1、1臨床常用免疫學檢測2臨床常用免疫學檢測臨床常用免疫學檢測l血清免疫球蛋白測定血清免疫球蛋白測定l血清補體測定血清補體測定l細胞免疫檢測細胞免疫檢測l腫瘤標志物檢測腫瘤標志物檢測l自身抗體檢查自身抗體檢查l感染免疫檢測感染免疫檢測3第一節第一節 血清免疫球蛋白血清免疫球蛋白免疫球蛋白免疫球蛋白G檢測檢測l 為人體含量最多和最主要的Ig，占總免疫球蛋白的70%-80% 。l屬再次免疫應答抗體。l唯一可以通過胎盤的Ig，使新生兒獲得免疫抗體。l 參考值：7.0-16.6g/L4第一節第一節 血清免疫球蛋白血清免疫球蛋白臨床意義 生理性變化：胎兒IgG濃度與母體接近，出生后，3-4月達到最低，十六歲

2、前達到成人水平。 病理性 增高：各種慢性感染、淋巴瘤及自身免疫病。單純IgG增高可見于IgG型MM。 病理性減低：見于各種免疫缺陷病、重鏈病、輕鏈病及腎病綜合征、病毒感染、使用免疫抑制劑、甲亢、肌營養不良等。5第一節第一節 血清免疫球蛋白血清免疫球蛋白免疫球蛋白免疫球蛋白A檢測檢測 IgA：分為血清型IgA（占血清總Ig的10-15%），和分泌型IgA（ SIgA ）（存在于分泌液中）。 SIgA在局部免疫中起重要作用。主要由呼吸道、消化道和泌尿生殖道的淋巴樣組織產生。參考值：成人血清IgA為0.7-3.5g/L臨床意義 兒童生理性變化（類似IgG） 增高：見于IgA型MM、SLE、RA和肝硬

3、化、IgA腎病等。 減低：見于反復呼吸道感染、非IgA型MM、重鏈病、輕鏈病、自身免疫病、甲亢、肌營養不良等。 6第一節第一節 血清免疫球蛋白血清免疫球蛋白免疫球蛋白免疫球蛋白M檢測檢測l約占血清總Ig的5-10%，分子量最大，初次免疫應答產生，抗原刺激后最早出現的抗體。其殺菌、溶菌、溶血、促吞噬以及凝集作用比IgG高。l參考值 0.5-2.6g/Ll生理性變化：從孕20周起，胎兒自身可合成，胎兒和新生兒的IgM濃度是成人水平10%，8-16歲前達到成人水平。l病理性增高：病原體引起的原發性感染、自身免疫病、肝硬化、原發性巨球蛋白血癥。l病理性減低：見于IgG型重鏈病,IgA型MM，免疫缺陷、

4、免疫抑制后、淋巴瘤、腎綜及代謝性疾病等。7第一節第一節 血清免疫球蛋白血清免疫球蛋白免疫球蛋白免疫球蛋白E檢測檢測 約占0.002%。主要由鼻咽部、支氣管、胃腸道等粘膜固有層的漿細胞分泌，為親細胞抗體，介導I型變態反應的抗體。與變態反應、寄生蟲感染、皮膚過敏有關。l參考值 0.10.9mg/Ll生理性變化：嬰兒水平很低，之后逐漸升高，12歲達成人水平。l病理性增高：IgE型MM、重鏈病、肝臟病、結節病、類風濕關節炎、血管炎、過敏性哮喘、寄生蟲感染等。l病理性減低：先天性或獲得性丙種球蛋白缺乏癥、惡性重鏈病、免疫抑制劑使用、共濟失調性毛細血管擴張癥。8 是一種單克隆是一種單克隆B淋巴細胞異常增殖

5、時產生的淋巴細胞異常增殖時產生的IgG分分子或片段，一般不具有抗體活性。子或片段，一般不具有抗體活性。l參考值：參考值：蛋白電泳法、免疫電泳法：陰性蛋白電泳法、免疫電泳法：陰性l意義：意義： 1.多發性骨髓瘤（多發性骨髓瘤（MM）：）：IgG型占型占60%左右；左右； IgA型占型占20%左右；左右； 輕鏈型占輕鏈型占15%左右；左右； IgD、 IgE型罕見。型罕見。 2.巨球蛋白血癥。巨球蛋白血癥。 3.重鏈?。ㄖ劓湶。℉CDs）。）。4.輕鏈病。輕鏈病。5.半分子病。半分子病。 6.惡性淋巴瘤。惡性淋巴瘤。7良性良性M蛋白血癥。蛋白血癥。血清M蛋白測定（M protein，monoclo

6、nal immunoglobulins)第一節第一節 血清免疫球蛋白血清免疫球蛋白血清補體測定血清補體測定l總補體溶血活性（CH50）測定：補體經典途徑溶血活性。l參考值 試管法：50100kU/Ll意義：主要反映補體經典途徑（c1-c9）綜合水平l 增高： 見于急性炎癥、急性組織損傷、惡性腫瘤。l 降低 ： 見于急性腎小球腎炎、自身免疫性疾?。ㄈ鏢LE)、感染性心內膜炎、慢性肝病、肝硬化、重癥營養不良、遺傳性補體缺乏癥等。910血清補體測定血清補體測定l血清血清C1q：是構成補體是構成補體C1的重要組分。的重要組分。C1由由1個個C1q分子、分子、2個個C1r分子和分子和2個個C1s分子構成

7、的鈣離子依賴分子構成的鈣離子依賴性復合物。性復合物。 參考值：參考值：ELISA法法0.18-0.19g/L 免疫比濁法免疫比濁法0.0250.05g/L 增高：增高： 見于骨髓炎、類風濕關節炎、過敏性紫癜等。見于骨髓炎、類風濕關節炎、過敏性紫癜等。 降低：降低： 見于見于SLE、混合性結締組織病、重度營養不良、混合性結締組織病、重度營養不良、腎病綜合征、腎小球腎炎、重癥聯合免疫缺陷等。腎病綜合征、腎小球腎炎、重癥聯合免疫缺陷等。11血清補體測定血清補體測定l血清血清C3：主要由巨噬細胞和肝臟合成，在經典激活主要由巨噬細胞和肝臟合成，在經典激活途徑與旁路激活途徑中發揮重要作用。途徑與旁路激活途

8、徑中發揮重要作用。 參考值：免疫比濁法參考值：免疫比濁法0.81.5g/L 增高：增高： 作為急性時相蛋白，在急性炎癥、傳染病早期、作為急性時相蛋白，在急性炎癥、傳染病早期、急性組織損傷、惡性腫瘤、移植排斥反應。急性組織損傷、惡性腫瘤、移植排斥反應。 降低降低 ：補體合成能力降低（慢性活動性肝炎、慢性肝：補體合成能力降低（慢性活動性肝炎、慢性肝病、肝硬化）；消耗或丟失太多（如系統性紅斑狼瘡病、肝硬化）；消耗或丟失太多（如系統性紅斑狼瘡及大多數腎小球腎炎）；先天性補體缺乏（遺傳性及大多數腎小球腎炎）；先天性補體缺乏（遺傳性C3缺乏癥）。缺乏癥）。12血清補體測定血清補體測定l血清C4測定：由肝臟

9、、吞噬細胞合成，參與補體的經典激活途徑。l參考值：0.20-0.60g/L。l臨床意義基本與C3相似 增高：見于各種傳染病、急性炎癥和組織損傷。 降低：見于自身免疫性肝炎、狼瘡性腎炎、SLE、T1DM、類風濕關節炎、IgA腎病、遺傳性IgA缺乏癥等。13第二節第二節 細胞免疫檢測細胞免疫檢測一 T細胞亞群的檢測 （一） T細胞花結形成試驗：檢測T細胞數目 （二） T細胞轉化試驗：反映T細胞的免疫功能 （三） T細胞分化抗原測定：CD3,CD4,CD8 二 B細胞分化抗原檢測：CD19,CD20,CD22三 自然殺傷細胞免疫檢測四 細胞因子檢測14一一T細胞花結形成試驗細胞花結形成試驗T細胞表面

10、有特意性綿羊紅細胞E受體和T細胞識別體TCR其中E受體被用做鑒定和計數T細胞的標志。E受體可與綿羊紅細胞結合成花結樣細胞，稱E玫瑰花結形成實驗ERFT影響因素較多，因此逐漸被檢測CD抗原方法所取代。第二節第二節 細胞免疫檢測（細胞免疫檢測（T細胞）細胞）15第二節第二節 細胞免疫檢測細胞免疫檢測l（二）（二）T T細胞轉化試驗細胞轉化試驗 T淋巴細胞在植物血凝素（PHA）或刀豆蛋白A（ConA)作用下體外經37培養72h，取培養細胞作涂片染色鏡檢，計數淋巴細胞轉化為母細胞的轉化率。 正 常 人 外 周 血 淋 巴 細 胞 轉 化 百 分 率 為60.17.6%. 主要反映T細胞的免疫功能。16

11、第二節第二節 細胞免疫檢測細胞免疫檢測參考值參考值免疫熒光法免疫熒光法IFA CD3 63.110.8 CD3/ CD4（Th為為42.89.5 CD3/ CD8 （Ts為為19.65.9 CD4 CD8 Th / Ts 為為2.20.7/1流式細胞術流式細胞術 CD3 6185 CD3/ CD4（Th 2858 CD3/ CD8 （Ts為為1948 CD4 CD8 Th / Ts 為為0.92.0/1 17l臨床意義臨床意義lCD3+下降：下降：見于自身免疫性疾病，如見于自身免疫性疾病，如SLE、RA。lCD3+/CD4+下降：下降：應用免疫抑制劑、惡性腫瘤、艾滋應用免疫抑制劑、惡性腫瘤、艾

12、滋病。病。lCD3+/CD8+下降：下降：見于自身免疫性疾病、變態反應。見于自身免疫性疾病、變態反應。lCD4 +/CD8+比值增高：比值增高：見于自身免疫性疾病、變態反見于自身免疫性疾病、變態反應、病毒感染、器官移植排斥反應。應、病毒感染、器官移植排斥反應。lCD4 +/CD8+比值下降：比值下降：見于見于艾滋?。ò滩。?.25l臨床意義：l前列腺癌：t-PSA、f-PSA升高，f-PSA/t-PSA比值下降l前列腺炎、前列腺增生t-PSA輕度升高（4.010.0g/L）22第三節第三節 腫瘤標志物檢測腫瘤標志物檢測糖脂腫瘤標志物糖脂腫瘤標志物-糖鏈抗原糖鏈抗原199（CA199）l胰腺、

13、肝膽、胃腸道l參考值：3.7萬U/Ll臨床意義：l胰腺癌首選腫瘤標志物l膽囊癌、膽管癌、胃癌、結腸癌l急性胰腺炎、膽管炎、肝炎、肝硬化23第三節第三節 腫瘤標志物檢測腫瘤標志物檢測糖脂腫瘤標志物糖脂腫瘤標志物-癌抗原癌抗原125（CA125）l存在于卵巢、輸卵管、子宮、宮頸l參考值：3.5萬U/Ll臨床意義：l卵巢癌（早期診斷、復發診斷敏感性5090%）l宮頸癌、乳腺癌、消化系統腫瘤、肺癌l良性卵巢瘤、子宮肌瘤l肝硬化失代償期l早孕24第三節第三節 腫瘤標志物檢測腫瘤標志物檢測酶類腫瘤標志物酶類腫瘤標志物-神經元特異性烯醇化酶（神經元特異性烯醇化酶（NSE）測定）測定l存在于神經元和神經內分泌

14、組織l參考值：15g/Ll臨床意義：l小細胞肺癌l神經母細胞瘤l標本溶血2526第四節第四節 自身抗體檢測自身抗體檢測l自身免疫性疾病自身免疫性疾病（AID）l外界抗原刺激下機體免疫系統對自身組織或成分產生外界抗原刺激下機體免疫系統對自身組織或成分產生免疫應答免疫應答lRFlANAl抗抗TG、TMlANCAlACA27第四節第四節 自身抗體檢測自身抗體檢測l類風濕因子（RF）：變性IgG刺激機體產生的自身抗體。RA血清、關節液中。有IgG、IgA、IgM、IgD、IgE五種類型。乳膠凝集法測定的主要是IgM型。l測定方法：乳膠凝集法、濁度分析法、ELISA法。l70%RA患者呈陽性，其他自身免

15、疫性疾病、慢性活動性肝炎、結核病、感染性心內膜炎也多呈陽性反應。28第四節第四節 自身抗體檢測自身抗體檢測l抗核抗體（抗核抗體（ANA）：）：是以細胞核成分為靶抗原的自身是以細胞核成分為靶抗原的自身抗體的總稱。廣義的包括細胞核、細胞質。見于抗體的總稱。廣義的包括細胞核、細胞質。見于SLE（80%100%）、）、MCTD（100%）、原發性膽汁性肝硬）、原發性膽汁性肝硬化化95%100%）、）、DM （30%50%）、）、RA等。等。l參考值：參考值：IIF法陰性，血清滴度法陰性，血清滴度1：40為陽性為陽性l間接免疫熒光檢查有六種熒光模型：間接免疫熒光檢查有六種熒光模型： 均質型：與抗均質型：

16、與抗dsDNA抗體、抗組蛋白抗體、抗核小體抗體有關抗體、抗組蛋白抗體、抗核小體抗體有關 顆粒型：抗顆粒型：抗U1-RNP、抗、抗Sm、抗、抗SS-B/La、抗、抗SS-A/Ro 著絲點型：抗著絲點抗體著絲點型：抗著絲點抗體 核仁型：核糖體、核仁型：核糖體、U3-RNP、RNA聚合酶、抗聚合酶、抗Scl-70、PM-Scl抗體抗體 核膜型：抗核孔復合物和抗板層素抗體核膜型：抗核孔復合物和抗板層素抗體 核點型：核點型：p80盤曲蛋白抗體、盤曲蛋白抗體、Sp100抗體抗體 29l第四節第四節 自身抗體檢測自身抗體檢測抗心磷脂抗體l抗心磷脂抗體（ACA）是一組針對各種帶負電荷磷脂的自身抗體。與內皮細胞

17、或血小板膜上的磷脂結合，造成血液高凝狀態、溶血性貧血。l主要出現在SLE、抗磷脂綜合征等自身免疫性疾病，并與血小板減少、狼瘡腦病、血管栓塞、自發性流產有關。30第五節感染免疫檢測（細菌第五節感染免疫檢測（細菌）血清抗鏈球菌溶血素“O”測定l參考值：參考值： 乳膠凝集法（乳膠凝集法（LAT）：）：500U l意義：增高意義：增高 常見于常見于A組溶血鏈球菌感染相關疾病，組溶血鏈球菌感染相關疾病，如急性上呼吸道感染、感染性心內膜炎、風濕熱、鏈如急性上呼吸道感染、感染性心內膜炎、風濕熱、鏈球菌感染后腎小球腎炎等。球菌感染后腎小球腎炎等。lASO 在在A組溶血鏈球菌感染后組溶血鏈球菌感染后1周開始升高

18、，周開始升高，46周周達高峰，可持續幾個月或幾年。達高峰，可持續幾個月或幾年。31 肥達（肥達（Widal）反應：傷寒和副傷寒沙門菌菌）反應：傷寒和副傷寒沙門菌菌液為抗原，檢測患者血清有無相應抗體。液為抗原，檢測患者血清有無相應抗體。參考值：參考值：直接凝集法直接凝集法lO（菌體）（菌體）1：80，H（鞭毛）（鞭毛）1：160l副傷寒甲、乙、丙副傷寒甲、乙、丙1：80第五節感染免疫檢測（細菌第五節感染免疫檢測（細菌）傷寒和副傷寒沙門菌免疫測定32l臨床意義（臨床意義（O菌體，菌體，H鞭毛）鞭毛）lO不高，不高，H升高升高 預防接種或非特異性回憶反應預防接種或非特異性回憶反應 lO升高，升高，H

19、不高不高 感染早期或與感染早期或與O有交叉反應的有交叉反應的其他沙門菌感染。其他沙門菌感染。lO升高，升高，H升高升高 傷寒傷寒第五節感染免疫檢測（細菌第五節感染免疫檢測（細菌）傷寒和副傷寒沙門菌免疫測定33第五節感染免疫檢測（病毒第五節感染免疫檢測（病毒） TORCH試驗試驗lTORCH試驗為婦產科產前的常規檢查項目，早孕期感染可致新生兒畸形，主要影響神經系統和智力。lTORCH包括：l風疹病毒：2種抗體均無，注射疫苗保護。有IgM抗體做婦產科咨詢后決定是否治療性流產或繼續妊娠。有IgG抗體注意滴度變化。l巨細胞病毒：IgM型為近期感染， IgG型多為既往感染。l單純皰疹病毒型、型：IgM型

20、為近期感染， IgG型多為既往感染。l弓形蟲： IgM 型抗體提示現癥感染， IgG型抗體提示既往感染。34l嚴重急性呼吸綜合征(SARS)（非典型肺炎）是由 SARS冠狀病毒(SARSCoV)引起的21世紀的新傳染病。SARSCoV是具有包膜的單鏈正義RNA病毒是導致SARS的病原體。l參考值ELISA和IFA檢測抗體陰性；RTPCR檢測RNA陰性l臨床意義抗體陽性表明曾感染過SARSCoV，由陰性到陽性的血清轉化，或者急性期到恢復期抗體效價增高4倍以上，表明有近期感染；PCR陽性表示標本中有SARSCoV的遺傳物質（RNA）。第五節感染免疫檢測（病毒第五節感染免疫檢測（病毒）嚴重急性呼吸綜

21、合征病毒抗體及RNA測定第五節感染免疫檢測（寄生蟲）第五節感染免疫檢測（寄生蟲）l日本血吸蟲抗體測定：IgE、IgM陽性早期診斷， IgG陽性恢復期。l囊蟲抗體測定：IgG陽性見于囊蟲病，可用作流行病學調查。l瘧原蟲抗體和抗原測定：陽性提示近期有瘧原蟲感染。3536 性傳播疾病近年我國發病率呈上升趨勢，多由衣原體、支原體、梅毒螺旋體、淋球菌、人獲得性免疫缺陷病毒引起。(一)衣原體抗體測定衣原體包括沙眼衣原體、鸚鵡熱衣原體和肺炎衣原體三種，其中沙眼衣原體(CT)是引起性傳播疾病常見的病原體之一。參考值IFA法IGM效價l：32，IgG效價1:512。臨床意義IgM陽性提示近期有CT感染，有利于早

22、期診斷；IgG在發病后68周出現，持續時間較長；提示曾有過CT感染 。第五節感染免疫檢測（性傳播疾病第五節感染免疫檢測（性傳播疾病）37(二)支原體的血清學測定 對人致病的主要有肺炎支原體、解脲人原體、人型支原體和生殖道支原體。l參考值補體結合試驗：效價1：64；間接血凝試驗：陰性l臨床意義單份血清效價1：641：128者或雙份血清有4倍以上增長者，有診斷意義。間接血凝試驗的敏感性高于補體結合試驗，感染發病后7天出現陽性。第五節感染免疫檢測（性傳播疾病第五節感染免疫檢測（性傳播疾?。?8l（三）梅毒螺旋體抗體測定（三）梅毒螺旋體抗體測定l梅毒螺旋體侵入人體后，在血清中除可出現特異性抗體梅毒螺旋

23、體侵入人體后，在血清中除可出現特異性抗體外，還可出現非特異性抗體外，還可出現非特異性抗體(反應素反應素)。 參考值：檢測非特異性抗體的參考值：檢測非特異性抗體的定性定性試驗：快速血漿反應試驗：快速血漿反應素試驗素試驗(RPR)陰性；不加熱血清反應素試驗陰性；不加熱血清反應素試驗(USR)陰性；陰性；性病研究實驗室試驗性病研究實驗室試驗(VDRL)陰性；陰性；l檢測梅毒螺旋體的特異性抗體的檢測梅毒螺旋體的特異性抗體的確診確診試驗：梅毒螺旋體試驗：梅毒螺旋體血凝試驗血凝試驗(TPHA)和熒光螺旋體抗體吸收試驗和熒光螺旋體抗體吸收試驗(FTAABS)均陰性。均陰性。l臨床意義：臨床意義：RPR敏感性高；定性試驗陽性的情況下，必敏感性高；定性試驗陽性的情況下，必須進行確診試驗，陽性可確診梅毒。須進行確診試驗，陽性可確診梅毒。第五節感染免疫檢測（性傳播疾病第五節感染免疫檢測（性傳播疾?。?9l（四）艾滋病血清學檢查（四）艾滋病血清學檢查人獲得性免疫缺陷病毒人獲得性免疫缺陷病毒(HIV)是艾滋病是艾滋病(AIDS)的病原體。的病原體。l參考值參考值篩