1、第七章第七章 芳香胺類藥物的分析芳香胺類藥物的分析 基本要求基本要求 一、掌握芳胺類、苯乙胺類藥物的鑒別一、掌握芳胺類、苯乙胺類藥物的鑒別和含量測定的基本原理與方法。和含量測定的基本原理與方法。第一節第一節 芳芳 胺類藥物的分析胺類藥物的分析芳胺類藥物分為兩類芳胺類藥物分為兩類芳伯氨基未被取代芳伯氨基未被取代芳伯氨基被?；疾被货；?、對氨基苯甲酸酯類藥物的基本結構與主要化學性質一、對氨基苯甲酸酯類藥物的基本結構與主要化學性質（一）基本結構與典型藥物（一）基本結構與典型藥物COOR2NR1HCOOC2H5H2N苯佐卡因苯佐卡因H2NCOOCH2CH2N C2H52.HCl鹽酸普魯卡因鹽酸普

2、魯卡因COOCH2CH2N(C2H5)2CH3(CH2)3NHHCl鹽酸丁卡因鹽酸丁卡因CONHCH2CH2N(C2H5)2H2NHCl鹽酸普魯卡因胺鹽酸普魯卡因胺1.1.芳伯氨基特性芳伯氨基特性：重氮化偶合反應；芳醛縮合成重氮化偶合反應；芳醛縮合成Schiff堿；易堿；易 氧化變色等。鹽酸丁卡因無此特性。氧化變色等。鹽酸丁卡因無此特性。（二（二）主要理化性質主要理化性質水解特性：水解特性：分子結構中的酯鍵或酰胺鍵易水解，除鹽酸分子結構中的酯鍵或酰胺鍵易水解，除鹽酸 丁卡因外水產物為對丁基氨基苯甲酸外，上述均丁卡因外水產物為對丁基氨基苯甲酸外，上述均 為對氨基苯甲酸。為對氨基苯甲酸。弱堿性：弱

3、堿性：除苯佐卡因外，其余均含有叔胺氮的側鏈，故具除苯佐卡因外，其余均含有叔胺氮的側鏈，故具 有弱堿性。有弱堿性。4. 其它特性：其它特性：因結構中有因結構中有 芳伯氨基或同時具有脂烴胺側鏈，其芳伯氨基或同時具有脂烴胺側鏈，其 游離堿多為堿型油狀液體或低熔點固體，難溶于游離堿多為堿型油狀液體或低熔點固體，難溶于 水，可溶于有機溶劑。其鹽酸鹽則易溶于水。水，可溶于有機溶劑。其鹽酸鹽則易溶于水。二、酰胺類藥物的基本結構與主要化學性質二、酰胺類藥物的基本結構與主要化學性質（一）基本結構與典型藥物一）基本結構與典型藥物NH C R2OR1R3R4HONHCOCH3對乙酰氨基酚（撲熱息痛）對乙酰氨基酚（撲

4、熱息痛）NHCONC4H9CH3CH3HCl鹽酸布比卡因鹽酸布比卡因NHCOCH2N(C2H5)2CH3CH3HCl鹽酸利多卡因鹽酸利多卡因 1.1.水解后顯芳伯氨基特性：水解后顯芳伯氨基特性：分子結構中含有芳酰氨基，酸分子結構中含有芳酰氨基，酸 水解后顯芳伯氨基的特性反應。水解后顯芳伯氨基的特性反應。 注意空間位阻的影響。注意空間位阻的影響。 2.2.水解產物易酯化：水解產物易酯化：對乙酰氨基酚，酸水解生成對乙酰氨基酚，酸水解生成 醋酸，在硫酸中與乙醇反應，發出醋醋酸，在硫酸中與乙醇反應，發出醋 酸乙酯香味。酸乙酯香味。 （二）主要化學性質（二）主要化學性質3.3.酚羥基特性：酚羥基特性：對

5、乙酰基酚有游離酚羥基，可與對乙?；佑杏坞x酚羥基，可與FeClFeCl3 3 發生顯色反應。發生顯色反應。4.4.弱堿性：弱堿性：利多卡因和布比卡因烴胺側鏈有叔胺氮，顯利多卡因和布比卡因烴胺側鏈有叔胺氮，顯 堿性，可與生物堿沉淀劑發生沉淀反應，可堿性，可與生物堿沉淀劑發生沉淀反應，可 相互區別。相互區別。5.5.與金屬離子發生沉淀反應：與金屬離子發生沉淀反應：利多卡因和布比卡因酰氨利多卡因和布比卡因酰氨 基上氮可與基上氮可與CuCu2+2+,Co,Co2+2+生成生成 有色配位化合物沉淀。有色配位化合物沉淀。三、鑒別試驗三、鑒別試驗n（一）重氮化（一）重氮化- -偶合反應偶合反應 分子結構中含

6、有芳伯氨基或潛在芳伯分子結構中含有芳伯氨基或潛在芳伯氨基的藥物，均可發生此反應。氨基的藥物，均可發生此反應。Ar-NH2HClNaNO2重氮鹽重氮鹽OH- - -萘酚萘酚橙黃橙黃猩紅色猩紅色 直接反應：直接反應：苯佐卡因、鹽酸普魯卡因、苯佐卡因、鹽酸普魯卡因、 鹽酸普鹽酸普 魯卡因胺魯卡因胺間接反應：間接反應：對乙酰氨基酚對乙酰氨基酚 利多卡因和布比卡因由于空間位阻很難發利多卡因和布比卡因由于空間位阻很難發生此反應。生此反應。 丁卡因雖無芳伯氨基，但可與丁卡因雖無芳伯氨基，但可與NaNONaNO2 2反反應生成應生成N N亞硝基化合物的乳白色沉淀。亞硝基化合物的乳白色沉淀。 NH2COOCH2

7、CH2N(C2H5)2OHNHCOCH3H2OAr-NH2NaNO2+HClAr-N2+Cl-OHOH-OHAr-N=N猩紅或紅色NHC4H9COOCH2CH2(C2H5)2+ HNO2C4H9N-NOCOOCH2CH2(C2H5)2+ H2O 乳白色（二）與三氯化鐵反應（二）與三氯化鐵反應對乙酰氨基酚對乙酰氨基酚 + + FeClFeCl3 3藍紫色化合物藍紫色化合物NHCOCH3O-NHCOCH3OH3+ FeCl33Fe + 3HCl 1. 與銅和鈷離子反應：與銅和鈷離子反應： 利多卡因與硫酸銅生成利多卡因與硫酸銅生成藍紫色藍紫色配位化合物；配位化合物； 與氯化鈷生成與氯化鈷生成亮綠色亮

8、綠色沉淀。沉淀。（三）與金屬離子反應三）與金屬離子反應CH3CH3NHCOCH2N(C2H5)22+ Cu2+CH3CH3NCOCH2N(C2H5)2CH3CH3(C2H5)2NCH2CONCu藍紫色+Co2+CH3CH3NCOCH2N(C2H5)2CH3CH3(C2H5)2NCH2CONCo亮綠色2. 2. 羥肟酸鐵鹽反應羥肟酸鐵鹽反應 基于普魯卡因胺分子中的基于普魯卡因胺分子中的 芳酰胺結構。芳酰胺結構。CONHCH2CH2N(C2H5)2CON(OH)CH2CH2N(C2H5)2CON(OH)CH2CH2N(C2H5)23H2O2FeCl3紫紅，暗棕色，棕黑色NH2CONHCH2CH2N

9、(C2H5)2NH2CON(OH)CH2CH2N(C2H5)2NH2CON(OH)CH2CH2N(C2H5)23FeH2O2FeCl3紫紅，暗棕色，棕黑色3. 3. 與汞離子反應與汞離子反應鹽酸利多卡因鹽酸利多卡因 + + H H2 2NONO3 3 + Hg(NO + Hg(NO3 3) )2 2黃色黃色對氨基苯甲酸酯對氨基苯甲酸酯 H H2 2NONO3 3 + Hg(NO + Hg(NO3 3) )2 2紅色紅色或或橙黃色橙黃色1. 1. 鹽酸普魯卡因的鑒別鹽酸普魯卡因的鑒別 ( (四四) ) 水解產物反應水解產物反應鹽酸普魯卡因鹽酸普魯卡因 + + NaOHNaOH普魯卡因普魯卡因油狀

10、物油狀物對氨基苯甲酸鈉對氨基苯甲酸鈉 + + 二乙氨基乙醇二乙氨基乙醇（使濕潤的紅色石蕊試紙變蘭色）（使濕潤的紅色石蕊試紙變蘭色）對氨基苯甲酸鈉對氨基苯甲酸鈉 + + HClHCl對氨基苯甲酸（白色）對氨基苯甲酸（白色）NH2COOCH2CH2N(C2H5)2.HClNH2CON(OH)CH2CH2N(C2H5)2NH2COONaNaOHNaOH+ HOCH2CH2N(C2H5)2NH2COONaNH2COOHNH2COOHHClHClHCl.2. 2. 苯佐卡因的鑒別苯佐卡因的鑒別 苯佐卡因苯佐卡因 + + NaOHNaOH乙醇乙醇乙醇乙醇 + + I I2 2 + + NaOHNaOHCH

11、ICHI3 3（碘仿臭氣，黃色碘仿臭氣，黃色沉淀）沉淀）( (五五) ) 紫外特征吸收光譜法紫外特征吸收光譜法 1. 在在max 處測定供試液的百分吸收系數。處測定供試液的百分吸收系數。 例如：對乙酰基酚在例如：對乙酰基酚在0.4%NaOH中于中于max =240nm;E1%1cm = 715 在在HCl(0.1nol/L)-甲醇于甲醇于max =249nm; E1%1cm = 8802. 在規定的濃度測定在規定的濃度測定max 例如：鹽酸普魯卡因胺例如：鹽酸普魯卡因胺5g/ml; max = 280nm( (六六) )紅外吸收光譜法（略）紅外吸收光譜法（略）（一）對乙酰氨基酚中的特殊雜質檢查

12、（一）對乙酰氨基酚中的特殊雜質檢查 1.1.乙醇溶液的澄清度與顏色：乙醇溶液的澄清度與顏色：因其生產工藝用鐵粉作還原劑，可因其生產工藝用鐵粉作還原劑，可 能帶入，致使乙醇溶液產生混濁，中間體對氨基酚易氧化產生能帶入，致使乙醇溶液產生混濁，中間體對氨基酚易氧化產生 有色化物，在乙醇溶液中顯橙紅色或棕色。有色化物，在乙醇溶液中顯橙紅色或棕色。 四、特殊雜質檢查四、特殊雜質檢查檢查方法：檢查方法：配制配制0.1g/ml本品乙醇溶液，溶液應澄清，無色；本品乙醇溶液，溶液應澄清，無色； 如顯混濁，與如顯混濁，與1號濁度標號濁度標 準液比較，不得更濃；準液比較，不得更濃； 如顯色，與棕紅色如顯色，與棕紅色

13、2號或橙紅色號或橙紅色2號號 標準液比較，標準液比較， 不得更深。不得更深。2. 有關物質檢查：有關物質檢查：Ch.P是以對氯苯乙酰胺為對照品，是以對氯苯乙酰胺為對照品， 采用采用TLC 法中的雜質對照品法。法中的雜質對照品法。3. 對氨基酚檢查：對氨基酚檢查：利用對氨基酚在堿性條件下可與利用對氨基酚在堿性條件下可與 亞硝基鐵氰化鈉生成藍色配位化亞硝基鐵氰化鈉生成藍色配位化 合物，采用比色法。合物，采用比色法。1.乙醇溶液的澄清度與顏色：乙醇溶液的澄清度與顏色：(二二)鹽酸普魯卡因注射液中對氨基苯甲酸鹽酸普魯卡因注射液中對氨基苯甲酸的檢查的檢查為什么要檢查？為什么要檢查？H2NH2NCOOH-

14、CO2O =OO黃色怎樣檢查？怎樣檢查？原中國藥典采用原中國藥典采用TLCTLC法中的法中的雜質對照品法進行雜質對照品法進行檢查。（現行中國藥典采用檢查。（現行中國藥典采用HPLC法檢查）法檢查）（一）亞硝酸鈉滴定法（一）亞硝酸鈉滴定法 Ar-NHAr-NH2 2; Ar-NHCOR; Ar-NO; Ar-NHCOR; Ar-NO2 2均可采用此法均可采用此法 Ch.PCh.P中的苯佐卡因；鹽酸普魯卡因和鹽酸普魯卡中的苯佐卡因；鹽酸普魯卡因和鹽酸普魯卡因胺及其制劑可直接采用本法。因胺及其制劑可直接采用本法。五、含量測定五、含量測定NHCOR + H2ONH2 + RCOOHH+NO2 + 6H

15、NH2 + 2H2O1. 原理原理：Ar-NHCOR + H2OAr-NH2 + RCOOHH +Ar-NH2 + NaNO2 + 2HClAr-N2+Cl- + NaCl + 2H2On測定主要條件：測定主要條件：(1) 加加KBr增加反應速度增加反應速度重氮化的反應歷程為：重氮化的反應歷程為：NaNO2 + HClHNO2 + NaClHNO2 + HClNOCl + H2OKHClNN+Cl-快N N OH快NNOH慢NO+Cl-NH2KBr + HClHBr + KClHNO2 + HBrNOBr + H2OKHBr KHBr 比比KHCl大大300倍倍生成生成NOBr量大得多量大得多

16、加快反應速度加快反應速度 (2) 加過量加過量HCl加速反應：加速反應： 重氮化速度加快；重氮化速度加快； 重氮鹽在酸性介質中穩定；重氮鹽在酸性介質中穩定； 防止生成氨基偶氮化合物。防止生成氨基偶氮化合物。 Ar-N2+Cl- + H2N-Ar Ar-N=N-NH-Ar + HCl 一般摩爾比為一般摩爾比為Ar-NH2 : HCl = 1 : 2.56 。 (3) 室溫條件下滴定室溫條件下滴定: 溫度高反應速度快；每升高溫度高反應速度快；每升高10加快加快2.5倍倍太高太高,可使可使Ar-N2+Cl- + H2OAr-OH + N2 + HCl(4) 滴定管尖端插入液面下滴定滴定管尖端插入液面

17、下滴定 3. 指示終點的方法指示終點的方法 (1) 永停滴定法永停滴定法 溶液溶液 檢流計檢流計 終點前：終點前： 無過量無過量 無電流無電流 HNO2 終點時：終點時：有過量有過量 有電流（使指針偏離零有電流（使指針偏離零 HNO2 永停在某一位置）永停在某一位置） (2) 外指示劑法外指示劑法 用用KI-淀粉指示劑淀粉指示劑 指示終點的原理：指示終點的原理： 2NaNO2 + 2KI + 4HCl 2NO + I2 + 2KCl + 2NaCl + 2H2OGVVR1R2+V(二）非水溶液滴定法二）非水溶液滴定法(略略) 1. 對乙?；釉系暮繙y定對乙?；釉系暮繙y定 在在0.4%

18、NaOH介質中；介質中；257nm D%E1%1cm樣樣 E1%1cm標標100 ；E1%1cm715 2. 對乙?；悠艹龆葴y定對乙?；悠艹龆葴y定 （測定條件同上）（測定條件同上） 1片稀片稀HCl 24ml + H2O 1000ml 精密量精密量 取取5ml + 0.4%NaOH10ml + H2O 100ml 257nm測定測定A。 W110005100100C （g/100ml) W(g) = 200 C; C = A/715 溶出度溶出度W標示量標示量10080為合格為合格（三）分光光度法（三）分光光度法 此法主要用于鹽酸普魯卡因注射液的測定。因該注射液中此法主要用于鹽酸普魯卡

19、因注射液的測定。因該注射液中 常含有降解產物對氨基苯甲酸；可以苯甲酸為內標同時測定兩常含有降解產物對氨基苯甲酸；可以苯甲酸為內標同時測定兩 者的含量，該法簡單準確。者的含量，該法簡單準確。 色譜條件：色譜條件：色譜柱為色譜柱為BondapakC18 300mm4mm 流動相為甲醇流動相為甲醇1HAc(40:60); UV檢測器檢測器250nm. （四）（四）HPLC法法第二節第二節 苯乙胺類藥物的分析苯乙胺類藥物的分析一、苯乙胺類藥物的基本結構與主要化學性質一、苯乙胺類藥物的基本結構與主要化學性質（一）基本結構與典型藥物（一）基本結構與典型藥物R1CH CH NH R2OH R3*常見的苯乙胺

20、類藥物常見的苯乙胺類藥物HOHOCOHHCH2NHCH3腎上腺素HOHOCOHHCH2NH2重酒石酸去甲腎上腺素CCCOOHCOOHOHHHHOHOCHOHCH2NHCH3 HCl鹽酸去氧腎上腺素HOCHOHCH2NHCH(CH3)2 HClHO鹽酸異丙腎上腺素 （二）（二）主要化學性質主要化學性質 1.1.弱堿性弱堿性 本類藥物結構中有烴氨基側鏈，為仲胺氮本類藥物結構中有烴氨基側鏈，為仲胺氮 顯弱堿性。顯弱堿性。 2.2.酚羥基特性酚羥基特性 本類藥物結構中有酚羥基，可與本類藥物結構中有酚羥基，可與 FeCl FeCl3 3; ;發生氧化。發生氧化。 3.3.光學活性光學活性 多數藥物結構中

21、有手性碳原子，具有旋多數藥物結構中有手性碳原子，具有旋 光性。光性。二、鑒別試驗二、鑒別試驗 (一一)與三氯化鐵反應與三氯化鐵反應Ar-OHFeCl3絡合顯色絡合顯色 堿液堿液紫紅色紫紅色。 ( (二）甲醛硫酸反應二）甲醛硫酸反應 在此試劑中形成醌式結構而顯色。在此試劑中形成醌式結構而顯色。 藥藥 物物 三氯化鐵三氯化鐵 甲醛硫酸甲醛硫酸 腎上腺素腎上腺素 0.1 0.1mol/LHClmol/LHCl顯綠色顯綠色, ,甲氨試液顯紅紫紅甲氨試液顯紅紫紅 紅色紅色 重酒石酸去甲腎上腺素重酒石酸去甲腎上腺素 綠色綠色, ,加加NaCONaCO3 3試液顯紫色紅色試液顯紫色紅色 淡紅色淡紅色 鹽酸去

22、氧腎上腺素鹽酸去氧腎上腺素 紫色紫色 玫瑰紅橙紅棕紅玫瑰紅橙紅棕紅 鹽酸異丙腎上腺素鹽酸異丙腎上腺素 深綠色深綠色, ,加加5 5NaCONaCO3 3試液顯藍紫色紅色試液顯藍紫色紅色 棕色暗紫色棕色暗紫色( (三）氧化反應三）氧化反應 本類藥物具有本類藥物具有Ar-OH，易被氧化劑易被氧化劑I2, H2O2, K3Fe(CN)6氧化而顯色，氧化而顯色，例如：腎上腺素在中性或酸性條件下，被例如：腎上腺素在中性或酸性條件下，被I2, H2O2 氧化后，生成腎上腺素紅；氧化后，生成腎上腺素紅； 鹽酸異丙腎上腺素在酸性條件下，被鹽酸異丙腎上腺素在酸性條件下，被I2氧化，氧化， 生成異丙腎上腺素紅。生

23、成異丙腎上腺素紅。( (四）紫外特征吸收與紅外吸收光譜四）紫外特征吸收與紅外吸收光譜例如：例如： 鹽酸異丙腎上腺素鹽酸異丙腎上腺素 0.05mg/ml max = 280nm A =0.50 這一類藥物均可采用紅外吸收光譜進行鑒別這一類藥物均可采用紅外吸收光譜進行鑒別 ( (一一) ) 酮體檢查酮體檢查 本類藥物在生產過程中多采用酮體氫化制得，若氫本類藥物在生產過程中多采用酮體氫化制得，若氫化不完全，易引入酮體雜質?；煌耆?，易引入酮體雜質。 采用采用UVUV法檢查：法檢查： 利用酮體在利用酮體在310310nmnm有吸收，本類藥物無吸收。有吸收，本類藥物無吸收。 例如：腎上腺素本項檢查例如：

24、腎上腺素本項檢查 配配2.02.0mg/ml =310nm Amg/ml =310nm A0.050.05 鹽酸去氧腎上腺素鹽酸去氧腎上腺素 配配2.02.0mg/ml =310nm Amg/ml =310nm A0.020.02 鹽酸異丙腎上腺素鹽酸異丙腎上腺素 配配2.02.0mg/ml =310nm Amg/ml =310nm A0.150.15 三、特殊雜質檢查三、特殊雜質檢查220 260 300 nm腎上腺酮及腎上腺素的紫外吸收曲線HOHOOCCH2NHCH3HOHOOHCHCH2NHCH3max310nm( (二二) ) 有關物質的檢查有關物質的檢查 采用采用TLCTLC法（或法

25、（或HPLCHPLC）中的）中的高低濃度對比法高低濃度對比法進行檢查。進行檢查。 ( (三三) ) 鹽酸苯乙雙胍中有關雙胍的檢查鹽酸苯乙雙胍中有關雙胍的檢查 采用采用PCPC法中的雜質對照法進行檢查。法中的雜質對照法進行檢查。 ( (一一) ) 非水溶液滴定法非水溶液滴定法 本類藥物的原料藥多采用此法。本法重點將在第八章討論。本類藥物的原料藥多采用此法。本法重點將在第八章討論。 1. 1. 重酒石酸去甲腎上腺素的測定重酒石酸去甲腎上腺素的測定 相當于相當于B B的有機酸鹽可直接滴定。的有機酸鹽可直接滴定。 2.2.鹽酸克侖特羅的測定鹽酸克侖特羅的測定 相當于相當于B B的的HXHX酸鹽不能直接

26、滴定，需加酸鹽不能直接滴定，需加Hg(Ac)Hg(Ac)2 2處理后滴定處理后滴定。 3.3.硫酸沙丁醇的測定硫酸沙丁醇的測定 相當于相當于B B的的H H2 2SOSO4 4鹽可直接滴定鹽可直接滴定, , 也可處理后滴定。也可處理后滴定。四、含量測定四、含量測定( (二二) ) 溴量法溴量法 本類藥物重酒石酸間羥胺、鹽酸去氧腎上腺素及本類藥物重酒石酸間羥胺、鹽酸去氧腎上腺素及其注射液用此法。其注射液用此法。基本原理：基本原理：HOOHCH-CH2NHCH3 + Br2HOOHCH-CH2NHCH3 + 3HBrBrBrBr Br2 + 2KI 2KBr + I2 I2 + 2Na2S2O3

27、2NaI + Na2S4O6( (三三) ) 比色法比色法 利用藥物分子結構中的利用藥物分子結構中的Ar-OHAr-OH與與FeFe3 3絡合顯色，進行比色絡合顯色，進行比色測定；測定； 也可利用藥物分子結構中的也可利用藥物分子結構中的Ar-NHAr-NH2 2重氮化偶合顯色，進行重氮化偶合顯色，進行比色。比色。ClN2+Cl -CH(OH)CH2NHC(CH3)3ClClCH(OH)CH2NHC(CH3)3ClNHCH2CH2NH2+N=NNHCH2CH2NH2N-(1-萘基）乙二胺500nm比色測定例如：鹽酸克倫特羅栓的含量測定例如：鹽酸克倫特羅栓的含量測定(四四) HPLC法法 例一、例一、重酒石酸去甲腎上腺素注射液的測定重酒石酸去甲腎上腺素注射液的測定 采用采用RPIP-HPLC-UV法；用外標一點法進行定量測法；用外標一點法進行定量測 定。定。 例二、例二、血漿中兒茶酚胺類（腎上腺素類）藥物的測定血漿中兒茶酚胺類（腎上腺素類）藥物的測定 采用采用RPIP-HPLC-EChD 法；用標準曲線法進行定量法；用標準曲線法進行定量 測定。測定。練習與思考練習與思考 A A型題型題 1 1鹽酸普魯卡因注射液中檢查的特殊雜