1、名詞解釋：Gene Engineering基因工程：在體外把核酸分子（DNA的分離、合成）插入載體分子，構(gòu)成遺傳物質(zhì)的 新組合（重組DNA），引入原先沒(méi)有這類分子的受體細(xì)胞內(nèi)，穩(wěn)定地復(fù)制表達(dá)繁殖，培育符合人們需要的 新品種（品系），生產(chǎn)人類急需的藥品、食品、工業(yè)品等。HGP人類基因組計(jì)劃：是一項(xiàng)規(guī)模宏大，跨國(guó)跨學(xué)科的科學(xué)探索工程。其宗旨在于測(cè)定組成人類染色體（指單倍體）中所包含的30億個(gè)堿基對(duì)組成的核苷酸序列，從而繪制人類基因組圖譜，并且辨識(shí)其載有的 基因及其序列，達(dá)到破譯人類遺傳信息的最終目的。Gene Therapy基因治療：是指將外源正常基因?qū)氚屑?xì)胞，取代突變基因，補(bǔ)充缺失基因或關(guān)閉異

2、常基 因，達(dá)到從根本上治療疾病的目的。.基因診斷：是利用重組DNA技術(shù)作為工具，直接從DNA水平監(jiān)測(cè)人類遺傳性疾病的基因缺陷。Vector載體：是把外源DNA（目的基因）導(dǎo)入宿主細(xì)胞，使之傳代、擴(kuò)增或表達(dá)的工具。plasmid質(zhì)粒：是生物細(xì)胞內(nèi)固有的、能獨(dú)立于宿主染色體而自主復(fù)制、并被穩(wěn)定遺傳的一類核酸分子。 shuttle vector穿梭載體：是指含有兩個(gè)親緣關(guān)系不同的復(fù)制子，能在兩種不同的生物中復(fù)制的。質(zhì)粒不相容性;同種的或親緣關(guān)系相近的兩種質(zhì)粒不能同時(shí)穩(wěn)定地保持在一個(gè)細(xì)胞內(nèi)的現(xiàn)象，稱為質(zhì)粒不相 容性.multiple cloning sites，MCS多克隆位點(diǎn)：DNA載體序列上人工合

3、成的一段序列，含有多個(gè)限制內(nèi)切酶識(shí)別 位點(diǎn)。能為外源DNA提供多種可插入的位置或插入方案。a-互補(bǔ)：LacZ 基因的互補(bǔ)：lacZ基因上缺失近操縱基因區(qū)段的突變體與帶有完整的近操縱基因區(qū)段的8 -半乳糖苷酶基因的突變體之間實(shí)現(xiàn)互補(bǔ)。粘性末端：指DNA分子的兩端具有彼此互補(bǔ)的一段突出的單鏈部分，這一小段單鏈部分和同一分子的另一 端或其它分子末端的單鏈部分如果互補(bǔ)的話，則能通過(guò)互補(bǔ)堿基之間的配對(duì)，形成雙鏈。并在DNA連接酶 的作用下，使同一 DNA分子的兩端連接成環(huán)狀，或使兩個(gè)分子連成一大的線狀分子。cos位點(diǎn)：當(dāng)XDNA進(jìn)入細(xì)菌細(xì)胞后，便迅速通過(guò)黏性末端配對(duì)形成雙鏈環(huán)狀的DNA分子，這種黏性末端

4、 結(jié)合形成雙鏈的區(qū)域稱為cos位點(diǎn)。Cosmid考斯質(zhì)粒：由于入-DNA包裝蛋白只識(shí)別粘性末端的一小段順序cos區(qū)。將這段DNA與質(zhì)粒連在一 起，構(gòu)建的重組質(zhì)粒,可裝載DNA（3245.5kb）。pBR322：是一個(gè)人工構(gòu)建的重要質(zhì)粒，有萬(wàn)能質(zhì)粒之稱。它是由pSF2124、pMBl及pSC101三個(gè)親本質(zhì) 粒經(jīng)復(fù)雜的重組過(guò)程構(gòu)建而成的。phagemid or phasmid噬菌粒：是一類人工構(gòu)建的含有單鏈?zhǔn)删w包裝序列、復(fù)制子以及質(zhì)粒復(fù)制子、克隆 位點(diǎn)、標(biāo)記基因的特殊類型的載體。人造染色體載體：利用染色體的復(fù)制元件來(lái)驅(qū)動(dòng)外源DNA片段復(fù)制的載體稱之為。BAC細(xì)菌人工染色體：是指一種以F質(zhì)粒為基

5、礎(chǔ)建構(gòu)而成的細(xì)菌染色體克隆載體，常用來(lái)克隆150kb左右 大小的DNA片段，最多可保存300kb個(gè)堿基對(duì)。YAC酵母人工染色體:是一種能夠克隆長(zhǎng)達(dá)400Kb的DNA片段的載體，含有酵母細(xì)胞中必需的端粒、著絲 點(diǎn)和復(fù)制起始序列。工具酶;基因工程中分子水平的操作，是依賴于一些重要的酶（如限制性核酸內(nèi)切酶，連接酶等）作為工 具對(duì)DNA進(jìn)行切割和拼接，我們把這些有關(guān)的酶統(tǒng)稱為基因工程進(jìn)行切割和拼接，我們把這些有關(guān)的酶 統(tǒng)稱為基因工程工具酶。R-M System限制與修飾系統(tǒng)：限制性內(nèi)切酶將侵入細(xì)菌體內(nèi)的外源DNA切成小片斷，細(xì)菌自身的DNA 堿基被甲基化酶甲基化修飾所保護(hù)，不能被自身的限制性內(nèi)切酶識(shí)別

6、切割。同裂酶：又稱異源同序酶或異源同工酶，是指識(shí)別位點(diǎn)與切割位點(diǎn)均相同的不同來(lái)源的酶識(shí)別相同序列.同尾酶：是指識(shí)別位點(diǎn)不同，但切出的DNA片段具有相同的末端序列的一類酶，同尾酶的切割產(chǎn)物互 為粘性末端，并能互補(bǔ)連接，但連接后二個(gè)酶的識(shí)別序列均被破壞。star activity星活性:在極端非標(biāo)準(zhǔn)條件下，限制酶能切割與識(shí)別序列相似的序列，這個(gè)改變的特殊性稱星 活性。Klenow酶；是大腸桿菌聚合酶I的大片斷。它保留了 DNA聚合酶I的53聚合酶活性和35外切酶 活性，但缺少完整的Klenow酶的53外切酶活性。Klenow酶的35外切酶活性保證了其合成DNA時(shí) 的準(zhǔn)確性。T-vector： T載

7、體：聚合酶鏈反應(yīng)產(chǎn)物的克隆運(yùn)載體，線性化后兩側(cè)3,端各多出一個(gè)脫氧胸苷酸（T）。由于 PCR產(chǎn)物兩側(cè)3端通常含單個(gè)脫氧腺苷酸（A）,與T載體之間的A-T互補(bǔ)性可提高PCR產(chǎn)物克隆的效率。凝膠電泳：用瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠等作為支持介質(zhì)的區(qū)帶電泳法稱為凝膠電泳。probe探針：帶有能檢測(cè)的標(biāo)記物的DNA或RNA叫探針。探針標(biāo)記：使DNA或RNA帶有可檢測(cè)的標(biāo)記物的過(guò)程叫探針標(biāo)記。目前常用的探針標(biāo)記包括化學(xué)法 和酶法兩種。雜交：用標(biāo)記的DNA或RNA探針 對(duì)附著于膜上的DNA進(jìn)行雜交來(lái)檢測(cè)這些被轉(zhuǎn)移的進(jìn)行雜交來(lái)檢 測(cè)這些被轉(zhuǎn)移的DNA片段，與探針有同源性的DNA片段在膜上的位置可以通過(guò)特定的檢

8、測(cè)方法.Northern雜交：是指將RNA分子變性及電泳分離后、從電泳凝膠:轉(zhuǎn)移到固相支持物上進(jìn)行核酸雜交的 方法。31.Southern雜交：是進(jìn)行基因組DNA特定序列定位的通用方法。其基本原理是:具有一定同源性的兩條核 酸單鏈在一定的條件下，可按堿基互補(bǔ)的原則特異性地雜交形成雙鏈。PCR:是模仿細(xì)胞內(nèi)發(fā)生的DNA復(fù)制過(guò)程進(jìn)行的，在體外由酶催化合成特異性進(jìn)行的，在體外由酶催 化合成特異性DNA片段。這種方法以DNA互補(bǔ)鏈聚合反應(yīng)互補(bǔ)鏈聚合反應(yīng)為基礎(chǔ)，通過(guò)DNA變性、引 物與模板DNA 一側(cè)的互補(bǔ)序列復(fù)性雜交、耐熱性DNA聚合酶催化引物延伸等過(guò)程的多次循環(huán)，獲得待 擴(kuò)增的持異性等過(guò)程的多次循環(huán)

9、，獲得待擴(kuò)增的持異性DNA片段。熒光定量PCR：是通過(guò)熒光染料或熒光標(biāo)記的特異性的探針，對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行標(biāo)記跟蹤，實(shí)時(shí)在線監(jiān) 控反應(yīng)過(guò)程，結(jié)合相應(yīng)的軟件可以對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行分析，計(jì)算待測(cè)樣品模板的初始濃度。生物芯片或基因芯片：它們是DNA雜交探針技術(shù)與半導(dǎo)體工業(yè)技術(shù)相結(jié)合的結(jié)晶。該技術(shù)系指將大量 探針?lè)肿庸潭ㄓ谥С治锷虾笈c帶熒光標(biāo)記的DNA樣品分子進(jìn)行雜交，通過(guò)檢測(cè)每個(gè)探針?lè)肿拥碾s交信號(hào) 強(qiáng)度進(jìn)而獲取樣品分子的數(shù)量和序列信息蛋白芯片：是以蛋白質(zhì)代替DNA作為檢測(cè)對(duì)象，與在mRNA水平上檢測(cè)基因表達(dá)的基因芯片不同， 它直接在蛋白質(zhì)水平上檢測(cè)基因表達(dá)模式，在基因表達(dá)研究中比基因芯片有著更加直接的應(yīng)用前景

10、。gene pool基因庫(kù):一個(gè)種群全部個(gè)體所帶有的全部基因的總和.Gene library基因文庫(kù)：從特定生物個(gè)體中分離的全部基因，這些基因以克隆的形式存在（人工構(gòu)建）。 根據(jù)構(gòu)建方法的不同，基因文庫(kù)分為：基因組文庫(kù)（含有全部基因）和cDNA文庫(kù)（含有全部蛋白質(zhì)編碼 的結(jié)構(gòu)基因）基因組文庫(kù)：把某種生物基因組的全部遺傳信息通過(guò)克隆載體貯存在一個(gè)受體菌克隆子群體中，這個(gè)群 體即為這種生物的基因組文庫(kù)。cDNA librarycDNA文庫(kù)：將生物某一組織細(xì)胞中的總mRNA分離出來(lái)作為模板，在體外用逆轉(zhuǎn)錄酶合 成互補(bǔ)的雙鏈cDNA，然后接到合適的載體上，轉(zhuǎn)入到宿主細(xì)胞后形成的所有克隆。Tow-Hyb

11、rid System酵母雙雜交系統(tǒng)：研究蛋白質(zhì)相互作用的高靈敏度的分子遺傳學(xué)新工具、新方法； 用來(lái)分離新的基因或新的能與一種巳知的蛋白質(zhì)相互作用的蛋白質(zhì)及其編碼基因。重組率:是指重組型個(gè)體占總個(gè)體數(shù)的百分率.重組率=含有外源DNA的重組分子數(shù)/載體分子總數(shù).感受態(tài):細(xì)胞處于能夠吸收DNA的狀態(tài)稱感受態(tài)。Competent Cell感受態(tài)細(xì)胞：理化方法誘導(dǎo)細(xì)胞，使 其處于最適攝取和容納外來(lái)DNA的生理狀態(tài)，即指細(xì)菌細(xì)胞在一定的生長(zhǎng)階段，自身或通過(guò)人為處理而具 有攝取外源DNA并使其基因型和表現(xiàn)型發(fā)生相應(yīng)變化的能力。protoplast原生質(zhì)體:脫去細(xì)胞壁的細(xì)胞叫原生質(zhì)體transformation轉(zhuǎn)化：是某一基因型的細(xì)胞從周圍介質(zhì)中吸收來(lái)自另一基因型的細(xì)胞的DNA而使它的基 因型和表現(xiàn)型發(fā)生相應(yīng)變化的現(xiàn)象。Transduction轉(zhuǎn)導(dǎo)：由噬菌體將一個(gè)細(xì)胞的基因傳遞給另一細(xì)胞的過(guò)程。它是細(xì)菌之間傳遞遺傳物質(zhì)的 方式之一。其具體含義是指一個(gè)細(xì)胞的DNA或RNA通過(guò)病毒載體的感染轉(zhuǎn)移到另一個(gè)細(xì)胞中。T-DNA :也叫三螺旋DNA，是指一種由三