1、微弱發光測量儀器 可以用于各種發光分析： 超微弱發光分析 生物發光分析 自由基、抗氧化劑分析 化學發光分析 發光免疫分析應用第1頁/共38頁科學問題-樣品設計-儀器測量生物發光傳感器化學發光傳感器電化學發光傳感器化學發光免疫傳感器生物芯片？發光檢測試劑盒第2頁/共38頁在生物學、醫學農學、食品科學中的應用第3頁/共38頁PMA刺激巨嗜細胞不僅產生活性氧還有NO第二峰來自 NO 比第一峰晚出現幾分鐘第4頁/共38頁Cytochrome c (細胞色素 c)對線粒體中超氧陰離子和過氧化氫的生成和清除作用過氧化氫： luminol 加 horseradish peroxidase 誘發的化學發光超氧

2、陰離子：lucigenin 誘發的化學發光以heart muscle preparation（HMP）為材料測量結果如下： 不含細胞色素c超氧陰離子和過氧化氫的產量提高7-8倍 再加入細胞色素c則超氧陰離子和過氧化氫的產量恢復至低水平J.B.C 生物物理所 徐建興 第5頁/共38頁茶多酚對于羥自由基（OH）引起的DNA損傷發光有抑制作用0150300450600750900012345Non-DNADNA0.125g/ml0.25g/ml0.5g/ml1.0g/ml2.0g/ml隨著茶多酚濃度增加DNA損傷發光逐漸減弱第6頁/共38頁抗氧化劑對DNA損傷發光動力學影響 分三種類型發光峰降低發光

3、峰后移發光峰降低又后移第7頁/共38頁雙環醇對刀豆蛋白A所致小鼠肝細胞核DNA損傷的保護作用醫科院藥物所 劉耕陶 院士 化學發光法測定雙環醇體內給藥對Con ACon A損傷小鼠肝細胞核在體外對CuS04CuS04一鄰啡羅啉一維生素C CHz02Hz02的影響：由圖3 3可以看出，與正常對照組小鼠相比，注射Con ACon A組小鼠肝細胞核DNADNA對該系統損傷的敏感性降低表現為后峰明顯降低，曲線下面積顯著減少。而于注射Con ACon A前預先分別給予雙環醇50 mg50 mgkgkg及150 mg150 mgkg 3kg 3次組小鼠肝細胞核DNADNA對該體系損傷的敏感性增高，后峰明顯升

4、高，曲線下面積顯著增加。第8頁/共38頁葛根多糖對PC12細胞增殖的損傷作用 田亞平 教授 301醫院 用次黃嘌呤一黃嘌呤氧化酶的化學發光體系測定細胞外液中的SODSOD酶活性。測定體系總體積為1 ml1 ml，魯米諾濃度為1 16 6 mmolmmolmlml-1-1，黃嘌呤氧化酶5 ml5 ml加入魯米諾中，1 min1 min時的化學發光值為空白，再加入10 ml10 ml不同濃度的多糖，濃度分別為0 0、0 0001001、0 00101、0 01 1、1 10 mg0 mgmlml-1-1 ，避光平衡1 1 minmin，記錄1 rain1 rain時的化學發光值，并計算抑制率( (

5、溫度保持存3737度）第9頁/共38頁光果甘草毛狀根培養過程中對活性氧清除能力和總黃酮含量的變化丁家宜 教授 中國藥科大學 采用化學發光法，分析了光果甘草毛狀根培養過程中對3 3種活性氧(ROS(ROS：0 02 2. .、HOHO和H H2 20 02 2) )清除能力的動態變化，并測定了培養過程中總黃酮含量的動態變化。實驗結果表明，毛狀根在對數生長期(20(2028 d)28 d)對 3 3種ROSROS都有很強的清除能力，在生長停滯期(29(2940 d)40 d)對HOHO和H H2 20 02 2的清除能力仍維持較高的水平，而對0 02 2. .的清除能力隨培養時間的延長逐漸下降：總

6、黃酮含量在對數生長期呈現增加的趨勢，至31 d31 d時達到最高含量) )，隨培養時間的延長含量逐漸降低。第10頁/共38頁白細胞呼吸暴發形態學改變及銀杏葉提取物干預作用（徐州心血管所，醫科院阜外醫院）第11頁/共38頁微粒子化學發光免疫測定促甲狀腺素敏感性方法的建立與應用 王永寧 中國科學院理化技術研究所 Fig 5 Comparison of determination serum TSH between CLEIA and ACS-180 system將北京大學第三醫院經丫啶酯標記的發光ACS-180系統測定并確診的105例正常人、25例甲亢患者、及42例甲低患者的血清樣品，用CLEIA

7、法平行檢測TSH的濃度，結果完全相符。對64例用CLEIA法測定的結果與丫啶酯標記的直接化學發光免疫分析（CLIA）測定的結果進行相關性分析的結果見圖5。相關方程為Y = - 0.04 1.05 X（Y為CLEIA法測定的TSH的濃度，X為CLIA法測定的TSH的濃度）相關系數r = 0.98 ,兩種方法具有良好的相關性。第12頁/共38頁微粒子化學發光免疫測定促甲狀腺素敏感性方法的建立與應用 王永寧 中國科學院理化技術研究所 圖1 酶促化學發光反應的動力學曲線Fig 1 Kinetics curve of enzyme -accelerating chemilumine-scence rea

8、ction a: 50 mIU/L TSH ; b: 25 mIU/L TSH; c: 10 mIU/L TSH.圖4 TSH標準曲線Fig 4 TSH calibration curve第13頁/共38頁J.Agric.Food Chem. 2001,49,2137-2141indoxyl-b b-glucuronide (IBG)特異性檢測羥自由基及其應用于食品水提物羥自由基清除效能第14頁/共38頁indoxyl-b b-glucuronide (IBG)特異性檢測羥自由基及其應用于食品水提物羥自由基清除效能Fenton試劑加indoxyl-b b-glucuronide (IBG)in

9、doxyl-b b-glucuronide (IBG)被羥自由基誘導產生超弱發光，發光強度可提高2個數量級以上indoxyl-b b-glucuronide (IBG)對超氧陰離子無發光反應反應體系中加入羥自由基淬滅劑可抑制發光，發光的降低程度可用來檢測羥自由基的淬滅能力IC50 ( g/mL)：發光的抑制會飽和，使發光量達到半抑制的自由基淬滅劑濃度為監測指標Yuans General Hospital, Taiwan 劉燦榮第15頁/共38頁胡柚皮中黃酮類化合物提取及抗氧化性研究浙江大學 葉興乾 利用化學發光法測定了這些黃酮類化合物的抗氧化能力，實驗證明胡柚皮中黃酮類化合物作為自由基清除劑存

10、在構一效關系，是一種良好的自由基清除劑。利用胡柚皮黃酮類化合物粗提物較好的抗氧化能力可開發許多產品，如老年功能性食品、天然化妝品、天然增味劑、天然色素等，而且它在胡柚皮中含量豐富，這對于胡柚皮的綜合開發利用是極其有利的。 第16頁/共38頁鹽脅迫下綠豆幼苗的超微弱發光 河北大學 李光 植物的超微弱發光與其代謝生理反應密切相關。發光分析的優越在于可以在不損傷和不干擾植物生理反應的情況下，較早地了解生物系統內部的生化反應的狀況，而不必進行大量的生化分析。研究方法的改進和突破對于研究植物鹽脅迫機理有一定的實際意義和促進作用第17頁/共38頁杏花開放過程中超弱發光和ATP及活性氧含量的變化 山東農業大

11、學 楊洪強 活性氧是導致UWLUWL產生的重要因素。綜合各花期UWLUWL衰減曲線與ATPATP和呼吸速率的變化，露萼期與露瓣期杏花整體代謝活性較低，所以其UWLUWL也處于一較低的水平，發光衰減速率低。可見，杏花UWLUWL水平及衰減趨勢與花體生活力水平有更密切的關系，其新陳代謝的活躍程度是決定杏花UWLUWL的主要因素。第18頁/共38頁楊梅果汁的抗氧化特性研浙江大學食品科學系 陳健初不同品種的楊梅汁對羥自由基的抑制率有較大的差異.同時可以發現,楊梅汁清除羥自由基的能力與楊梅汁中所含的酚、黃酮及花色苷等生物活性成分存在較一定的相關性,即酚類、黃酮及花色苷含量較高的楊梅品種其清除羥自由基的能

12、力較強. 遲大種的生物活性成分含量最高,其清除羥自由基的能力也最強.第19頁/共38頁紅景天提取物清除O2和OH的體外實驗研究北京聯合大學生物活性物質與功能食品北京市重點實驗室我國衛生部1991年批準紅景天為新食品資源。紅景天具有抗疲勞、抗缺氧、抗輻射、增強免疫力等作用。在Phen-Cu-VC-H2O2 -DNA法的檢測結果中，通過檢測OH攻擊DNA伴隨DNA氧化降解產生化學發光，不僅觀察到紅景天提取物清除OH的作用，而且間接反應出紅景天提取物對DNA的保護作用。第20頁/共38頁番茄中抗氧化色素的提取及其清除羥自由基能力的研究湖南農業大學生化與發酵工程實驗室 田云 通過微弱發光測量儀檢測抗氧

13、化色素清除BF的能力發現，所提取的抗氧化色素具有較強的清除BF的能力，且其清除BF的能力具有劑量效應關系。這些結果為我們更合理開發利用番茄資源提供了很好的依據。第21頁/共38頁草莓愈傷組織的超弱發光及活性氧代謝變化的研究 中國林科院亞熱帶林業研究所 田敏 取初生的不同類型的愈傷組織在相同的條件下測定它們的超弱發光強度,發現1型愈傷組織的發光值最高, 2型和3型的發光值相差不大； 通過對22和2的測定,發現相對1型愈傷組織來說,2和3型愈傷組織具有較高的活性氧水平, 3型愈傷組織22和2的的產生速率分別約是1型愈傷組織的9倍和4倍。在繼代培養基上,1型愈傷組織生長得較快,2和3型則較緩慢。因此

14、愈傷組織超弱發光的強度主要與細胞的分裂增殖及分化活動有關,而與活性氧的產生水平無太大的相關性。第22頁/共38頁 分析生物發光 監測環境污染第23頁/共38頁應用發光桿菌檢測京杭運河水體污染 杭州大學 黃純農12345678910 11 12 13 1400.10.20.30.40.50.6發光抑制率采樣點編號第24頁/共38頁納米材料催化化學發光法測定車間廢氣中的丁酮 北京聯合大學 周考文 丁酮在納米級MgOMgO和AlAl2 20 03 3表面都有較強的發光現象，但在MgOMgO與AlAl2 20 03 3 摩爾比為4:14:1的混合物上有較好的選擇性。分析波長為440 nm440 nm；

15、測定溫度為335335左右；載氣流速為145 mL145 mLminmin；方法的檢出限為6.2 mg6.2 mgm m3 3；線性范圍為20201000 1000 mgmgm m3 3 ；相關系數為。應用本法可快速測定車間空氣中的丁酮。第25頁/共38頁研究植物生理鑒定作物品質第26頁/共38頁大豆發芽過程超弱發光強度變化發芽期大豆Lox-1缺失體發光強度明顯高于正常大豆農科院 種質所超弱發光測量挑選鑒定無豆腥味大豆原料第27頁/共38頁幾種薔薇帶莖葉簇冷凍后幾種薔薇帶莖葉簇冷凍后熒光增強倍率熒光增強倍率1234567890510152025301.玫瑰2.報春刺玫. 3.木香 4.黃刺玫

16、5.美薔薇6.寬刺薔薇 7.疏花薔薇8.毛葉疏花薔薇眪 9.彎刺薔薇發光增強倍率植物解凍發光增強比率與抗寒性能有關 林業大學第28頁/共38頁研究發光分析化學第29頁/共38頁Determination of Sulpiride by Capillary Electrophoresis with End - ColumnElectrogenerated Chemiluminescence Detection 長春應化所 汪爾康Clinical Chemistry 2002第30頁/共38頁New technique for capillary electrophoresis directlyc

17、oupledwith end-column electrochemiluminescence detection 長春應化所 汪爾康Electrophoresis 2002第31頁/共38頁安乃近在吐溫80和聚乙二醇-400增敏介質中的化學發光強度比較A0.1 g /ml 安乃近在吐溫80增敏介質中的化學發光強度。B0.1 g /ml安乃近在乙二醇-400增敏介質中的化學發光強度AB相對發光強度相 對 時 間 坐 標清華大學 張新榮第32頁/共38頁Development of a Gas Sensor UtilizingChemiluminescence on NanosizedTitani

18、um Dioxide清華大學 張新榮Analytical Chemistry 2002第33頁/共38頁Plant Tissue-based Chemiluminescence Flow Biosensor for Glycolic Acid 陜西師大 章竹君Analytical Chemistry 2001 第34頁/共38頁Electrochemiluminescent Detection of Chiorpromazine by Selective Preconcentration at aLauric Acid-modified Carbon Paste Electrode Using Tris (2,2-bipyridine)ruthenium(ii)中科院長春應化所 董紹俊Analytical Chemistry 2000第35頁/共38頁Chemiluminescence determination of tetracycline bas