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文檔簡介
1、 HYPERLINK / FDA沙門氏菌檢驗標準中文版(一)U.S. Department of Health and Human Services U.S. Food & Drug AdministrationCenter for Food Safety & Applied NutritionBacteriological Analytical Manual April 2003 沙 門 氏 菌 檢 測FDA分析手冊(2003年3月)第5章章節內容1、 簡介2、 設備和材料3、 培養基和試劑4、 樣品的制備5、 沙門氏菌的分離培養6、 沙門氏菌的鑒定7、 快速檢測方法(附錄1)8、 參考文獻
2、簡介在第8版的BAM手冊中,沙門氏菌的檢測方法有了幾個改變。第一個改變是RV培養基的廣泛使用,即可用于檢測含沙門氏菌量高的食品,又可于檢測含沙門氏菌量低的食品,往常的版本中,RV培養基僅用于蝦類的檢測。依據AOAC反復研究的結果,RV培養基即可用于檢測含沙門氏菌量高的食品,又可于檢測含沙門氏菌量低的食品。除口香糖外的所有食品,RV培養基替代了SC培養基。此外,RV培養基取代了必須含有活性干酵母的LST肉湯培養基。TTB肉湯接著用于第二種選擇性增菌培養基,包括口香糖在內的食品,在檢測含菌量高的食品時需進行43培養;在檢測含菌量低的食品時需進行35培養。第二個改變是關于冷藏食品前增菌和低水份食品選
3、擇性增菌培養的時刻為72小時以內,如此,樣品檢測的時刻最遲星期三或星期四能夠開始,周末也不用加班。第三個改變是縮短了在LIA斜面上的培養時刻,在往常的版本(BAM-7)中,TSI和LIA斜面在35培養的時刻分不為242h和482h。未公布的一些資料表明,48小時后觀看LIA斜面結果是沒有任何診斷價值。對193個LIA斜面進行試驗,培養242h后,所有的斜面都給出了正確的結果。再培養24h后,試驗的結果沒有什么重大的改變。因此,TSI和LIA斜面培養基現在改為培養242h。第四個改變是蛋殼表面滅菌步驟的改變。在往常的版本(BAM-7)中,蛋殼表面滅菌的方法是在0.1%的HgCl2溶液中浸泡1h,
4、然后在70%的乙醇溶液中浸泡30分鐘。HgCl2對人體是有害的,依據環境愛護組織的要求進行處理,費用是特不昂貴的。在新版的手冊(BAM-7)中,蛋殼表面的消毒只需通過浸泡在含0.1%SDS的次氯酸鈉溶液(含Cl-200PPM)中30分鐘。第五個改變是蛋類樣品的制備。在檢測前,蛋的內容物(蛋黃和蛋白)需進行完全混勻。之后,取25ml加入含硫酸鐵的胰酪胨大豆肉湯中。本版中,制定了口香糖的檢測方法。口香糖樣品和增菌肉湯以1:9的比例進行混合,得到的混合物特不粘,不易被吸管吸出。另外添加纖維素酶時,容易被吸管吸出。由于最近桔子汁相關事件的發生,其檢驗方法也己制定出,被檢的桔子汁包括經巴氏消毒和未經巴氏
5、消毒的。從選擇性平板上挑菌落講明更明白和科學。假如在選擇性平板上沒有可疑的典型菌落,建議挑取幾個非典型菌落接種到TSI和LIA培養基上。由于在過去的幾年里,FDA的科學家們從一些食品中,特不是從海產品中分離出沙門氏菌,其中4%左右在選擇性平板是非典型菌落。最后,自成BAM-7發行以來,差不多制定出6種培養基的使用講明。包括3種選擇性培養基(BS瓊脂、HE瓊脂和XLD瓊脂)和3種比較新的培養基(EF-18、XLT、Rambach 瓊脂)。我們的實驗結果證實,用一種或幾種新的培養基來取代BAM中推舉的培養基是不理想的。因些,我們一直保留下來。A、設備和材料1、 攪拌器和無菌攪拌杯2、 無菌500M
6、L廣口螺口三角瓶、無菌500ML長頸三角瓶、無菌250ML燒杯、無菌玻璃漏斗、無菌采樣器3、 無菌玻璃涂布捧或塑料涂布捧4、 電子天平,精度0.1g,最大量稱2000g5、 電子天平,精度5mg,最大量稱120g6、 培養箱:3527、 冰箱:428、 水浴箱:4919、 循環的、溫度可調的水浴箱:430.210、循環的、溫度可調的水浴箱:420.211、無菌藥匙或其它合適的工具:用于稱樣品12、無菌培養皿:15X100MM,玻璃或一次性的13、1ml無菌吸管,刻度0.01ml、5ml和10ml無菌吸管,刻度0.1ml14、接種針和接種環15、無菌試驗試管或培養試管:16X150MM和20X1
7、50MM血清學鑒定管:10X75MM或13X100MM16、試管架17、旋轉混合器18、無菌剪刀、大剪刀、解剖刀及鑷子19、燈:用于觀看生化反應20、電爐21、PH試紙:PH值6-8,最大變色范圍在0.4PH單位22、PH計23、28X37CM的無菌塑料袋,易拉口(在第23-24節中,檢測蛙腿和兔體時用)24、塑料燒杯:能耐高溫高壓,用于振蕩培養過程中,固定塑料袋B、培養基和試劑1、 乳糖肉湯(M74)2、 脫脂奶粉(M111)3、 SC肉湯(M134)4、 TTB肉湯(M145)5、 RV培養基(M132)6、 XLD瓊脂(M179)7、 HE瓊脂(M61)8、 BS瓊脂(M19)9、 TS
8、I瓊脂(M149)10、色氨酸肉湯(M164) 11、胰酪胨大豆肉湯(M154)12、含硫酸鐵的胰酪胨大豆肉湯(M186)13、月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯(M76)14、胰酪胨示胨大豆肉湯(M160)15、MR-VP肉湯(M104)16、西蒙氏枸櫞酸鹽培養基M13817、尿素肉湯(M171)18、尿素肉湯(快速)(M172)19、丙二酸鈉培養基(M92)20、LIA培養基(M89)21、賴氨酸脫羧酶肉湯(M87)22、動力培養基(M103)23、KCN培養基(M126)24、苯酚紅糖類發酵肉湯(M121)25、紫色糖類發酵肉湯(M130)26、麥康凱瓊脂(M91)27、營養肉湯(M114)28、
9、BHI肉湯(M24)29、5%木瓜蛋白酶溶液(M56a)30、1%纖維素酶溶液(M187)31、月示胨羊血瓊脂基礎(M166)32、通用前增菌肉湯(UPM,M188)33、無水亞硫酸鉀粉末34、200ppm次氯酸鈉溶液,含0.1%SDS(R12a)35、70%乙醇溶液(R23)36、靛基質試劑(R38)37、V-P試劑(R89)38、肌酸晶體39、40%KOH溶液(R65)40、1N NaOH溶液(R73)41、1N HCl溶液(R36)42、1%煌綠溶液(R8)43、溴甲酚紫溶液,0.2%(R9)44、甲基紅指示劑(R44)45、無菌蒸餾水46、Tergitol-7(R78)47、Trito
10、n X-100(R86)48、0.85%生理鹽水(R63)49、適當濃度的生理鹽水(R27)50、沙門氏菌多價O血清51、沙門氏菌多價H血清52、沙門氏菌多價O群血清:A、B、C1、C2、C3、D1、D2、E1、E2、E3、E4、F、G、H、I、Vi和其它相應血清53、沙門氏菌Spicer-Edwards H血清C、樣品制備以下的方法均以25g樣品作為抽檢單位,樣品與肉湯培養液的比例為1:9。依照樣品的組成成份不同,添加足夠的肉湯培養基保持1:9的比例,除非專門講明,例如,蛙腿等不需準確稱量檢測的樣品,需采納專門的方法。1、干蛋黃、干蛋白、干全蛋、液體牛奶(脫脂牛奶、含2%脂肪牛奶、全牛奶和脫
11、脂奶粉),粉狀調制食品(蛋糕、甜餅、炸面圈、餅干和面包)、嬰兒食品、口食或軟管進食的含蛋食品。檢驗前的冷凍食品最好不要解凍。假如冷凍樣品必須軟化來獲得待檢部分,盡可能縮短解凍的時刻,使竟爭菌群生長最少,并減小對沙門氏菌的損傷。解凍需在45以下進行,置于能自動控溫的水浴鍋內,不斷攪拌15分鐘或在2-5解凍18小時。無菌稱取25克樣品,放入無菌帶螺旋帽的廣口瓶中(500ML)或其它合適的容器內。關于非粉末狀的樣品,加入225ml無菌的乳糖肉湯;關于粉末狀的樣品,先加入約15ml無菌的乳糖肉湯,用無菌的玻璃捧、藥匙或舌狀器具攪拌,使其均勻懸浮,再加入3份無菌乳糖肉湯,分不為10ml、10ml和190
12、ml,使總量為225ml。充分攪拌,直到樣品完全懸浮,沒有塊狀物。小心地蓋緊瓶蓋,室溫靜置605min。振蕩混勻,用PH試紙測PH值,假如需糾正PH值,用無菌1N NaOH或1N HCl調PH值至6.80.2。把瓶蓋松開約1/4圈,置于35培養242h。以下試驗按D,1-11進行。2、蛋類a、 含殼蛋。用硬刷子洗蛋并使其干燥,然后浸泡于含0.1%SDS的200ppm 氯離子溶液中30分鐘。此溶液的配制如下:取8ml 5.25%的次氯酸鈉溶液和1gSDS加入992ml蒸餾水中溶解即可。這種消毒液需在使用前配制。無菌打開蛋殼置于無菌的容器內,用無菌的藥匙或其它工具混合蛋清和蛋黃。無菌稱取25g于無
13、菌的三角瓶中或其它合適的容器內,加入225ml含硫酸鐵的TSB肉湯(1L TSB中加入35mg硫酸鐵),混勻,室溫靜置605min。振蕩混勻,用PH試紙測PH值,假如需糾正PH值,用無菌1N NaOH或1N HCl調PH值至6.80.2。置于35培養242h。以下試驗按D,1-11進行。b、液全蛋(均勻狀)。無菌稱取25g于無菌的三角瓶或其他適宜的容器內,加入225ml含硫酸鐵的TSB充分搖勻,按上面的方法接著。c、 煮硬的蛋(雞蛋、鴨蛋或其他種類的蛋)。假如蛋殼完整,向上述方法進行消毒,無菌分離蛋殼,弄碎蛋黃和蛋白,稱取25g與無菌的500ml的錐形瓶中或其他的容器內,加入225mlTSB,
14、同時搖勻,按上述方法接著。3、脫脂干奶粉a、 速溶型。無菌稱取25g樣品于無菌的燒杯或其他適宜的容器內,用滅菌的玻璃或紙質的漏斗(用帶卷好以便高壓滅菌)將樣液25ml慢慢注入滅菌的500ml的含225ml的煌綠水的錐形瓶中或其他適宜的容器內,使樣液覆蓋在煌綠水的表面,也可多個25g檢測單位混合倒入含有相應比例煌綠水的容器內,使樣品覆蓋在煌綠水的表面,按每1000ml滅菌蒸餾水中加入2ml2%的煌綠溶液進行配制,將樣品容器室溫靜置605min,旋松塞子,不需混勻和調整PH,35培養242h,按D1-11接著。b、 非速溶。按上述速溶脫脂干奶粉的檢測方法進行,但不同意將多個25g樣品檢測單位混合。
15、4、全脂奶粉。按上述速溶脫脂干奶粉的檢測方法進行,但不同意將多個25g樣品檢測單位混合。5、酪蛋白a、 乳酪。無菌稱取25g樣品于無菌的250ml燒杯或其他適宜的容器內,用滅菌的玻璃或紙質的漏斗(用帶卷好以便高壓滅菌)將樣液25ml慢慢注入滅菌的500ml的含225ml的一般肉湯的錐形瓶中或其他適宜的容器內,使其覆蓋在一般肉湯的表面,也可多個25g檢測單位混合倒入含有相應比例一般肉湯的容器內,使樣品覆蓋在一般肉湯的表面,將樣品容器室溫靜置605min,旋松塞子,不需混勻和調整PH,35培養242h,按D1-11接著。b、 凝乳酪。無菌稱取25g樣品于無菌的250ml燒杯或其他適宜的容器內,用滅
16、菌的玻璃或紙質的漏斗(用帶卷好以便高壓滅菌)將樣液25ml慢慢注入滅菌的500ml的含225ml的乳糖肉湯的錐形瓶中或其他適宜的容器內,使其覆蓋在乳糖肉湯的表面,也可多個25g檢測單位混合倒入含有相應比例乳糖肉湯的容器內,使樣品覆蓋在乳糖肉湯的表面,將樣品容器室溫靜置605min,旋松塞子,不需混勻和調整PH,35培養242h,按D1-11接著。c、 咸乳酪。無菌稱取25g樣品于無菌的帶螺旋帽的廣口瓶中或其他合適的容器內,添加225ml無菌的乳糖肉湯同時混勻,多個25g樣品檢測單位能夠混合,旋緊瓶塞,室溫下靜置605min,然后搖勻,用PH試紙檢測PH,假如必要調PH值至6.80.2。把瓶蓋松
17、開約1/4圈,置于35培養242h。以下試驗接D,1-11進行。6、豆粉。按上述凝乳酪和咸乳酪的方法進行檢測,但多個25g樣品不能混合。7、含蛋制品(面條、蛋卷、空心粉、意大利面條)、干酪、面團、調制色拉(火腿、蛋、雞肉、金槍魚、火雞)、新奇的、冷凍的或干的水果和蔬菜、果仁和甲殼類動物(小蝦、蟹、小龍蝦、大蝦、大龍蝦)和魚。檢測前最好不要解凍,如檢測樣品必須解凍,需在45以下進行,置于能自動控溫的水浴鍋內,不斷攪拌15分鐘或在2-5解凍18小時。無菌稱取25克樣品,放入無菌的均質器內。加入225ml無菌的乳糖肉湯均質2分鐘。再無菌轉移均質混合物于無菌的廣口的帶有旋螺帽的錐型瓶或其它合適的容器中
18、,蓋緊瓶蓋,室溫靜置605min。振蕩混勻,用PH試紙測PH值,假如需糾正PH值,用無菌1N NaOH或1N HCl調PH值至6.80.2。把瓶蓋松開約1/4圈置于35培養242h。以下試驗按D,1-11進行。8、干酵母(活性和無活性酵母)無菌稱取25g樣品于滅菌帶螺旋帽的廣口瓶中(500ml)或其它合適的容器內,加 入225ml滅菌的胰酪胨大豆肉湯,充分混勻形成懸液,蓋緊瓶塞,室溫下靜置60min。搖勻,用PH試紙測PH值,假如需糾正PH值,用無菌1N NaOH或1N HCl調PH值至6.80.2。把瓶蓋松開約1/4圈置于35培養242h。以下試驗按D,1-11進行。9、冷凍和高級混合食品無
19、菌稱取25g樣品于滅菌帶螺旋帽的廣口瓶中(500ml)或其它合適的容器內,加 入225ml滅菌的營養肉湯,充分混勻形成懸液,蓋緊瓶塞,室溫下靜置60min。搖勻,用PH試紙測PH值,假如需糾正PH值,用無菌1N NaOH或1N HCl調PH值至6.80.2。把瓶蓋松開約1/4圈置于35培養242h。以下試驗按D,1-11進行。10、調料a、 黑胡椒、白胡椒、芹菜種子或芹菜葉片、干辣椒粉、紅辣椒、茴香、皺葉歐芹片、迷迭香、芝麻、百里香和蔬菜片。無菌稱取25g樣品于滅菌帶螺旋帽的廣口瓶中(500ml)或其它合適的容器內,加 入225ml滅菌的TSB肉湯,充分混勻形成懸液,蓋緊瓶塞,室溫下靜置60m
20、in。搖勻,用PH試紙測PH值,假如需糾正PH值,用無菌1N NaOH或1N HCl調PH值至6.80.2。把瓶蓋松開約1/4圈置于35培養242h。以下試驗按D,1-11進行。b、 洋蔥片、洋蔥粉和大蒜片。無菌稱取25g樣品于滅菌的帶螺旋帽的廣口瓶或其它合適的容器內,樣品的前增菌培養基用含K2SO4的TSB肉湯(1000mlTSB肉湯中加入5g K2SO4,最終濃度為0.5%),將K2SO4加入TSB肉湯中,分裝每瓶225ml,121高壓滅菌15min,滅菌后,無菌測定其容量。假如必須,調整容量至225ml,將225ml含有K2SO4的TSB加入樣品中混勻,以下按C-10a進行。c、 多香果
21、粉、肉桂、丁香及薄荷調味料目前還沒有方法能夠中和這4種調料的毒性。將它們稀釋至無毒的程度后,再進行檢測。檢測多香果粉、肉桂和薄荷時,樣品與肉湯的比例為1:100,而丁香與肉湯的比例為1:1000;檢驗葉狀調味品時,由因此脫水產品,可汲取部分肉湯,在實際檢測中樣品與肉湯的比例大于1:10,檢測這些調味品時,按以上C-10a進行,保持推舉的樣品與肉湯的比例。11、密餞和糖衣(包括巧克力)無菌操作稱取25g樣品于滅菌的攪拌器內,加入225ml重溶的脫脂奶粉,攪拌2分鐘,再無菌操作移取樣品液到滅菌帶螺旋帽的廣口瓶中(500ml)或其它合適的容器內,蓋緊瓶塞,室溫下靜置605min。搖勻,用PH試紙測P
22、H值,假如需糾正PH值,用無菌1N NaOH或1N HCl調PH值至6.80.2。加入0.45ml1%亮綠水溶液,混勻,把瓶蓋松開約1/4圈置于35培養242h。以下試驗按D,1-11進行。12、椰子無菌操作稱取25g樣品于滅菌帶螺旋帽的廣口瓶中(500ml)或其它合適的容器內,蓋緊瓶塞,室溫下靜置605min。搖勻的攪拌器內,加入225ml乳糖肉湯,攪拌2分鐘,再無菌操作移取樣品液到,用PH試紙測PH值,假如需糾正PH值,用無菌1N NaOH或1N HCl調PH值至6.80.2。加入2.25ml已蒸過的Tergitol-7溶液,混勻。也可用已蒸過的Triton-100。這些表面活性劑要使用最
23、少的量,剛好產生氣泡。Triton-100滴上2-3小滴即可。把瓶蓋松開約1/4圈置于35培養242h。以下試驗按D,1-11進行。13、食品染料和食品色素PH值6.0或以上的染料(10%的水懸浮液),按上述干全蛋方法(以上C-1法)進行檢測。沉淀染料或PH值低于6.0的染料,無菌操作稱取25g樣品,放入滅菌的帶螺旋帽的500ml廣口瓶內,加入225ml不含煌綠的TTB肉湯混勻,蓋緊瓶塞,室溫下靜止605min。用PH計調整PH值至6.80.2,加入2.25ml 1%的煌綠溶液,搖勻,把瓶蓋松開約1/4圈置于35培養242h。以下試驗按D,3-11進行。14、明膠無菌操作稱取25g樣品,放入滅
24、菌的帶螺旋帽的500mL廣口瓶中或其他合適的容器內。加入225mL滅菌的乳糖肉湯和5mL5%明膠酶水溶液。混合均勻,蓋緊瓶蓋在室溫下靜置60分鐘。轉動混勻,用試紙測定pH值。必要時調節pH值至6.80.2。將瓶蓋旋松1/4轉,置35培養242小時。以下試驗按D,1-11進行。15、肉、肉代用品、肉副產品、動物產品、腺體制品和粗粉(魚,肉,骨)無菌操作稱取25g樣品放入滅菌的攪拌器中。加入225mL滅菌的乳糖肉湯,攪拌2分鐘。再無菌操作轉移已攪拌的混合物到滅菌的帶螺旋帽的500mL廣口瓶中或其他合適的容器內。蓋緊瓶蓋在室溫下靜置60分鐘。假如混合物為粉狀,研磨過或已粉碎的,則不用攪拌。不需要攪拌
25、的樣品,加入乳糖肉湯,并充分混勻;蓋緊瓶蓋在室溫下靜置60分鐘。旋動使充分混勻,用試紙測定pH值。必要時調節pH值至6.80.2。總計加入2.25mL已蒸過(15分鐘)的Tergitol-7,混勻。也可用已蒸過(15分鐘)的Triton-100來代替。操縱使用這些表面活性劑劑量,剛剛起泡沫即可。實際用量取決于試驗材料的成分;分析粉狀腺體制品,不需要用表面活性劑。將瓶蓋旋松1/4轉后,將樣品混合物置35培養242小時。以下試驗按D,1-11進行。16、田雞腿(此方法用于國內的和國外的所有田雞腿檢驗)將15對田雞腿放入滅菌塑料袋內,并用滅菌乳糖肉湯浸沒,其比例樣品比乳糖肉湯為1:9(見以上A,23
26、-24)。假如單個腿可能平均重在25g或以上,則只需檢查15對的每對中的一條腿。把袋放入大塑料燒杯內或其它合適的容器中,在機械蕩器上震蕩15min,以4cm(1-1/2in)機械振蕩100次/分鐘。從袋中傾倒出乳糖肉湯于另一個滅菌塑料袋內。加更多的乳糖肉湯,使總量為3500mL。充分混勻,于室溫下靜置60分鐘。必要時調節pH值至6.80.2。再把裝有乳糖肉湯的塑料袋放入塑料燒杯或其它合適的容器內,于35培養242小時。接下去按下面的D,1-11進行。17、野兔骨架(此方法用于國內的和國外的所有的野兔骨架)取3只野兔骨架放入滅菌塑料袋內,并用滅菌乳糖肉湯浸沒,其比例:樣品比乳糖肉湯為1:9(見上
27、述A,23-24),把袋放入大塑料燒杯內或其它合適的容器中,在機械震蕩器上以4cm(1-1/2in)幅度振蕩100次/分鐘,震蕩15min。從袋中傾倒出乳糖肉湯混合物于另一個滅菌塑料袋內,加更多的乳糖肉湯,使總量為3500mL。充分混勻,于室溫靜置60分鐘。必要時用pH試紙調置6.80.2,于35培養242小時。接下去按下面D,1-11進行。18、口香糖無菌操作稱取25g樣品到滅菌燒杯(250mL)或其他合適容器中。制備過濾除菌的1.0%纖維素酶溶液(加1g纖維素酶到99mL無菌水中),用0.45um膜過濾除菌,置于150mL瓶中。(纖維素酶溶液在2-5可保存最長2周時刻)。加入225mL無菌
28、乳糖肉湯和2.25mL無菌1%纖維素酶溶液于500mL無菌帶螺旋蓋的廣口瓶或其他合適容器。用磁力攪拌器劇烈攪拌酶/肉湯混合物時,通過無菌玻璃漏斗迅速倒入25g待檢樣品。旋好瓶蓋,室溫下靜置60分鐘,無須調pH值。旋松瓶蓋,35培養242小時。以下按D,1-11進行。19、桔子汁、蘋果汁(經巴氏消毒或未經巴氏消毒)和果酒(經巴氏消毒)無菌稱取25ml樣品加入到含有225mlUPB肉湯中,放入滅菌的帶螺旋帽的500ml廣口瓶內或其它合適的容器內,蓋緊瓶塞,充分搖勻,室溫下靜止605min。不用調PH值,旋松瓶蓋,35培養242小時。以下按D,1-11進行(按低含量微生物進行處理)。20、豬耳和狗顎
29、類從每個樣品中挑出一片(尺寸小的可挑2-3片)置于無菌的塑料袋中,將塑料袋置于大燒杯中或其它合適的容器內,按1:9的比例(g/L) (見以上A,23-24)加入無菌的乳糖肉湯,浸沒樣品。蓋緊瓶蓋在室溫下靜置60分鐘。旋動使充分混勻,用試紙測定pH值。必要時調節pH值至6.80.2。加入0-1%已蒸過(15分鐘)的Tergitol-7或已蒸過(15分鐘)的Triton-100來代替。操縱使用這些表面活性劑劑量,剛剛起泡沫即可。例如,225ml乳糖肉湯加入最大體積為2.25ml。將樣品混合物置35培養242小時。接下來的試驗按D,1-11進行。D、沙門氏菌的分離培養1、 擰緊瓶蓋并輕輕振蕩培養過的
30、樣品混合物??谙闾牵何?ml樣品液到10ml的SC肉湯中,另取1ml樣品液到10ml TTB肉湯中,混勻。所有其它食品:吸取0.1ml樣品液到10ml的RV培養基中,另取0.1ml樣品液到10mlTTB肉湯中,混勻。2、 選擇性增菌按如下步驟進行:含菌量高的食品:RV培養基在420.2(水浴、循環的、溫度可調)中培養242小時。TTB肉湯在430.2(水浴、循環的、溫度可調)中培養242小時。含菌量低的食品(口香糖除外):RV培養基在420.2(水浴、循環的、溫度可調)中培養242小時。TTB肉湯在352(水浴、循環的、溫度可調)中培養242小時??谙闾牵篠C和TTB肉湯在35培養242小時
31、。3、 混合均勻(假如是試管,渦旋式混合),用3mm直徑的接種環,滿環(10l)劃線接種TTB肉湯于亞硫酸鉍(BS)瓊脂,XLD瓊脂和HE瓊脂平板上。BS瓊脂平板于劃線接種的前一天制備好儲存在室溫暗處。4、 再用3mm直徑的接種環,從RV培養基(樣品為含菌量高的食品和菌量高的食品)和SC肉湯(樣品為口香糖)取滿環(10l),劃線接種于上述平板上。5、 參考官方檢測方法994.04,關于冷藏食品的前增菌和低水份食品的選擇性增菌(僅SC和TTB肉湯)方法。如此樣品的檢測最遲可從星期四開始,周末不用加班工作。6、 把選擇性平板置35培養242小時。7、 檢查平板中可疑沙門氏菌菌落的存在。FDA沙門氏
32、菌檢驗標準中文版(二)典型的沙門氏菌菌落形態:從每個通過242小時培養后選擇性平板上挑取2個或更多個菌落。典型的沙門氏菌菌落如下:a、 在HEKTOEN氏腸道菌(HE)瓊脂上。菌落呈蘭綠至蘭色,帶或不帶黑色中心。許多沙門氏菌培養物可呈現大的光澤黑色中心或幾乎全部黑色的菌落。b、 在木糖賴氨酸去氧膽酸鹽(XLD)瓊脂上. 粉色菌落,帶或不帶黑色中心。許多沙門氏菌培養物可有大的光澤黑色中心或呈幾乎全部黑色的菌落。c、 亞硫酸鉍(BS)瓊脂上。呈褐色,灰色或黑色,有時帶有金屬光澤。菌落周圍的培養基通常開始呈褐色,但伴隨培養時刻的延長而變為黑色,并有所謂的暈環效應。假如典型菌落出現在經242小時培養后
33、的BS瓊脂上,則挑取2個或更多個典型菌落。不論BS瓊脂平板在培養242小時時是否挑取過菌落,BS平板再培養242小時。培養了482小時后,假如BS平板上出現典型菌,則挑取2個或更多個菌落,假如只在通過242小時培養的BS平板上挑取了菌落,接種到三糖鐵瓊脂(TSI)和賴氨酸瓊脂(LIA)上,會呈現非典型反應以至視為培養物中不存在沙門氏菌 。參見下面D.8部分和D.9部分,有關TSI和LIA反應的詳細描述。非典型的沙門氏菌菌落形態:不存在典型的或可疑的沙門氏菌菌落時,按如下步驟檢驗非典型的沙門氏菌菌落。a. HE和XLD瓊脂. 非典型的沙門氏菌在HE和XLD瓊脂上呈黃色菌落,帶或不帶黑色中心。HE
34、和XLD平板經242小時培養后,沒有典型的沙門氏菌菌落,則挑取2個或更多個非典型的沙門氏菌菌落。b. BS瓊脂.某些非典型菌株產生綠色菌落,其周圍培養基略微或不呈暗色。假如BS平板培養242小時后,沒有出現典型菌落,則不挑取任何菌落,讓平板接著培養242小時。假如經482小時培養后,仍沒有典型或可疑的菌落出現,則挑取2個或更多個非典型的菌落。參考的對比培養物除了陽性對比外(典型沙門氏菌),3個附加的沙門氏菌培養物也可用來輔助非典型沙門氏菌在選擇性平板上的獲得,這些對比是乳糖陽性,H2S陽性的沙門氏菌(ATCC12325)和乳糖陰性,H2S陰性的沙門氏菌(ATCC9842),或者乳糖陽性,H2S
35、陰性的沙門氏菌(ATCC29934),這些菌種可從ATCC購買到。8、 用滅菌接種針輕輕地接觸每個菌落中心部位,接種TSI斜面,先在斜面上劃線,再于底層穿刺。不需灼燒接種針,即可接種LIA斜面,先穿刺接種底層兩次,再劃線斜面上。由于賴氨酸脫羧反應需嚴格厭氧條件,因而LIA斜面必須有深的底層(4cm)。將已挑過菌落的選擇性平板于5-8儲存。9、 將TSI和LIA瓊脂斜面于35分不培養242小時。當進行斜面培養時放松試管帽以保持需氧條件,以防止過量的H2S產生。在TSI瓊脂中,典型的沙門氏菌培養物使斜面呈堿性(紅色),底層呈酸性(黃色),產生或不產生H2S(瓊脂變黑色)。在LIA瓊脂中,典型的沙門
36、氏菌培養物其試管底層呈堿性(紫色)反應。只有試管底層呈明顯黃色時才認為有酸性(陰性)反應。不要單純依照其試管底層產生的褪色反應就排除它。在LIA中,大多數沙門氏菌培養物皆產生H2S;一些非沙門氏菌培養物產生磚紅色反應。10、 在LIA瓊脂上所有底層呈堿性反應的培養物,不管其在TSI瓊脂上反應如何,皆應全部保留為可疑的沙門氏菌分離物,并進一步做生化和血清學試驗。在LIA中呈酸性底層反應和在TSI中呈斜面堿性,底層酸性的培養物,均視為可疑的沙門氏菌分離物,應進一步做生化和血清學試驗。在LIA中呈酸性底層和在TSI中呈酸性斜面和酸性底層的培養物,可視為非沙門氏菌培養物而棄去。對所保留的擬定陽性TIS
37、瓊脂培養物,可按下面四,11節敘述的進行檢測,是否為沙門氏菌,包括亞利桑那沙門氏菌。假如TSI中培養物沒有呈現沙門氏菌的典型反應(斜面堿性,底層酸性),再從未擬定陽性的選擇性平板上另外挑取可疑菌落,象上面四,8節所述的接種TSI和LIA斜面。11、 生化和血清學鑒定試驗:a. 從RV培養基(或口香糖中亞硒酸鹽胱氨酸肉湯)劃線分離的選擇性瓊脂平板上所挑取的3個擬定陽性TSI瓊脂培養物和從四硫磺酸鹽肉湯劃線分離的選擇性平板所挑取的3個擬定陽性TSI瓊脂培養物,進行生化和血清學鑒定試驗。b. 如從一組選擇性瓊脂平板未分離出3個擬定陽性的TSI瓊脂培養物,則對其它已分離到的擬定陽性的TSI瓊脂培養物進
38、行生化和血清學鑒定試驗。對所分析的每個25g樣品,至少應檢查6個TSI培養物。E、沙門氏菌的鑒定:1、 混雜培養物. 對呈混雜菌的TSI瓊脂培養物,皆應劃線接種于麥康凱(MC)瓊脂,HE瓊脂,或木糖賴氨酸去氧膽酸鹽(XLD)瓊脂上,于35培養242小時。檢查平板上可疑沙門氏菌存在與否。a. 在麥康凱(MC)瓊脂上:典型菌落呈透明、無色,有時帶有暗色中心。沙門氏菌菌落有時可使培養基中其它細菌所造成的膽鹽沉淀區透明。b. 在HE瓊脂上:見上述四,7ac. 在木糖賴氨酸去氧膽酸鹽(XLD)瓊脂上:見上述四,7b. 按上面的四,7節所述轉種至少2個可疑沙門氏菌菌落到TSI瓊脂和LIA瓊脂斜面上,接下去
39、按上述的四,9節進行鑒定.2、 純培養物:a、 尿素酶試驗(常規)。由每個擬定陽性TSI瓊脂斜面培養物,用滅菌針分不接種生長物到每個尿素肉湯試管中。間或也會有未接種的尿素肉湯管變紫紅色(試驗陽性),因而應包括未接種該肉湯管作為對比,于35培養242小時。b、 可選的尿素酶試驗(快速法)。用3mm直徑接種環,自每一擬定陽性的TSI瓊脂斜面培養物中取2環轉種到快速尿素肉湯管中,370.5水浴中培養2小時。棄去所有呈陽性結果的培養物,保留所有陰性反應的(培養基不變色)培養物,為進一步研究試驗用。3、 血清學多價鞭毛(H)試驗:a、 現在或以后進行多價鞭毛(H)試驗,可按下面五,4節所述進行。從每個尿
40、素酶陰性的TSI瓊脂斜面培養物接種到以下任一項, 1)腦心浸液肉湯,于35培養46小時,直到可見的生長物出現(供當日試驗用),或2)胰胳胨大豆肉湯,于35培養242小時(供次日試驗用)。在各5mL肉湯培養物中加2.5mL甲醛生理鹽水溶液。b、 選兩個以甲醛處理的肉湯培養物同沙門氏菌多價鞭毛(H)抗血清試驗。在1075mm或13100mm血清學試管內,加入0.5mL經合適稀釋的沙門氏菌多價鞭毛(H)抗血清,再加入0.5mL待測抗原進行試驗。并以0.5mL甲醛生理鹽水溶液同0.5mL甲醛處理的抗原混合好,制成鹽水對比,將各混合物于48-50水浴培養,每隔15分鐘觀看一次初步結果,并于1小時讀數最終
41、結果。陽性反應:在甲醛肉湯培養物與血清混合物中凝集,而在甲醛肉湯培養物與甲醛鹽水管中(對比管)不凝集。陰性反應:在甲醛肉湯培養物與血清混合物中(試驗混合物)不凝集,在對比管中也不凝集。非特異反應:在試驗混合物與對比管中皆出現凝集。對出現這類結果的培養物,需用“SpicerEdwards”氏抗血清做進一步試驗。4、 Spicer-Edwards血清試驗用那個實驗可代替多價H血清試驗,也可用來關于多價H血清反應不明顯的培養物的進一步的實驗。如E、3b所述,進行Spicer-Edwards抗原實驗,當結果是H血清陽性時,需按E、5a-c進行生化實驗;假如兩個通過甲醛處理的培養物是陰性的,按E、3a得
42、到的四個額外的培養物進行血清學實驗,假如可能,獲得兩個陽性培養物,按E、3a進行附加的生化實驗,假如所有的來自于樣品的尿素酶陰性反應的TSI培養物的H血清實驗是陰性的,按E、5a-c進行附加的生化實驗。5、 尿素酶陰性培養物試驗. a、 賴氨酸脫羧酶肉湯。假如所做的LIA試驗是中意的,則不需重復試驗。假如培養物呈現可疑的LIA反應,則以賴氨酸脫羧酶肉湯進行賴氨酸脫羧酶的最終鑒定。將少量可疑沙門氏菌陽性TSI瓊脂斜面培養物接種至賴氨酸脫羧酶肉湯管。將試管帽旋緊,置于35培養482小時,至少每隔24小時檢查一次。沙門氏菌因堿性反應,則使整個培養基呈紫色。陰性反應則使整個培養基呈黃色。假如培養基出現
43、褪色現象(即不呈紫色也不呈黃色),可加入幾滴0.2%溴甲酚紫溶液,然后再觀看試管的反應。b、 酚紅衛茅醇肉湯或含有0.5%衛茅醇的紫色肉湯基礎液。由TSI瓊脂上取少量培養物接種至肉湯管中。將試管帽放松。置于35培養482小時,但24h后觀看反應。大多數沙門氏菌呈陽性實驗結果,表現為內部發酵管中產氣和培養基變酸(黃色)。產酸為陽性反應。陰性反應為倒管內無氣體產生。整個培養基呈紅色(有酚紅指示劑)或紫色(有溴甲酚紫指示劑)。c、 胰蛋白胨(或色氨酸)肉湯。將少量TSI瓊脂培養物接種到肉湯管中,置35培養242小時,并按以下進行試驗。1) 氰化鉀(KCN)肉湯。從24h色氨酸培養物移取3mm接種環一
44、環轉種到KCN肉湯管中。將管口加熱,以便加塞時蠟封良好。35培養482小時,但24h后觀看反應。有生長者(有渾濁)為陽性。大多數沙門氏菌在此培養基中不能生長,即無渾濁現象。2) 丙二酸鹽肉湯。用3mm接種環移取24h色氨酸肉湯培養物,轉種到丙二酸鹽肉湯管中。因間或會出現未接種的丙二酸鹽肉湯在存放期間變蘭(陽性反應),因此應有未接種的丙二酸鹽肉湯管作對比。35培養482小時,但在培養24h后觀看反應。大多數沙門氏菌培養物在此肉湯中為陰性反應(綠色或不變色)。3) 吲哚試驗。轉種5mL24h色氨酸肉湯培養物到空試管中,加入0.2-0.3mLKovacs氏試劑,大多數沙門氏菌培養物為陰性反應(在肉湯
45、表面無深紅色)。并記錄呈桔色和粉色變化的中間型為反應。4) 沙門氏菌血清學鞭毛(H)試驗。假如未做多價鞭毛(H)試驗或Spicer-Edwards氏鞭毛(H)試驗,可任選其一。5) 吲哚試驗陽性和血清學鞭毛(H)試驗陰性;或者KCN試驗陽性和賴氨酸脫羧酶試驗陰性的非沙門氏菌任一培養物予以去除。6、 沙門氏菌血清學菌體(O)試驗。(用已知沙門氏菌培養物同所有抗血清做予試驗)。a、 多價菌體(O)試驗:用蠟筆在每個玻璃或塑料平板(15100mm)內側劃出2個約12cm的區域??墒褂蒙唐坊姆謪^載玻片,用2mL0.85%生理鹽水乳化從24-48hTSI斜面或者更好是胰胨血瓊脂基礎(無血),用3mm接
46、種環移取培養物。加1滴菌懸液于用蠟筆標出的每一矩形區域的上部。這一區域的下部加1滴生理鹽水。在另一區域加1滴沙門氏菌多價菌體(O)抗血清。再以潔凈滅菌的接種環或針將一個區域內的菌懸液和生理鹽水混合。在另一區域內菌懸液和抗血清液混合。將混合液前后傾斜移動1min,并在良好照明下對著黑暗背景觀看,任何程度的凝集都視為陽性反應。多價菌體(O)試驗結果分類如下:陽性反應:混合物試驗凝集,而在鹽水對比中不凝集。陰性反應:混合物試驗不凝集,在鹽水對比中也不凝集。非特異性反應:混合物試驗和鹽水對比中皆凝集,需按Edwards和Ewing氏的腸桿菌科鑒定中所描述的進一步作生化學和血清學試驗。b、 菌體(O)群
47、試驗. 如有各群菌體(O)抗血清,包括Vi,代替沙門氏菌多價菌體(O)抗血清,按上述五,5a試驗。對Vi凝集反應陽性的可參照官方分析分析方法的967.28B部分專門處理這些培養物。與菌體(O)群抗血清呈陽性凝集的培養物,作該菌體(O)群陽性記錄;不能與菌體(O)群抗血清發生反應者,做該菌體(O)群試驗陰性記錄。7、補充生化試驗. 按表1中1-11項試驗,對培養物呈典型沙門氏菌反應者,進行沙門氏菌分類。如在25g分析樣品中有一個TSI培養物被劃為沙門氏菌,則該25g分析樣品的其他TSI培養物就無需進一步試驗。沙門氏菌鞭毛(H)試驗陽性表明有沙門氏菌抗原,但不具有沙門氏菌生化特性者,應對培養物作純
48、分離(按上述五、1),按上述五、2開始重新做試驗。對表1中1-11項目,不呈典型沙門氏菌反應的培養物做以下補充試驗以最終推斷為非沙門氏菌。a、 酚紅乳糖肉湯或紫色乳糖肉湯。1) 從每個尚未分類的24-48hTSI瓊脂斜面上挑取少許培養物,接種到肉湯管中,35培養482h。并在24h后開始觀看變化。陽性反應:產酸(黃色)和在倒立發酵管內產氣。只要產酸就視為陽性反應。大多數沙門氏菌為陰性結果。即在倒立發酵管內沒有氣體形成,和整個培養基呈紅色(含酚紅指示劑)或紫色(含溴甲酚紫指示劑)。2) 除培養物在TSI瓊脂斜面上產酸和在LIA中呈陽性反應,或丙二酸鹽肉湯試驗呈陽性的培養物外,棄去乳糖試驗陽性的非
49、沙門氏菌培養物。為了證明他們是否為亞利桑那菌,需對這些培養物作進一步試驗。b.酚紅蔗糖肉湯或紫色蔗糖肉湯。按上述五,7a-1所敘述的程序進行,除那些培養物在TSI瓊脂斜面上產酸和在LIA中呈陽性反應者外,呈蔗糖試驗陽性結果者皆作為非沙門氏菌棄去。c. MR-VP肉湯.對每個未分類的TSI瓊脂斜面上可疑沙門氏菌培養物,挑取少許,接種到此肉湯管中,置于35培養482h。1) 在室溫下按下述進行Voges-Proskauer氏(VP)試驗:移取1mL48h培養物于試管中,并將剩余的MR-VP肉湯于35再培養48h。加入0.6mL-萘酚溶液于試管中并振搖;加40%KOH溶液0.2mL,并振搖。為了加快
50、反應速度,加少許肌酸結晶。4h后觀看結果:陽性反應為整個培養基由粉紅色轉變至紅寶石色。絕大多數沙門氏菌VP試驗陰性,即整個肉湯不呈粉紅至紅色變化。2) 甲基紅試驗:吸取經96h培養的MR-VP肉湯5mL于試管中,加入5-6滴甲基紅指示劑,立即觀看結果。絕大多數沙門氏菌培養物呈陽性結果,即培養基呈彌散性紅色。明顯的黃色為陰性結果。對KCN陽性,V-P試驗陽性及甲基紅試驗為陰性培養物,皆可作為非沙門氏菌棄去。d. Simmons氏枸櫞酸鹽瓊脂. 從未分類的TSI瓊脂斜面上,用接種針沾取培養物,劃線接種于枸櫞酸鹽瓊脂斜面上,并穿刺底層。置于35培養962h,按下述方法讀取結果。陽性反應:能生長,通常
51、伴隨顏色由綠色變蘭色。大多數沙門氏菌培養物為枸櫞酸鹽陽性。陰性反應:不生長或微弱生長,而且不變色。8、培養物的分類:沙門氏菌培養物應具有表1反應模式。凡培養物具有表2所列任何一小項結果,為非沙門氏菌則棄去。對任何培養物,當不能按表1的分類表,明確地鑒定為非沙門氏菌屬,或也不能依照表2所列試驗反應從沙門氏菌屬中排除者,可按Edwards和Ewings氏的“腸桿菌科鑒定”所述的補充試驗進一步分類。如2個TSI培養物皆不能按生化試驗證實分離物為沙門氏菌時,則對同一個25g檢驗樣品中保留的尿素酶陰性TSI培養物,按五,5開始進行生化學試驗。FDA沙門氏菌檢驗標準中文版(三)表1.沙門氏菌的生化和血清學
52、反應 反應和底物 結果 沙門氏菌的反應(a) 陽性 陰性 1.葡萄糖(TSI) 黃色底部 紅色底部 + 2.賴氨酸脫酸酶(LIA) 紫色底部 黃色底部 + 3.H2S(TSI和LIA) 黑色 無黑色 + 4.尿素酶 紫紅色 無顏色變化 - 5.賴氨酸脫酸酶肉湯 紫色 黃色 + 6.苯酚紅衛茅醇肉湯 黃色(產或不產氣) 不產氣或無顏色變化 +(b) 7.KCN肉湯 生長 不生長 - 8.丙二酸鈉肉湯 藍色 無顏色變化 -(c) 9.吲哚試驗 溶液表面為紫色 溶液表面為黃色 - 10.多價鞭毛試驗 凝集 不凝集 + 11.多價菌體試驗 凝集 不凝集 + 12.苯酚紅乳糖肉湯 黃色(產或不產氣) 不
53、產氣;無顏色變化 -(c) 13.苯酚紅蔗糖肉湯 黃色(產或不產氣) 不產氣;無顏色變化 - 14.V-P試驗 粉色至紅色 無顏色變化 - 15.甲基紅試驗 紅色 黃色 + 16.西蒙氏枸櫞酸鹽 生長,藍色 不生長,無顏色變化 v a+, 90%陽性(1-2天內);- ,90%陰性(1-2天內);V,不穩定b大部分亞利桑那沙門氏菌陰性c大部分亞利桑那沙門氏菌陽性 表2.分離非沙門氏菌的關鍵特征 反應和底物 結果 1、尿素酶2、吲哚多價H血清實驗 陽性(粉-紅色)陽性(粉-紅色)陰性(不凝集) 吲哚Spicer-Edwards血清試驗 陽性(粉-紅色)陰性(不凝集) 3賴氨酸脫羧酶KCN肉湯 陰
54、性(黃色)陽性(生長) 4、苯酚紅乳糖肉湯 陽性(黃色、有或沒有氣體)(a) 5、苯酚紅蔗糖肉湯 陽性(黃色、有或沒有氣體)(a)(b) 6、KCN肉湯V-P實驗中性紅實驗 陽性(生長)陽性(粉-紅色)陰性(明顯的黃色) a 丙二酸鈉陽性的培養物需進行進一步的實驗確定是否是S.arzonae;b 假如在LIA上有典型的沙門氏特征的培養物不要棄去,需進行進一步的實驗,確定是否是沙門氏菌。 9. 沙門氏菌屬的擬定性鑒定。使用5種商品化的生物化學試劑盒(API 20E, Enterotube II, Enterobacter aceae II, MICRO-ID,或Vitek GNI)中任一種,代替
55、常規的生化管系統,鑒定擬定食源性沙門氏菌屬。按本節鑒定所述,檢驗人員依照自己試驗室選擇商品試劑盒與生化管系統相適應的一種商品試劑盒。生化學商品試劑盒不能用來代替血清學試驗(1)。組裝試劑盒,配制試劑盒所需試劑。參照官方分析方法的978.24部分(API-20E, Enterotube II和Enterobacterlaceae II),989.12部分(MICRO-ID),和991.13部分(Vitek GNI),接種于每個組合,并按規定的時刻與溫度進行培養。加試劑,觀看與記錄結果。參照上述Ref.1把培養物擬定為沙門氏菌或非沙門氏菌屬。為證實擬定為沙門氏菌的培養物,尚需進行沙門氏菌菌體(O)
56、血清學試驗,按上述五,5;和沙門氏菌鞭毛(H)血清試驗,按上述五,3;或進行Spicer-Edwards氏鞭毛(H)試驗。并按下列原則對培養物進行分類:a. 用商品化試劑盒擬定為沙門氏菌的培養物,若沙門氏菌菌體(O)血清學試驗陽性與沙門氏菌鞭毛(H)血清學試驗陽性的則報告為沙門氏菌。b. 用商品化試劑盒確定為非沙門氏菌的培養物,參照AOAC標準(1)確定亦為非沙門氏菌,應作非沙門氏菌予以排除。c. 凡不符合a或b的培養物,應按上述五,2-7項中有關規定作進一步試驗,或按Ewing(2)氏的有關項目進一步試驗,或送至標準定型實驗室,做最后的血清定型與鑒定。10. 鞭毛(H)試驗陰性培養物的處理:
57、對一些生化反應典型,被認為是沙門氏菌,但鞭毛(H)試驗陰性的培養物,可能是無動力的菌株,或鞭毛抗原發育不充分,對此培養物的動力測定方法如下:從TSI斜面上挑取少量的培養物,接種于動力試驗培養基平板中,在距平板邊緣10mm處一次穿刺2-3mm深,不要刺到平板底或接種到其他任何部位。置于35培養24h。假如細菌游散生長至40mm或更遠,按下述方法再試驗:在游散生長最遠處,用3mm接種環轉種一環培養物至胰酪胨大豆蛋白胨肉湯中。重復沙門氏菌多價鞭毛(H)(按上述五,3)或作Spicer-Edwards氏鞭毛(H)血清學試驗。假如培養物經第一個24h培養后無動力,于35培養24h;假如仍無動力,則置25
58、再培養5天。假如上述試驗仍為陰性,把該培養物定為無動力菌株。假如鞭毛(H)陰性培養物,按生化學反應可疑為沙門氏菌,應將培養物呈送微生物學實驗室作進一步的鑒定和/或血清學分型。11.血清學定型培養物遞送。除非另有講明,每個檢驗樣品要遞送1個分離物。培養物要放在腦心浸液瓊脂斜面的試管(13X100mm或16X125mm)內遞送。試管的螺旋帽應擰緊以確保安全。試管標貼上樣品編號,分析編號和密碼。提交的每一個樣品應有以下記錄:1)收集報告 FD-464或進口報告FD-784;2)檢測者的工作記錄 FD-431;3)沙門氏菌的記錄 FD-431g。放置培養物于培養容器內并加蓋FDA印章封口,此培養物的記
59、錄(以上E-11)放在搬運箱內,但不要放在加蓋FDA印章的容器內。提交關于樣品編號的申請或信函,以便早日出結果,按病原微生物的運輸規定進行運輸。依據聯邦登記以最快的方式進行運輸。關于提交的樣品需保留一份拷貝。沙門氏菌沙門氏菌(Salmonella)沙門氏菌病的病原體。屬腸桿菌科,革蘭氏陰性腸道桿菌。已發覺的近一千種(或菌株)。按其抗原成分,可分為甲、乙、丙、丁、戊等差不多菌組。其中與人體疾病有關的要緊有甲組的副傷寒甲桿菌,乙組的副傷寒乙桿菌和鼠傷寒桿菌,丙組的副傷寒丙桿菌和豬霍亂桿菌,丁組的傷寒桿菌和腸炎桿菌等。除傷寒桿菌、副傷寒甲桿菌和副傷寒乙桿菌引起人類的疾病外,大多數僅能目引起家畜、鼠類
60、和禽類等動物的疾病,但有時也可污染人類的食物而引起食物中毒。沙門氏菌差不多介紹沙門氏菌病是公共衛生學上具有重要意義的人畜共患病之一,其病原沙門氏菌屬腸道細菌科,包括那些引起食物中毒,導致胃腸炎、傷寒和副傷寒的細菌。它們除可感染人外,還可感染專門多動物包括哺乳類、鳥、爬行類、魚、兩棲類及昆蟲。人畜感染后可呈無癥狀帶菌狀態,也可表現為有臨床癥狀的致死疾,它可能加重病態或死亡率,或者降低動物的生殖生產力。蛋、家禽和肉類產品是沙門氏菌病的要緊傳播媒介,感染要緊取決于沙門氏菌的血清型和食用者的軀體狀況,受威脅最大的是小孩、老年人及免疫缺陷個體。依照國際慣例,要求對易受沙門氏菌污染的食品進行分類治理,以使
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