1、1、(2011浙江高考)將ada（腺苷酸脫氨酶基因）通過質粒pET28b導入大腸桿菌并成功表達腺苷酸脫氨酶。下列敘述錯誤的是()A.每個大腸桿菌細胞至少含一個重組質粒B.每個重組質粒至少含一個限制性核酸內切酶識別位點C.每個限制性核酸內切酶識別位點至少插入一個adaD.每個插入的ada至少表達一個腺苷酸脫氨酶分子2、(2011海南高考)回答有關基因工程的問題：（1）構建基因工程表達載體時，用不同類型的限制酶切割DNA后，可能產生黏性末端，也可能產生 末端。若要在限制酶切割目的基因和質粒后使其直接進行連接，則應選擇能使二者產生 （相同、不同）黏性末端的限制酶。（2）利用大腸桿菌生產人胰島素時，構

2、建的表達載體含有人胰島素基因及其啟動子等，其中啟動子的作用是 。在用表達載體轉化大腸桿菌時，常用 處理大腸桿菌，以利于表達載體進入；為了檢測胰島素基因是否轉錄出了mRNA，可用標記的胰島素基因片段作探針與mRNA雜交，該雜交技術稱為 。為了檢測胰島素基因轉錄的mRNA是否翻譯成 ，常用抗原抗體雜交技術。（3）如果要將某目的基因通過農桿菌轉化法導入植物細胞，先要將目的基因插入農桿菌Ti質粒的 中，然后用該農桿菌感染植物細胞，通過DNA重組將目的基因插入植物細胞的 上。3、（2010江蘇高考）下表中列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點，圈l、圈2中箭頭表示相關限制酶的酶切位點。請回答下列問題：（1

3、）一個圖1所示的質粒分子經Sma 切割前后，分別含有 個游離的磷酸基團。（2）若對圖中質粒進行改造，插入的Sma酶切位點越多，質粒的熱穩定性越 。（3）用圖中的質粒和外源DNA構建重組質粒，不能使用Srna 切割，原因是 。（4）與只使用EcoR I相比較，使用BamH 和Hind 兩種限制酶同時處理質粒、外源DNA的優點在于可以防止 。（5）為了獲取重組質粒，將切割后的質粒與目的基因片段混合，并加入 酶。（6）重組質粒中抗生素抗性基因的作用是為了 。（7）為了從cDNA文庫中分離獲取蔗糖轉運蛋白基因，將重組質粒導入喪失吸收蔗糖能力的大腸桿菌突變體，然后在 的培養基中培養，以完成目的基因表達的

4、初步檢測。4、（2009浙江高考）下列關于基因工程的敘述，錯誤的是A目的基因和受體細胞均可來自動、植物或微生物B限制性核酸內切酶和DNA連接酶是兩類常用的工具酶C人胰島素原基因在大腸桿菌中表達的胰島素原無生物活性D載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細胞和促進目的基因的表達5、（2009安徽高考）2008年諾貝爾化學獎授予了“發現和發展了水母綠色熒光蛋白“的三位科學家。將綠色熒光蛋白基因的片段與目的基因連接起來組成一個融合基因，再將該融合基因轉入真核生物細胞內，表達出的蛋白質就會帶有綠色熒光。綠色熒光蛋白在該研究中的主要作用是A追蹤目的基因在細胞內的復制過程B追蹤目的基因插入到染色體上的位

5、置C追蹤目的基因編碼的蛋白質在細胞內的分布D追蹤目的基因編碼的蛋白質的空間結構 6、（2009上海高考）人體細胞內含有抑制癌癥發生的P53基因，生物技術可對此類基因的變化進行檢測。（1）目的基因的獲取方法通常包括_和_。（2）上圖表示從正常人和患者體內獲取的P53基因的部分區域。與正常人相比，患者在該區域的堿基會發生改變，在上圖中用方框圈出發生改編的堿基對，這種變異被稱為_。（3）已知限制酶E識別序列為CCGG,若用限制酶E分別完全切割正常人和患者的P53基因部分區域（見上圖），那么正常人的會被切成_個片段，而患者的則被切割成長度為_對堿基和_對堿基的兩種片段。（4）如果某人的P53基因部分區

6、域經限制酶E完全切割后，共出現170、220、290和460堿基對的四種片段，那么該人的基因型是_（以P+表示正常基因，Pn表示異常基因）。7、（2009江蘇高考）蘇云金桿菌（Bt）能產生具有殺蟲能力的毒素蛋白。下圖是轉Bt毒素蛋白基因植物的培育過程示意圖（為抗氨芐青霉素基因），據圖回答下列問題。（1）將圖中的DNA用Hind、BamH完全酶切后，反應管中有 種DNA片段。（2）圖中表示 Hind與BamH酶切、DNA連接酶連接的過程，此過程可獲得 種重組質粒；如果換用Bst l與BamH酶切，目的基因與質粒連接后可獲得 種重組質粒。 （3）目的基因插入質粒后，不能影響質粒的 。（4）圖中的T

7、i質粒調控合成的vir蛋白，可以協助帶有目的基因的TDNA導人植物細胞，并防止植物細胞中 對TDNA的降解。（5）已知轉基因植物中毒素蛋白只結合某些昆蟲腸上皮細胞表面的特異受體，使細胞膜穿孔，腸細胞裂解，昆蟲死亡。而該毒素蛋白對人類的風險相對較小，原因是人類腸上皮細胞 。 （6）生產上常將上述轉基因作物與非轉基因作物混合播種，其目的是降低害蟲種群中的 基因頻率的增長速率。1、C 2（1）平 相同 （2）RNA聚合酶識別和結合的部位 Ca2+ 分子雜交技術 蛋白質（3）TDNA 染色體DNA3（1）0、2（2）高（3）Sma會破壞質粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因（4）質粒和含目的基因的外源DNA片段自身環化（5）DNA連接（6）鑒別和篩選含有目的基因的細胞（7）蔗糖為唯一含碳營養物