1、高效液相色譜常見故障的判定及解決方法總匯壓力異常操作壓力的變化往往是故障的征兆。從下表中找出所觀察到的現象，并在右側的列表中參考相應的解決方法。A、沒有壓力顯示，沒有流動相流動原因解決方法1、電源問題1、接通電源，開機2、保險絲被燒壞2、更換保險絲3、控制器設定不正確或設定失敗3、a、采取恰當的設定b、修理或更換控制器4、柱塞桿折斷4、更換柱塞桿5、泵頭內有空氣5、溶劑脫氣、啟動泵抽出空氣6、流動相不足6、a、補充流動相b、更換入口濾頭7、單向閥損壞7、更換單向閥8、漏液8、擰緊或更換手緊接頭B、流動相流動正常，但沒有壓力顯示原因解決方法1、儀表損壞1、更換儀表2、壓力傳感器損壞2、更換壓力傳

2、感器C、壓力持續偏高原因解決方法1、流速設定過高1、調整流速設定2、柱前篩板堵塞2、a、在允許情況下反沖色譜柱b、更換篩板c、更換色譜柱3、流動相使用不當或緩沖鹽的結晶沉淀3、a、使用恰當的流動相b、沖洗色譜柱4、色譜柱選擇不當4、選擇恰當的色譜柱5、進樣閥損壞5、清洗或更換進樣閥6、柱溫過低6、提高溫度7、控制器失常7、修理或更換控制器8、保護柱阻塞8、清洗或更換保護柱9、在線過濾器阻塞9、清洗或更換在線過濾器D、壓力持續偏低原因解決方法1、流速設定過低1、調整流速2、系統漏液2、確定漏液位置并維修3、色譜柱選擇不當3、選擇恰當的色譜柱4、柱溫過高4、降低溫度5、控制器失常5、維修或更換控制

3、器E、壓力不斷上升原因解決方法1、見列表C1、見列表CF、壓力降為零原因解決方法1、見列表A、B1、見列表A、BG、壓力不斷下降，但不回零原因解決方法1、見列表D1、見列表DH、壓力波動原因解決方法1、泵中有氣體1、a、溶劑脫氣b、從泵中除去氣體2、單向閥損壞2、更換單向閥3、泵密封損壞3、更換泵密封4、脫氣不充分4、a、溶劑脫氣b、改變脫氣方法（使用在線脫氣法等）5、系統漏液5、確定漏液位置并維修6、使用梯度洗脫6、由于流動相粘度的變化引起的壓力波動漏液通常可以通過擰緊或更換管路接頭來解決漏液的問題。但值得注意的是過份擰緊會導致金屬接頭的漏液和塑料接頭的磨損。如果通過稍微擰緊接頭不能解決漏液

4、的問題，就必須將接頭取下，檢查是否損壞（例如，卡套損壞、密封表面有雜質）；損壞的接頭應該更換掉。A、接頭處漏液原因解決方法1、接頭松動1、擰緊2、接頭磨損2、更換3、接頭過緊3、a、擰松，再重新擰緊b、更換4、接頭被污染4、a、拆下清洗b、更換5、部件不匹配5、使用同一品牌的配件B、泵漏液原因解決方法1、單向閥松動1、a、擰緊單向閥（不必擰的過緊）b、更換單向閥2、接頭松動2、擰緊接頭（不必擰的過緊）3、混合器密封損壞3、a、更換混合器密封b、更換混合器4、泵密封損壞4、維修或更換泵密封件5、壓力傳感器損壞5、維修或更換壓力傳感器6、脈沖阻尼器損壞6、更換脈沖阻尼器7、比例閥損壞7、a、檢查隔

5、膜，如漏液立即更換b、檢查手緊接頭，損壞的立即更換8、放空閥的損壞8、a、擰緊放空閥b、更換放空閥C、進樣閥漏液原因解決方法1、轉子密封損壞1、重新安裝或更換進樣閥2、定量環阻塞2、更換定量環3、進樣口密封松動3、調整4、進樣針頭尺寸不合適4、使用恰當的進樣針5、廢液管中產生虹吸5、保持廢液管高于廢液液面6、廢液管阻塞6、更換或疏通廢液管D、色譜柱漏液原因解決方法1、尾端接頭松動1、擰緊接頭2、卡套內有填料2、拆下、清洗卡套、重新安裝3、篩板厚度不合適3、使用合適的篩板（參考下表）篩板選擇指導物質粒徑篩板孔徑3-4u0.5u5-20u2uE、檢測器漏液原因解決方法1、流通池墊片損壞1、a、避免

6、過大的背景壓力（壓力降）b、更換墊片2、流通池窗破碎2、更換窗口3、手緊接頭漏液3、擰緊或更換4、廢液管阻塞4、更換廢液管5、流通池阻塞5、重新安裝或更換液相色譜系統的許多問題都能在譜圖上反映出來。其中有一些問題可以通過改變設備參數得到解決；而其他的問題必須通過修改操作程序來解決。對于色譜柱和流動相的正確選擇是得到好的色譜圖的關鍵。A、 峰拖尾原因解決方法1、篩板阻塞1、a、反沖色譜柱b、更換進口篩板c、更換色譜柱2、色譜柱塌陷2、填充色譜柱3、干擾峰3、a、使用更長的色譜柱b、改變流動相或更換色譜柱4、流動相PH選擇錯誤4、調整PH值。對于堿性化合物，低PH值更有利得到對稱峰5、樣品與填料表

7、面的溶化點發生反應圖5、a、加入離子對試劑或堿性揮發性修飾劑b、更改色譜柱B、 峰前延原因解決方法1、柱溫低1、升tWj柱溫2、樣品溶劑選擇不恰當2、使用流動相作為樣品溶劑3、樣品過載3、降低樣品含量4、色譜柱損壞4、見A1、A2C、 峰分叉原因解決方法1、保護柱或分析柱污染圖1、取下保護柱再進行分析。如果必要更換保護柱。如果分析柱阻塞，拆下來清洗。如果問題仍然存在，可能是柱子被強保留物質污染，運用適當的再生措施。如果問題仍然存在，入口可能被阻塞，更換篩板或更換色譜柱。2、樣品溶劑不溶于流動相2、改變樣品溶劑。如果可能采取流動相作為樣品溶劑。D、 峰變形原因解決方法1、樣品過載1、減少樣品載量

8、E、早出的峰變形原因解決方法1、樣品溶劑選擇不恰當1、a、減少進樣體積b、運用低極性樣品溶劑F、早出的峰拖尾程度大于晚出的峰原因解決方法1、柱外效應1、a、調整系統連接（使用更短、內徑更小的管路）b、使用小體積的流通池G、K'增加時，脫尾更嚴重因解決方法二級保留效應，反相模式1、a、加入三乙胺（或堿性樣品）b、加入乙酸（或酸性%）c、加入鹽或緩沖劑（或離子化樣品）d、更換一支柱子二級保留效應，正相模式2、a、加入三乙胺（或堿性樣品）b、加入乙酸（或酸性%）c、加入水（或多官能團化合物）d、試用另一種方法3、二級保留效應，離子對3、加入三乙胺（或堿性樣品）H、酸性或堿性化合物的峰拖尾原因

9、解決方法1、緩沖不合適1、a、使用濃度50-100mM的緩沖液b、使用Pka等于流動相PH值的緩沖液卜額外的峰原因解決方法1、樣品中有其他組份1、正常2、前一次進樣的洗脫峰2、a、增加運行時間或梯度斜率b、提高流速3、空位或鬼峰3、a、檢查流動相是否純凈b、使用流動相作為樣品溶劑c、減少進樣體積J、保留時間波動原因解決方法1、溫控不當1、調好柱溫2、流動相組分變化2、防止變化（蒸發、反應等）3、色譜柱沒有平衡3、在每一次運行之前給予足夠的時間平衡色譜柱K、保留時間不斷變化原因解決方法1、流速變化1、重新設定流速2、泵中有氣泡2、從泵中除去氣泡3、流動相選擇不恰當3、a、更換合適的流動相b、選擇

10、合適的混合流動相L、基線漂移原因解決方法1、柱溫波動。（即使是很小的溫度變化都會引起基線的波動。通常影響示差檢測器、電導檢測器、較低靈敏度的紫外檢測器或其它光電類檢測器。）1、控制好柱子和流動相的溫度，在檢測器之前使用熱交換器圖2、流動相不均勻。（流動相條件變化引起的基線漂移大于溫度導致的漂移。）2、使用HPLC級的溶劑，高純度的鹽和添加劑。流動相在使用前進行脫氣，使用中使用氨氣。3、流通池被污染或有氣體3、用甲醇或其他強極性溶劑沖洗流通池。如有需要，可以用1N的硝酸。（不要用鹽酸）4、檢測器出口阻塞。（高壓造成流通池窗口破裂，產生噪音基線）4、取出阻塞物或更換管子。參考檢測器手冊更換流通池窗

11、。5、流動相配比不當或流速變化5、更改配比或流速。為避免這個問題可定期檢查流動相組成及流速。6、柱平衡慢，特別是流動相發生變化時6、用中等強度的溶劑進行沖洗，更改流動相時，在分析前用10-20倍體積的新流動相對柱子進行沖洗。7、流動相污染、變質或由低品質溶劑配成7、檢查流動相的組成。使用高品質的化學試劑及HPLC級的溶劑8、樣品中有強保留的物質（高K'值）以饅頭峰樣被洗脫出，從而表現出一個逐步升高的基線。8、使用保護柱，如有必要，在進樣之間或在分析過程中，定期用強溶劑沖洗柱子。9、使用循環溶劑，但檢測器未調整。9、重新設定基線。當檢測器動力學范圍發生變化時，使用新的流動相。10、檢測器

12、沒有設定在最大吸收波長處。10、將波長調整至最大吸收波長處M、基線噪音（規則的）原因解決方法1、在流動相、檢測器或泵中有空氣1、流動相脫氣。沖洗系統以除去檢測器或泵中的空氣。2、漏液圖2、見第三部分。檢查管路接頭是否松動，泵是否漏液，是否有鹽析出和不正常的噪音。如有必要，更換泵密封。3、流動相混合不完全3、用手搖動使混合均勻或使用低粘度的溶劑4、溫度影響（柱溫過高，檢測器未加熱）4、減少差異或加上熱交換器5、在同一條線上有其他電子設備5、斷開LC、檢測器和記錄儀，檢查干擾是否來自于外部，加以更正。6、泵振動6、在系統中加入脈沖阻尼器N、基線噪音（不規則的）原因解決方法1、漏液圖1、見第三部分。

13、檢查接頭是否松動，泵是否漏液，是否有鹽析出和不正常的噪音。如有必要，更換密封。檢查流通池是否漏液。2、流動相污染、變質或由低質溶劑配成2、檢查流動相的組成。3、流動相各溶劑不相溶3、選擇互溶的流動相4、檢測器/記錄儀電子元件的問題4、斷開檢測器和記錄儀的電源，檢查并更正。5、系統內有氣泡5、用強極性溶液清洗系統6、檢測器內有氣泡6、清洗檢測器，在檢測器后面安裝背景壓力調節器7、流通池污染（即使是極少的污染物也會產生噪音。）7、用1N的硝酸（不能用磷酸）清洗流通池8、檢測器燈能量不足8、更換燈9、色譜柱填料流失或阻塞9、更換色譜柱10、流動相混合不均勻或混合器工作不正常10、維修或更換混合器，在

14、流動相不走梯度時，建議不使用泵的混合裝置O、寬峰原因解決方法1、流動相組成變化1、重新制備新的流動相2、流動相流速太低2、調節流速3、漏液（特別是在柱子和檢測器之間）3、見section3。檢查接頭是否松動、泵是否漏液、是否有鹽析出以及不正常的噪音。如果必要更換密封。4、檢測器設定不正確4、調整設定5、柱外效應影響a、柱子過載b、檢測器對反應時間或池體積響應過大c、柱子與檢測器之間的管路太長或管路內徑太大d、記錄儀響應時間太長圖5、a、小體積進樣（例如：10ul而不是100ul）以1:10或1:100的比例稀釋樣品b、減少響應時間或使用更小的流通池c、使用內徑為0.007-0.01的短管路d、

15、減少響應時間6、緩沖液濃度太低6、增加濃度7、保護柱污染或失效7、更換保護柱8、色譜柱污染或失效，塔板數較低8、更換同樣類型的色譜柱。如果新柱子可以提供對稱的色譜峰，則用強溶劑沖洗舊柱子。9、柱入口塌陷9、打開柱入口，填補塌陷或更換柱子10、呈現兩個或多個未被完全分離的物質的峰10、選擇其它類型的色譜柱以改善分離效果11、柱溫過低11、提高柱溫。除非特殊情況，溫度不宜超過75C12、檢測器時間常數太大12、使用較小的時間常數P、分離度降低原因解決方法1、流動相污染或變質（引起保留時間變化）1、重新配置流動相2、保護柱或分析柱阻塞圖2、去掉保護柱進行分析。如果必要則更換保護柱。如果分析柱阻塞，可

16、進行反沖。如果問題仍然存在色譜柱可能被強保留的污染物損壞，建議使用恰當的再生程序。如果問題仍然存在，進口可能阻塞了，更換入口處的篩板或更換色譜柱。Q、所有的峰面積都太小原因解決方法1、檢測器衰減設定過高1、減少衰減的設定2、檢測器時間常數設定太大2、設定較小的時間常數3、進樣量太少3、增大進樣量4、記錄儀連接不當4、使用正確的連接R、所有的峰面積都太大原因解決方法1、檢測器衰減設定過低1、采取較大的衰減2、進樣過多2、減少進樣量3、記錄儀連接不正確3、正確連接記錄儀以下問題在使用進樣閥過程中有可能發生。A、手動進樣閥，轉動不靈原因解決方法1、轉子密封損壞1、更換或調整轉子密封2、轉子太緊2、調

17、整轉子的松緊度B、手動進樣閥，載樣困難原因解決方法1、進樣閥安裝不當1、重新安裝2、定量環阻塞2、清洗或更換定量環3、進樣器污染3、清洗或更換進樣器4、管路阻塞4、清洗或更換管路C、自動進樣閥，不能轉動原因解決方法1、無壓力（或電源）1、提供恰當的壓力（電源）2、轉子太緊2、調整轉子的松緊度3、進樣閥安裝不當3、重新安裝D、自動進樣閥，其它問題原因解決方法1、阻塞1、清洗或更換阻塞部件2、機械故障2、見隨機維修手冊3、控制器故障3、維修或更換控制器由氣味、景象和聲音可以發現的問題你需要運用你所有的感官去發現液相色譜的問題。你最好養成習慣，每天花上幾分鐘運用你的感官（除了味覺）來“感覺”你的液相

18、色譜是否存在問題，這樣可以幫助你迅速找到問題所在。例如：在你看到漏液之前，你可能首先聞到它的氣味。大部分的問題是可以通過眼睛看到。A、溶劑的氣味原因解決方法1、漏液1、見section32、濺出2、a、檢查廢液瓶是否已滿b、找到濺出的部位并清洗干凈B、 熱氣味原因解決方法1、儀器過熱1、a、檢查并調節通風設施b、檢查并調節溫度設定c、關掉儀器，查找維修手冊C、 讀數不正常原因解決方法1、壓力不正常1、見section22、柱溫箱問題2、a、檢查并調節設定b、參照用戶手冊3、檢測器燈失效3、更換燈D、燈警告原因解決方法1、壓力超出極限值1、a、檢查是否阻塞b、檢查并調節極限值的設定2、其它警示燈2、見用戶手冊E、警告音原因解決方法1、溶劑泄漏/濺出1、找到并解決2、其它警告音2、見用戶手冊F、刺耳的短音或長音原因解決方法1、軸承失效1、見用戶手冊2、潤滑不夠2、進行恰當的潤滑3、機械故障3、見用戶手冊常見故障及日常維護下表中列出了液相色譜常見的一些問題，右側中則列出的日常維護的方法可以減少問題出現的頻率。括號中的數字是建議進行維護的時間間隔。用戶手冊則提供您更多的維護方法。溶劑瓶問題維護1、進口篩板阻塞1、a、更換（3-6個月）b、過濾流動相，0.5u濾膜2、氣泡2、流動相脫氣泵