1、PAGE PAGE 9高中生物實驗(shyn)復習實驗名稱實驗材料及主要儀器、試劑實驗步驟（復習時主要注意順序）注意事項及相關問題的說明還原糖的鑒定蘋果汁、梨汁等，試管、斐林試劑，水浴裝置制備樣液，配制斐林試劑混合水浴加熱觀察顏色變化（1）斐林試劑的使用方法（2）含糖量多不一定是還原糖（3）注意組織樣液的顏色干擾脂肪的鑒定花生子葉等，蘇丹或蘇丹，試管或玻片、顯微鏡制備樣液加蘇丹觀察，或作切片染色漂洗制片用顯微鏡觀察不一定必需使用顯微鏡，若特別指出觀察細胞內的脂肪，必需使用顯微鏡蛋白質的鑒定蛋清、豆漿等，試管、雙縮脲試劑制備樣液加雙縮脲A液混勻加雙縮脲B液混勻觀察不需加熱，反而加熱會引起蛋白質變

2、性附著在試管壁上不易洗刷觀察DNA和RNA的分布口腔上皮、洋蔥鱗片葉內表皮等，甲基綠吡羅紅染液，玻片、顯微鏡，鹽酸，水浴裝置載玻片上滴生理鹽水放入口腔上皮細胞烘干放在8%的鹽酸的小燒杯中30水浴保溫蒸餾水沖洗吸水紙吸干加甲基綠吡羅紅染液吸去多余染液加蓋玻片，顯微鏡觀察（1）鹽酸的作用：改變細胞膜的通透性，加速染色劑進入細胞；使染色體中的DNA和蛋白質分離，有利于DNA和染色劑結合（2）注意生理鹽水和口腔上皮細胞的放置順序（3）注意甲基綠吡羅紅試劑的使用方法（4）觀察時，就找染色均勻、顏色較淺的部位觀察葉綠體蘚類葉、黑藻葉、菠菜葉，玻片，顯微鏡載玻片上滴清水放進葉片加蓋玻片，觀察使用蘚類葉、黑藻

3、葉時，用的是整片葉，使用菠菜葉時，取帶葉肉細胞的下表皮，目的是觀察葉肉細胞觀察線粒體口腔上皮細胞，健那綠染液載玻片上滴健那綠染液放進口腔上皮細胞加蓋玻片，觀察（1）健那綠染液是活體染色劑（2）不能用葉肉細胞作實驗材料，因為有葉綠體，干擾觀察研究膜透性的模擬實驗漏斗，半透膜，燒杯，蔗糖溶液，清水，硫酸銅溶液漏斗口上密封半透膜燒杯中放清水，漏斗內裝蔗糖溶液和幾滴紅墨水漏斗放入燒杯，觀察液面高度和漏斗內外顏色變化；另一裝置用硫酸銅溶液代替蔗糖溶液作對照（1）也可以用碘液和淀粉溶液分別放在燒杯和漏斗中觀察（2）注意半透膜對不同分子的影響觀察質壁分離和復原洋蔥鱗片葉外表皮，蔗糖溶液，清水，玻片，顯微鏡（

4、1）載玻片上滴清水放洋蔥鱗片葉外表皮加蓋玻片，低倍鏡觀察（2）從蓋玻片一側滴加蔗糖溶液，另一側用吸水紙吸，反復幾次低倍鏡觀察（3）從蓋玻片一側滴清水，另一側用吸水紙吸，反復幾次顯微鏡觀察（1）第2、3步的操作稱為引流法，應在顯微鏡載物臺上操作，不能取下（2）實驗的三步觀察都應使用低倍鏡，目的是能看到更多的細胞探究酵母菌的呼吸方式酵母菌，葡萄糖溶液，錐形瓶、玻璃管，NaoH溶液、澄清石灰水、溴麝香草酚藍水溶液、重鉻酸鉀溶液組裝通氣和密閉兩套實驗裝置反應一段時間檢測有無二氧化碳產生，檢測有無酒精產生（1）密閉裝置應先反應一段時間后再連接、反應、檢測（2）通氣裝置可在NaOH錐形瓶后再連接一個澄清石

5、灰水錐形瓶，檢測二氧化碳的吸收情況綠葉中色素的提取和分離菠菜葉、研砵、試管、燒杯、濾紙，無水乙醇、層析液，二氧化硅、碳酸鈣（1）選取菠菜葉，剪碎加二氧化硅、碳酸鈣、無水乙醇研磨過濾（2）剪濾紙條，劃濾液細線放入層液中層析觀察結果（1）本實驗分兩大步（提取和分離），需要特別注意，兩步的原理要清楚（2）無水乙醇（或其它溶劑）與層析液的區分（3）注意各種試劑的作用，能描述由于試劑使用不當引起的結果（以水代替無水乙醇，提取液幾乎無色；未加二氧化硅，提取液淺綠色；未加碳酸鈣，提取液淺綠色或其它顏色，無葉綠素色素帶或色淺、帶細；濾液細線接觸了層析液，不層析，層析液變綠）（4）能準確描述實驗結果（出現四條色

6、素帶，自上而下依次是胡蘿卜素、葉黃素、葉綠素a、葉綠素b）細胞大小與物質運輸的關系含酚酞的瓊脂，NaOH溶液將含酚酞的瓊脂塊切成不同大小的正方體放在NaOH溶液一段時間后取出，分析NaOH擴散的體積占整個瓊脂塊的比注意擴散速率與物質運輸效率的區別：在不同的瓊脂塊中，NaOH的擴散速率相等，但運輸效率與相對表面積成正相關（與體積成反相關）觀察根尖細胞的有絲分裂洋蔥，玻片、顯微鏡，15%的鹽酸、95%的酒精，龍膽紫（或醋酸洋紅）切取根尖在鹽酸和酒清混合液中解離清水漂洗龍膽紫染色制片觀察（1）酒精的作用是固定；（2）解離的目的是讓細胞相互分離開；（3）制片的具體步驟是加上蓋玻片后再加一片載玻片，輕壓

7、后取下載玻片進行觀察；（4）步驟不完整或時間控制不當的后果：解離時間短，不能均勻壓成單層細胞，時間長，難從培養皿中取出；漂洗時間短或未漂洗，著色淺或未著色；染色時間短同漂洗時間長，染色時間長，其它區域也可著色現象（5）結果分析：看到的是死細胞，不同時期細胞數目與該時期長短成正比觀察細胞的減數分裂蝗蟲精母細胞減數分裂固定裝片，顯微鏡顯微鏡觀察制作固定裝片的實驗材料最好用動物精巢，也可以用植物的花粉，不適合用雌性生殖器官，原因是其中的生殖細胞少且卵巢中的卵母細胞只到MII中期低溫誘導染色體加倍洋蔥，玻片，顯微鏡，冰箱，卡諾氏液，鹽酸、酒精，改良苯酚品紅染液4冰箱中培養36h卡諾氏液固定酒精漂洗鹽酸

8、解離清水漂洗改良苯酚品紅染液染色制片，觀察（1）觀察時先用低倍鏡找到染色體形態較好的分裂相，視野中既有正常的二倍體細胞，又有染色體加倍的細胞，用高倍鏡觀察染色體加倍的細胞（2）可設計在常溫條件培養的對照實驗調查常見的人類遺傳病調查遺傳方式，在患者家系中調查；調查發病率，應在人群中隨機調查，應選擇發病率較高，容易區分的遺傳病。為了保證調查的群體足夠大，小組調查的數據應在班級和年級中匯總。探究植物生長調節劑對扦插枝條生根的作用常見植物生長旺盛的一年生枝條，蒸餾水、生長素類似物預實驗：設置濃度梯度較大的一系列的生長素類似物溶液，測出最適濃度的大致范圍在預實驗基礎上設置濃度梯度的一系列生長素類似物溶液

9、，測出最適濃度實驗結果只能反映某一種生長素類似物對某種特定植物的作用的最適濃度，不能代表所有的植物和所有的生長素類似物或生長素，也不能代表該類似物對該植物的其它作用。模擬尿糖的測定原理：葡萄糖試紙是一種酶試紙，由葡萄糖氧化酶、過氧化氫酶和某種無色的化合物固定于濾紙上制成。當尿液滴加到酶試紙上時，尿液中的葡萄糖在葡萄糖氧化酶的催化作用下生成葡萄糖酸和過氧化氫，過氧化氫在酶的催化作用下形成水和原子氧，原子氧可以將試紙上無色的化合物氧化成有色化合物，使試紙呈現特定的顏色，再與標準比色卡比對，即可知道尿樣中葡萄糖的含量。探究培養液中酵母菌數量的動態變化酵母菌、無菌馬鈴薯培養液或肉湯培養液，試管、血球計

10、數板、顯微鏡培養酵母菌定期（每天一次）取樣計數統計、分析觀察計數的過程：加蓋玻片在蓋玻片邊緣加培養液讓培養液處行滲入用濾紙吸去多余培養液待細胞沉降后觀察計數。（1）對培養液中的酵母菌計數采用抽樣檢測的方法；取出的樣品用血球計數板計數（2）計數方法：計數一個小方格內的酵母菌數量計算蓋玻片下0.1mm內的酵母菌數量計算10mL培養液中的酵母菌數量（3）取樣前，要對試管震蕩；若酵母菌數量太多，需要稀釋；每次取樣時要進行重復實驗土壤中動物類群豐富度的研究取樣器，誘蟲器，吸蟲器取樣采集小動物觀察和分類豐富度的調查常用的方法有記名計數法和目測估計法（1）取樣時要撥去表層落葉（2）利用避光、避熱的特點，采集

11、到的小動物如果用于培養，試管中應放濕棉球，如果用于制作標本，試管中放酒精（3）簡易采集法是用解剖針撥找小動物，同時用放大鏡觀察，較大的小動物用包著紗布的鑷子取出，較小的用吸蟲器采集。吸蟲器吸一玻璃管在試管內的一端用紗布包裹（4）觀察動物時，最好用實體鏡。若用普通顯微鏡，可在4倍物鏡和5倍目鏡下觀察。探究水族箱中群落的演替實驗原理：在有限的空間內，依據生態系統原理，將生態系統具有的基本成分進行組織，構建一個人工微生態系統是可能的。但同時，這個人工生態系統的穩定性是有條件的，也可能是短暫的，它會發生群落的演替。實驗過程：制作一個生態缸，放在室內溫度和光照適宜的地方，每天觀察一次生物種類和數量的變化

12、，并做好記錄。DNA的粗提取和鑒定雞血、洋蔥等，2mol/L NaCl溶液，洗滌劑、食鹽，95%酒精，二苯胺，水浴裝置雞血細胞液中加蒸餾水攪拌，過濾，收集濾液在濾液中加入NaCl溶液，使其濃度為2mol/L過濾，收集濾液向濾液中加水，使NaCl溶液濃度為0.14mol/L過濾，取沉淀物向沉淀物中加2mol/L NaCl溶液，使DNA溶解加95%冷酒精，使DNA析出用玻璃棒取出放在2mol/L NaCl溶液中，加二苯胺，水浴加熱，觀察顏色變化（1）這個過程中教材中的第一種方案，原理是DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同（注意曲線）以及DNA和蛋白質在酒精中的溶解度不同，DNA在酒精中溶解度

13、低，低溫下溶角度更低。（2）若采用方案二和方案三，在第一次過濾后實施，方案二的原理是酶具有專一性，方案三的原理是在6075條件下蛋白質發生變性，而DNA不會。方案二和三最后也需要用冷酒精進行提取。說明(shumng)：（1）關于酶的兩個實驗表中未列出，復習(fx)時要作為重點內容，不但要注意實驗過程和操作步驟，更需要注意實驗中變量的控制，包括自變量控制和無關變量控制，以及不同實驗(shyn)中因變量的觀察方法。（2）黑體字的三個實驗是我們用的人教版教材中沒有的，但考綱有要求，可以作為參考，理解其實驗原理及基本步驟。生物實驗中顏色反應的總結1.斐林試劑檢測可溶性還原糖原理(yunl)：還原糖+菲

14、林試劑磚紅色(hngs)沉淀注意：菲林試劑的甲液和乙液要混合均勻后方可使用，而且是現用現配，條件是需要(xyo)加熱。應用：檢驗和檢測某糖是否還原糖；不同生物組織中含糖量高低的測定；在醫學上進行疾病的診斷，如糖尿病、腎炎。2.蘇丹、蘇丹檢測脂肪原理：蘇丹+脂肪橘黃色；蘇丹+脂肪紅色注意：脂肪的鑒定需要用顯微鏡觀察。應用：檢測食品中營養成分是否含有脂肪。3.雙縮脲試劑檢測蛋白質原理：蛋白質+雙縮脲試劑紫色注意：雙縮脲試劑在使用時，先加A液再加B液，反應條件不需要加熱。應用：鑒定某些消化液中含有蛋白質；用于劣質奶粉的鑒定。4.碘液檢測淀粉和觀察動植物細胞的基本結構的染色劑原理：淀粉+碘液藍色；碘液

15、能使動植物細胞著色。注意：這里的碘是單質碘，而不是離子碘。應用：檢測食品中營養成分是否含有淀粉；驗證光合作用產生淀粉；在觀察動植物細胞基本結構細胞膜、細胞質、細胞核時用碘液做染色劑，使細胞核染上顏色便于觀察。5.DNA的染色與鑒定染色原理：DNA+甲基綠綠色應用：可以顯示DNA在細胞中的分布鑒定原理：DNA+二苯胺藍色應用：用于DNA粗提實驗的鑒定試劑6.吡羅紅使RNA呈現紅色原理：RNA+吡羅紅紅色應用：可以顯示RNA在細胞中的分布。7. 臺盼藍使死細胞染成藍色原理：正常的活細胞，細胞膜結構完整具有選擇透過性能夠排斥臺盼藍，使之不能夠進入胞內；死細胞或細胞膜不完整的細胞，胞膜的通透性增加，可

16、被臺盼藍染成藍色。應用：區分活細胞和死細胞；檢測細胞膜的完整性。8.線粒體的染色(rns)原理(yunl)：健那綠染液是專一性染線粒體的活細胞染料，可以使活細胞中的線粒體呈現藍綠色，而細胞質接近無色。應用：可以(ky)用高倍鏡觀察細胞中線粒體的存在。9.酒精的檢測原理：橙色的重鉻酸鉀溶液在酸性條件下與酒精發生化學反應，變成灰綠色。應用：探究酵母菌細胞呼吸的方式；制作果酒時檢驗是否產生了酒精；檢查司機是否酒后駕駛。10.CO2的檢測原理：CO2可以使澄清的石灰水變混濁，也可使溴麝香草酚藍水溶液由藍變綠在變黃。應用：根據石灰水混濁程度或溴麝香草酚藍水溶液變黃的時間長短，可以檢測酵母菌培養液中CO2

17、的產生情況。11.染色體（或染色質）的染色原理：染色體容易被堿性染料（如龍膽紫溶液、醋酸洋紅溶液、改良苯酚品紅染液）染成深色。應用：用高倍鏡觀察細胞的有絲分裂；觀察低溫誘導植物細胞染色體數目變化；植物花藥離體培養時，可以通過染色鏡檢來確定其中的花粉是否處于適宜離體培養的發育期。12.吲哚酚試劑與維C溶液呈褪色反應原理：吲哚酚即2，6-二氯酚靛酚鈉，其水溶液為藍紫色，維C具有還原性，能將其褪色。維生素C溶液在中性條件下可使吲哚酚試劑由藍色變成無色，在酸性條件下可使吲哚酚試劑由藍色變成粉紅色。也可以用氯化鐵溶液代替吲哚酚試劑，維生素C溶液可把黃色的氯化鐵溶液還原成無色的氯化亞鐵溶液。應用：可用于檢

18、測食品營養成分中是否含有維生素C。13.亞硝酸鹽的檢測出現玫瑰紅原理：在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發生重氮化反應后，與N-1-萘基乙胺鹽酸鹽結合形成玫瑰紅色染料。應用：將顯色反應后的樣品與已知濃度的標準液進行目測比較，可以大致估算出泡菜中亞硝酸鹽的含量。14.脲酶的檢測原理：細菌合成的脲酶可以將尿分解成氨，氨會使培養基的堿性增強，使PH升高，從而使酚紅指示劑變紅。應用：在以尿素為唯一氮源的培養基加入酚紅指示劑，培養某種細菌后，看指示劑變紅與否可以鑒定這種細菌能否分解尿素。15.伊紅美藍檢測(jin c)大腸桿菌原理：在伊紅美藍培養基上，大腸桿菌的代謝產物(chnw)（有機酸）與伊紅

19、美藍結合使菌落呈深紫色。應用：用濾膜法測定水中大腸桿菌(d chn n jn)的含量。16.剛果紅檢測纖維素分解菌原理：剛果紅是一種染料，它可以與像纖維素這樣的多糖物質形成紅色復合物，但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發生這種反應。當在含有纖維素的培養基中加入剛果紅時，剛果紅能與培養基中的纖維素形成紅色復合物。當纖維素被纖維素分解菌分解后，剛果紅-纖維素的復合物就無法形成，培養基中會出現以纖維素分解菌為中心的透明圈。應用：篩選纖維素分解菌。17.植物花粉細胞核的染色原理：在做月季的花藥離體培養實驗時，選擇合適的花粉發育時期也是提高誘導成功率的重要因素，一般在單核靠邊期花藥培養成功率最高。選擇花藥

20、時，一般通過鏡檢來確定其中的花粉是否處于適宜的發育期。確定花粉發育時期的最常用的方法有醋酸洋紅法(花粉細胞核內有染色體，染色體主要由DNA和蛋白質組成，醋酸洋紅為堿性染色劑，染色體易被堿性染料染色。通過染色，可以確定細胞核為單核期，還是雙核期，還可以確定其花粉的發育是單核居中期還是單核靠邊期)。但是，某些植物的花粉細胞核不易著色，需采用焙花青-鉻礬法，這種方法能將花粉細胞核染成藍黑色。應用：月季花藥離體培養時，通過染色鏡檢確定花粉是否處于適宜的發育期。不同濃度的酒精及鹽酸在高中生物實驗中的應用使用酒精的實驗濃度作用原理脂肪的鑒定50%洗去浮色蘇丹是弱酸性染料，易溶于體積分數為50%酒精土壤中動

21、物類群豐富度的研究70%防腐劑酒精在體積分數為70%時，對于細菌有強烈的殺傷作用，可以作防腐劑微生物的培養、組織培養、果酒和果醋的制作消毒體積分數為70%的酒精，能夠順利地滲入到細菌體內，吸收細菌蛋白的水分,使其脫水變性凝固而失去功能觀察植物細胞的有絲分裂95%解離時固定細胞分裂相用質量分數為15%的鹽酸和體積分數為95%的酒精11混合，使細胞的原生質凝固，不發生變化，固定細胞分裂相，以盡可能保持原來的結構供觀察低溫誘導染色體加倍洗去多余的試劑卡諾氏液可溶于體積分數為95%的酒精中DNA的粗提取與鑒定提取含雜質較少的DNADNA不溶于酒精，尤其是體積分數為95%的冷凍酒精，而細胞中的某些物質（

22、蛋白質等）可以溶解于酒精。 生物組織中還原糖的鑒定、比較過氧化氫酶和Fe3+的催化效率等需要加熱的實驗燃燒加熱酒精是富含能量的有機物，燃燒能釋放大量的熱量葉綠體中色素的提取與分離100%無水酒精提取色素色素是有機物，能溶解在有機溶劑中，各色素在無水酒精中的溶解度較大，且酒精無毒，方便操作（一）體積分數為50%的酒精 1.1 作用(zuyng)：洗去浮色。 1.2 原理(yunl)：蘇丹是弱酸性染料，易溶于體積(tj)分數為50%酒精。 1.3 應用：脂肪的鑒定實驗。在該實驗中，用蘇丹對花生子葉薄片染色后，在薄片上滴12滴體積分數為50%的酒精溶液，可以洗去被染玻片標本上的蘇丹染液浮色。 （二）

23、體積分數為95%的酒精 2.1 作用： 解離； 析出提取含雜質較少的DNA。 2.2 原理： 解離原理：用質量分數為15%的鹽酸和體積分數為95%的酒精11混合，能使組織中的細胞相互分離開來； 析出提取含雜質較少的DNA的原理：DNA不溶于酒精，尤其是體積分數為95%的冷凍酒精，而細胞中的某些物質可以溶解于酒精。 2.3 應用 觀察植物細胞的有絲分裂； DNA的粗提取與鑒定。 （三）體積分數為75%的酒精 3.1 作用：消毒殺菌。 3.2 原理： 體積分數為75%的酒精，能夠順利地滲入到細菌體內，吸收細菌蛋白的水分,使其脫水變性凝固而失去功能，以達到消毒殺菌的目的。高于體積分數為75%濃度的酒精與細菌接觸時，就可能使得菌體表面迅速凝固，形成一層薄膜，阻止了酒精繼續向菌體內部滲透，待到適當時機，薄膜內的細胞可能將薄膜沖破而重新復活。在此高濃度下，酒精迅速凝固蛋白質的作用往往隨著其濃度升高而增強，因此，其消毒殺菌的效果也就越差。若酒精的濃度低于75，也因不