1、人類性染色質標本的制人類性染色質標本的制作與觀察作與觀察 實驗目的實驗目的一、了解一、了解X染色質的不同檢測方法及意義。染色質的不同檢測方法及意義。二、掌握二、掌握X染色質的形態(tài)特點。染色質的形態(tài)特點。三、初步掌握顯微鏡下三、初步掌握顯微鏡下X染色質的識別方法染色質的識別方法實驗原理實驗原理人類性染色質人類性染色質（sex chromatin boby）是在間期）是在間期細胞核中染色體的異染色質部分顯示出來的一種細胞核中染色體的異染色質部分顯示出來的一種特殊結構，其包括特殊結構，其包括X染色質和染色質和Y染色質。染色質。Lyon假說假說：英國遺傳學家：英國遺傳學家Mary Lyon 在在196

2、1年年首先提出了上述首先提出了上述X染色體失活假說，即染色體失活假說，即Lyon假說假說其要點是：雌性哺乳動物細胞內只有一條其要點是：雌性哺乳動物細胞內只有一條X染染色體有活性，另一條失活并固縮，后者在間期細色體有活性，另一條失活并固縮，后者在間期細胞表現(xiàn)為性染色質；失活發(fā)生在胚胎的早期；胞表現(xiàn)為性染色質；失活發(fā)生在胚胎的早期；失活是隨機的，即失活的失活是隨機的，即失活的X染色體既可來自父染色體既可來自父親也可來自母親，但一個細胞某條親也可來自母親，但一個細胞某條X旦失活，旦失活，由該細胞繁衍而來的子細胞都具有同一條失活的由該細胞繁衍而來的子細胞都具有同一條失活的X染色體。染色體。 劑量補償效

3、應劑量補償效應：使細胞核中具有兩份或兩份以上基因：使細胞核中具有兩份或兩份以上基因的個體和只有一份基因的個體出現(xiàn)相同表型的遺傳效的個體和只有一份基因的個體出現(xiàn)相同表型的遺傳效應。應。 對于性染色體來講，包括人類在內的哺乳動物雌對于性染色體來講，包括人類在內的哺乳動物雌性個體的每一體細胞中有兩條性個體的每一體細胞中有兩條X染色體，所以在染色體，所以在X染色染色體上的基因劑量有兩份，而雄性個體只有一條體上的基因劑量有兩份，而雄性個體只有一條 X染色染色體，基因劑量只有一份。劑量補償效應使體，基因劑量只有一份。劑量補償效應使 X連鎖性狀連鎖性狀的表現(xiàn)在雌雄個體之間并無不同。的表現(xiàn)在雌雄個體之間并無不

4、同。1932年美國遺傳年美國遺傳學家學家H.J.馬勒首先在果蠅中發(fā)現(xiàn)了這種效應，并把它馬勒首先在果蠅中發(fā)現(xiàn)了這種效應，并把它看作是維持雌雄兩性生物基因表達的一致所特有的一看作是維持雌雄兩性生物基因表達的一致所特有的一種遺傳效應。種遺傳效應。 器材器材：染色缸，顯微鏡，載玻片，鑷子，滴管，：染色缸，顯微鏡，載玻片，鑷子，滴管，擦鏡紙等。擦鏡紙等。 試劑試劑：乙醇，甲醇，冰乙酸，流堇染料，乙醚，：乙醇，甲醇，冰乙酸，流堇染料，乙醚，香柏油，甲醇冰乙醇固定液等。香柏油，甲醇冰乙醇固定液等。 材料材料：帶有毛囊的發(fā)根。：帶有毛囊的發(fā)根。 實驗材料實驗材料 實驗步驟實驗步驟1、取材取材 取取2 3根頭發(fā)

5、，要帶有完整的毛囊組織。根頭發(fā)，要帶有完整的毛囊組織。2、軟化與涂片軟化與涂片 加加1滴滴40%醋酸軟化毛囊，醋酸軟化毛囊，5 10min后，刮下毛囊，棄發(fā)干，涂片后，刮下毛囊，棄發(fā)干，涂片1cm2大小，烘大小，烘干。干。3、固定固定 加固定液加固定液2 3滴，晾干。滴，晾干。4、水解水解 放入放入5N HCL中中10min，自來水沖洗，自來水沖洗2min，稍干后染色。稍干后染色。5、染色染色 加入數(shù)滴流堇染液，染色加入數(shù)滴流堇染液，染色10 15min沖洗，晾干。沖洗，晾干。6、觀察計數(shù)觀察計數(shù) 在顯微鏡下觀察并計數(shù)。在顯微鏡下觀察并計數(shù)。注意事項注意事項1、染料要現(xiàn)用現(xiàn)配。、染料要現(xiàn)用現(xiàn)配。2、要正確使用顯微鏡，避免損傷顯微鏡。、要正確使用顯微鏡，避免損傷顯微鏡。3、計數(shù)時要注意避開干擾因