低，且復(fù)方中相干身分滋擾，以是檢測(cè)東莨菪堿顛末了多個(gè)實(shí)行純化富集：起首將樣品溶解后別離以氨水飽和的醋酸乙酯、氨水

6、飽和的正丁醇、氨水飽和的氯仿作洗脫溶劑洗脫過(guò)氧化鋁柱，比擬創(chuàng)造飽和氯仿洗脫液得到的峰分散度和基線較好，但接納率低。然后又別離以氨水飽和的醋酸乙酯、氨水飽和的正丁醇、氨水飽和的氯仿舉行萃取3次15，15，10l，歸并萃取液，比力創(chuàng)造飽和氯仿萃取的樣品基線安穩(wěn)，色譜峰分散度最好，且接納率到達(dá)檢測(cè)要求。3.2檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇在選定的色譜條件下，注入東莨菪堿比擬品、樣品和陰性樣品，用DAD檢測(cè)器檢測(cè)，讀取DAD光譜掃描圖，創(chuàng)造東莨菪堿比擬品和樣品的東莨菪堿洗脫峰在210220n處有較大汲取，而陰性樣品在該段汲取弱，以是確定檢測(cè)波長(zhǎng)為216n。3.3活動(dòng)相的選擇HPL法測(cè)定氫溴酸東莨菪堿,已報(bào)道的活動(dòng)相有

7、0.07lL-1磷酸鈉溶液(用磷酸調(diào)pH值至6.0,含17.5lL-1十二烷基硫酸鈉)-乙腈(21)1，2，甲醇-水(5347,水中含20lL-1醋酸鈉,0.02%三乙胺,0.3%四氫呋喃,pH為6.86)3,甲醇-水(4060,水中含0.02lL-1醋酸鈉,0.02%三乙胺,用冰醋酸調(diào)pH至6.0)4等。本文曾別離以甲醇-磷酸鹽緩沖液、乙腈0.03三乙胺以差異體積比及差異pH值、水乙腈含0.1三乙胺磷酸以差異體積比等為活動(dòng)相舉行測(cè)試,均未到達(dá)滿意的分散結(jié)果。后改用反相離子對(duì)活動(dòng)相，經(jīng)屢次挑選創(chuàng)造:甲醇0.001lL-1磷酸7030活動(dòng)相含0.02lL-1十二烷基硫酸鈉改進(jìn)了分散結(jié)果,使得性子相似的別的滋擾身分能在反相體系中彼此到達(dá)基線分散。【參考文獻(xiàn)】1國(guó)度藥典委員會(huì).中國(guó)藥典，部S.北京：化學(xué)產(chǎn)業(yè)出書(shū)社，2022:188.2于立軍.HPL法測(cè)定差異產(chǎn)地洋金花中東莨菪堿的含量J.中國(guó)藥房,2022,1824：18