1、實驗一 生化實驗基本操作一. 玻璃儀器的洗滌在生化實驗中，玻璃儀器潔凈與否，是獲得準確結果的重要環節。潔凈的玻璃儀器內壁應十分明亮光潔，無水珠附著在玻壁上。（一） 常用的洗滌方法：1.一般儀器，如燒杯、試管等可用毛刷蘸肥皂液、合成洗滌劑仔細刷洗。然后用自來水反復沖洗，最后用少量蒸餾水沖洗23次，倒置在器皿架上晾干或置于烘箱烤干備用。2.容量分析儀器如吸量管、容量瓶、滴定管等，不能用毛刷刷洗。用后應及時用自來水多次沖洗，細心檢查潔凈程度，根據掛不掛水珠采取不同處理方法。（1）如不掛水珠，用蒸餾水沖洗、干燥，方法同上；（2）如掛水珠，則應瀝干后用重鉻酸鉀洗液浸泡46小時，然后按上法順序操作，即先用

2、自來水沖洗，再用蒸餾水沖洗，最后干燥。3.粘附有血漿的刻度吸量管等，有三種洗滌方法：（1）先用45%尿素溶液浸泡，使血漿蛋白溶解，然后用自來水沖洗；（2）也可用1%氨水浸泡，使血漿溶解，然后再依次用1%稀鹽酸溶液、自來水沖洗；（3）以上二法如達不到清潔要求，可浸泡于重鉻酸鉀洗液46小時，再用大量自來水沖洗，最后用蒸餾水沖洗23次。4.新購置的玻璃儀器，應先置于12%稀鹽酸溶液中浸泡26小時，除去附著的游離堿，再用自來水沖洗干凈，最后用蒸餾水沖洗23次。5.凡用過的玻璃儀器，均應立即洗滌，久置干涸后洗滌十分困難。如不能及時洗滌，先用流水初步沖洗后浸泡在清水中，待后按常規處理。 （二）使用重鉻酸鉀

3、洗液（以下簡稱洗液）時應注意以下幾點：1.需用洗液浸泡的容器，在浸泡前應盡量瀝干。否則會因洗液被稀釋而降低洗液的氧化力。2.Hg2+、Ba2+、Pb2+ 等離子可與洗液發生化學反應，生成不溶性化合物沉積在容器壁上。因此，凡接觸過上述離子的容器，應先除去上述離子（可用稀硝酸或510%EDTA鈉清除）。3.油類、有機溶劑等有機化合物可使洗液還原失效。因此，容器壁上附有大量油類、有機物時，應先除去。4.洗液的酸性和氧化性很強，使用時應格外注意，千萬不要滴落在皮膚或衣物上，以免灼傷或燒壞。5.洗液顏色由深棕色變為綠色時，說明洗液已經失效，應停止使用，更換新液。因重鉻酸變成硫酸鉻后不再具有氧化性。備注：

4、重鉻酸鉀洗液的配制 取重鉻酸鉀20g溶于20ml蒸餾水中，加熱至沸。冷卻后再將200ml濃硫酸慢慢加入，邊加邊攪拌。注意：此時可產生高熱。為防止容器破裂，應選用耐酸搪瓷缸或耐高溫的玻璃器皿，切忌用量筒及試劑瓶等配制。為防止洗液吸收空氣中的水分而被稀釋變質，洗液應貯存于帶蓋的容器中。當清潔效力降低時，再加入少量重鉻酸鉀及濃硫酸就可繼續使用。二. 吸量管的使用 吸量管和定量吸(移)液器(微量加樣器)均為用來轉移一定體積溶液的量器。（一） 吸量管：生化實驗中常用的有三種，最常用的是刻度吸量管。1.刻度吸量管：（1）刻度吸量管的種類： 按容量規格來分，有0.1、0.2、0.25、0.5、1、2、5、1

5、0ml等數種。其精密度按不同的容積可達移取量的0.11%。通常將管身標明的總容量分刻為100等分。因此，10ml的吸量管一格代表0.1ml；1ml的吸量管一格代表0.01ml,其余類推。 按“零”點位置來分，有“O”點在吸量管上端的（即讀數從上而下逐漸增大），也有“O”點在吸量管下端的（讀數從下而上逐漸增大)。兩種標示方法，在使用時各有方便之處。 按刻度方法來分，刻度吸量管也有兩種，一種是刻度刻到尖端的，將液體放出時，應吹出殘留在吸量管尖端的少量液體(我實驗室的刻度吸量管全部是這一種)，另一種是刻度不刻到尖端的。（2）刻度吸量管的正確使用方法：用右手拇指和中指夾住管身，將吸量管的尖端伸入試液深

6、處，左手持洗耳球把試液吸入管內至高過刻度以上時，迅速用右手食指按住吸量管的上口，以控制試液的泄放。吸液后應盡量使吸量管保持垂直，使右眼與刻度等高，稍微輕抬食指或輕輕轉動吸量管，使試液面緩慢降落，至管內試液彎月面的最低點與吸量管的刻度線相齊為止。然后將吸量管插到需加試劑的容器中，讓尖端與容器內壁靠緊，松開食指讓液體流出。液體流完后再等15秒鐘，捻動一下吸量管后移去（如需吹的吸量管，則吹出尖端的液體后再捻轉一下吸量管移去）。（3）使用刻度吸量管的注意事項： 選擇適當規格的吸量管：吸量管的最大容積應等于或略大于所需容積（ml數）。 仔細看清吸量管的刻度情況：刻度是否包括吸量管尖端的液體？讀數方向是從

7、上而下，還是從下而上？ 拿吸量管時，刻度一定要面向自己，以便讀數。 吸取試劑時應注意三點：一是先吹去吸量管內可能存在的殘留液體，二是將吸量管插入試劑液面深部(以免吸液過程中因液面降低而吸入空氣產生氣泡或管內試劑進入洗耳球)，三是使用洗耳球(不可直接用口吸)。 按吸量管上口時應該用食指，不能用拇指。 吸取粘滯性大的液體(如血液、血漿、血清等)時，除選用合適的吸管(奧氏管)外，應注意拭凈管尖附著的液體，盡量減慢放液速度(用食指壓力控制)，待液體流盡后吹出管尖殘留的最后一滴液體。 使用的吸量管應干凈、干燥無水。如急用而又有水時，可用少量欲取試劑沖洗3次，以免試劑被稀釋。 2.移液吸量管：也有兩種，常

8、見的一種是吸量管的上端只有一個刻度，另一種是除了在吸量管上端有刻度外，在吸量管下端狹窄處也有一刻度線。無論哪一種，在使用時將量取的液體放出后，只需將吸量管的尖端觸及受器壁約半分鐘即可，不得吹出尖端的液體。3.奧氏吸量管：準確度最高，使用時必需吹出留在尖端的液體。 （二）定量吸(移)液器(微量加樣器)：定量吸液器是吸量管的革新產品。由塑料制成。目前，因產地廠家不同其質量、價格差異十分懸殊。 1.定量吸液器的優點：使用方便，取、加樣迅速，計量準確，不易破損，能吸取多種樣品（只換吸嘴即可）。2.定量吸液器的類型：有兩種類型。 （1）固定式：只能取加一定容量的試劑，不能隨意調節取加樣量。其規格有10l

9、、20l、25l、30l、50l、100l、200l、250l、300l、400l、500l、1000l等。（2）可調式：在一定容量范圍內可根據需要進行調節取加樣量。例如規格為50200l的可調式定量吸液器，可以在50到200l的范圍內根據需要調節成設計容許的各種取加樣容量（60l、85l、110l、170l、200l等）。 一般來講，固定式吸液器比較準確，可調式吸液器使用較為方便。3.定量吸液器的使用方法： （1）選擇適當的吸液器。吸液前先把吸嘴套在吸引管上，套上后要輕輕旋緊一下，以保證結合嚴密。 （2）持法：右手四指（除大拇指外）并攏握住吸液器外殼（使外殼突起部分搭在食指近端），大拇指輕輕

10、放在吸液器的按鈕上。 （3）取樣(吸液)：用大拇指按下按鈕到第一停止點，以排出一定容量的空氣，隨后把吸嘴尖浸入取樣液內，徐徐松開大拇指，讓按鈕慢慢自行復原，取樣即告完成。 （4）排液：將吸液器的吸嘴尖置于加樣容器壁上，用大拇指慢慢地將按鈕按下到第一停止點，停留1秒鐘（粘性較高的溶液停留時間應適當延長）。然后再把按鈕按到第二停止點上，讓吸嘴沿管壁向上滑動。當吸嘴尖與容器壁或溶液離開時，方可釋放按鈕，使其恢復到初始位置。 （5）吸液器用后應及時取下吸嘴。將吸嘴用自來水沖洗后浸入盛水的容器內（以防干涸），待實驗結束后集中仔細清洗。三. 溶液的混勻 （一）混勻的目的： 使反應體系內的各種物質分子很好地

11、互相接觸，充分進行反應；使欲稀釋的溶液成為濃度均一的溶液。（二）混勻的方法通常有以下幾種： 使盛器作離心運動。 左手持試管上端，用右手指輕擊試管下半部，使管內溶液作旋轉運動。 利用旋渦混合（振蕩）器混勻。 不得已時可用干燥清潔的玻璃棒攪勻。（三）混勻的注意事項：防止盛器內的液體濺出或被污染。嚴禁用手指堵塞管口或瓶口震蕩混勻。 四. 離心機的使用 離心法是分離沉淀的一種方法。它是利用離心機轉動產生的離心力，使比重較大的物質沉積在管底，以達到與液體分離的目的。因液體在沉淀的上部，故稱清亮的液體部分為上清液。 電動離心機的使用方法： 1.將欲離心的液體，置于離心管或小試管內。并檢查離心管或小試管的大

12、小是否與離心機的套管相匹配。 2.取出離心機的全部套管，并檢查套管底部是否鋪有軟墊，有無玻璃碎片或漏孔（有玻璃碎片必須取出，漏孔應該用蠟封住）。檢查合格后，將盛有離心液的兩個試管分別放入套管中，然后連套管一起分置于粗天平的兩側，通過往離心管與套管之間滴加水來調節兩邊的重量使之達到平衡。 3.將已平衡的兩只裝有離心管的套管，分別放入離心機相互對應的兩插孔內。蓋上離心機蓋。打開電源開關。逐檔扭動旋鈕，緩慢增加離心機轉速，直至所需數值。達到離心所需時間后，將轉速旋鈕逐步回零，關閉電源，讓離心機自然停止轉動后（不可人為制動），取出離心管。實驗二 蛋白質的呈色反應雙縮脲反應一、實驗目的1了解構成蛋白質的

13、基本結構單位及主要連接方式。2了解蛋白質和某些氨基酸的呈色反應原理。3學習幾種常用的鑒定蛋白質和氨基酸的方法。二、實驗原理尿素加熱至180左右，生成雙縮脲并放出一分子氨。雙縮脲在堿性環境中能與Cu2+結合生成紫紅色化合物，此反應稱為雙縮脲反應。蛋白質分子中有肽鍵，其結構與雙縮脲相似，也能發生此反應。可用于蛋白質的定性或定量測定。因此，一切蛋白質或二肽以上的多肽都有雙縮脲反應，但有雙縮脲反應的物質不一定都是蛋白質或多肽。三、材料、儀器與試劑尿素；10%氫氧化鈉溶液；1%硫酸銅溶液；2%卵清蛋白溶液四、實驗操作取少量尿素結晶，放在干燥試管中。用微火加熱使尿素熔化。熔化的尿素開始硬化時，停止加熱，尿

14、素放出氨，形成雙縮脲。冷后，加10%氫氧化鈉溶液約1ml，振蕩混勻，再加1%硫酸銅溶液1滴，再振蕩。觀察出現的粉紅顏色。要避免添加過量硫酸銅，否則，生成的藍色氫氧化銅能掩蓋粉紅色。向另一試管加卵清蛋白溶液約1ml和10%氫氧化鈉溶液約2ml，搖勻，再加1%硫酸銅溶液2滴，隨加隨搖。觀察紫玫瑰色的出現。五、實驗總結 現象解釋現象尿素結晶  卵清蛋白溶液  實驗三 血清蛋白醋酸纖維薄膜電泳一實驗目的學習電泳技術的原理和醋酸纖維薄膜電泳的操作方法。二. 實驗原理 帶電顆粒在電場作用下，向著與其電性相反的電極移動，稱為電泳。各種蛋白質都有它特有的等電點

15、，血清中的各種蛋白質亦不例外。某種蛋白質在其等電點時，它呈中性狀態，該分子既不帶正電荷，也不帶負電荷，它在電場中既不向陰極移動，也不向陽極移動。但是在pH比其等電點較高的緩沖液中時，例如:在pH8.6的緩沖液中，由于血清中一些蛋白質的等電點均低于 pH7.0，它們都游離成負離子。在電場中，均會向陽極移動，等電點離 pH8.6愈遠者，移動速度越快。各種血清蛋白質因等電點不同，其電離程度或帶電數量也就不同，所以，在電場中泳動速度就有差異。蛋白質分子量小而帶電多者，移動速度較快; 分子量大而帶電少者，移動較慢。如此，則血清中所含的各種蛋白質在電場中按其移動快慢可分為清蛋白、1、2、-球蛋白等五條區帶

16、。 在電泳過程中，帶電顆粒的移動速度除與帶電數量和分子量有關外，還受電場強度、溶液的離子強度、介質的粘度等因素影響。 醋酸纖維（二乙酸纖維素）薄膜具有均一的泡膜狀結構（厚約120m），滲透性強，對分子移動無阻力，用它作區帶電泳的支持物，具有用樣量少，分離清晰，無吸附作用，應用范圍廣和快速簡便等優點。目前已廣泛用于血清蛋白、脂蛋白、血紅蛋白、糖蛋白、酶的分離和免疫電泳等方面。三、實驗材料、主要儀器和試劑1、材料：血清2、儀器：電泳儀、醋酸纖維素薄膜（2 cm ×8 cm）、點樣板、鉛筆、尺。3、試劑： （1）巴比妥緩沖液（PH=8.6，離子強度0.075）：取巴比妥鈉 15.458克，

17、巴比妥2.768克溶于少量蒸餾水，稀釋至1000毫升。 （2）染色液：氨基黑 10B 0.5g、加入甲醇 50ml 、冰醋酸 10ml、蒸餾水 40ml ，混勻。 （3）漂洗液：取乙醇45毫升，冰醋酸5毫升，蒸餾水50毫升混勻。 （4）洗脫液（0.4N 氫氧化鈉）：取氫氧化鈉16.0克，蒸餾水加至1000毫升。（5）透明液：95%乙醇（AR） 20ml ，冰醋酸（AR） 5ml ，混勻。四. 實驗方法及步驟 1. 點樣：取醋酸纖維薄膜一條（2.5×8cm），在薄膜的無光澤面距一端1.5cm處，預先用鉛筆劃一條線作為點樣線， 然后光澤面向下放入緩沖液中浸泡10分鐘，待薄膜完全浸透后，取

18、出輕輕夾于濾紙中，吸去多余的緩沖溶液，用點樣器的邊緣沾上血清后，在點樣線上迅速地壓一下， 使血清通過點樣器印吸在薄膜上， 點樣力求均勻。待血清滲入薄膜后，以無光澤面向下，加血清的一端朝向電泳槽的陰極，兩端緊貼在濾紙（四層）橋上，加蓋，平衡 23分鐘，然后通電。 2. 通電：電壓 120伏，通電45分鐘。 3. 染色：通電完畢，關閉電源將薄膜取出，直接浸于染色液中 5分鐘。 4. 漂洗：將染色后的薄膜取出，依次在第一、第二、第三漂洗液中漂洗，最后用蒸餾水漂洗一遍，使背景完全無色。 5. 脫色：將漂洗干凈的薄膜用濾紙吸干，剪下各蛋白區帶及一小段未著色的空白區作為空白管，分別置于各試管中，向各管中加

19、 0.4N NaOH 4ml，反復振搖使色澤充分浸出。 6. 測定光密度：選用波長為 620nm 的單色光，以空白管調零，測定各管光密度。五、 計算 血清蛋白正常值: 名 稱清蛋白1-球蛋白2-球蛋白-球蛋白-球蛋白正常值（%）577225496.5121220實驗四 淀粉酶的專一性和溫度、pH、激活劑及抑制劑對酶活性的影響一 實驗目的 1.通過本實驗觀察、驗證酶的專一性和溫度、pH、激動劑及抑制劑對酶活性的影響。2.熟悉淀粉及其酶解產物的特殊顯色方法；電熱恒溫水浴的使用。 3.了解唾液淀粉酶的收集與預處理。二 實驗原理酶具有高度專一性，一種酶只能催化一種或一類底物發生反應，如淀粉酶只能水解淀

20、粉，不能水解蔗糖。當淀粉被淀粉酶徹底水解為還原性麥芽糖和葡萄糖時，能使班氏試劑的Cu2+還原成Cu1+，生成磚紅色Cu2O沉淀。淀粉酶的活性受溫度、pH、激活劑及抑制劑、酶濃度以及作用時間等多種因素影響，因而水解淀粉生成一系列分子大小不同的糊精。不同程度的水解糊精可與碘反應生成紫色、棕色或紅色絡合物。通過上述特征性反應，并以蔗糖等作對照，便可觀察、驗證淀粉酶是否具有專一性以及它的催化活性是否受到影響。三 實驗主要儀器及試劑1、儀器：滴管、燒杯、試管（架）及試管夾、恒溫水浴箱與水浴鍋、脫脂棉、漏斗及紗布、白瓷反應盤2、試劑：1淀粉 稱取淀粉1g，加少量水調成糊狀，加入煮沸的0.3NaCl溶液至1

21、00m1。1蔗糖溶液.班氏試劑 A液：取檸檬酸鈉173，無水碳酸鈉100，加水600ml，加熱溶解，冷卻后稀釋至850ml；B液：取結晶硫酸銅（CuSO45H2O）17.3溶于100ml預熱的蒸餾水中，冷卻后加水至150ml。將A液緩慢倒入B液中混勻置試劑瓶備用。碘液：稱取碘4g、碘化鉀6g溶于l000ml蒸餾水中，置棕色瓶內貯存備用。各種pH緩沖液pH6.8緩沖液：取0.2mol/LNa2HPO4溶液772ml，0.1mol/L檸檬酸溶液228ml混合即成。 pH4.0緩沖液：取0.2mol/LNa2HPO4溶液385.5ml，0.1mol/L檸檬酸溶液614.5ml混合即成。 pH8.0緩

22、沖液：取0.2mol/LNa2HPO4溶液972ml，0.1mol/L檸檬酸溶液28ml混合即成。 NaCl 溶液.1CuSO4 溶液1Na2SO4溶液四 實驗方法及步驟一、唾液淀粉酶的收集與處理1.制備唾液實驗者先將痰咳盡，用自來水漱口，以清除口腔內食物殘渣，再在口腔內含蒸餾水約15ml，并作咀嚼咕漱運動，3分鐘后吐入墊有兩層經潤濕處理的脫脂紗布的漏斗內，過濾于小燒杯中備用，為與下面稀釋唾液相區別，此稱制備唾液。2.煮沸唾液取上述唾液約2ml，盛入1中號試管中,置沸水浴煮沸5分鐘備用。3.稀釋唾液調整唾液淀粉酶活性，使之在pH6.8、37和既無激動劑又無抑制劑條件下，作用5min，水解淀粉至

23、紅色糊精為宜。具體做法是取12凹白瓷反應板一塊，按下列步驟操作：第1排每凹各加1滴制備唾液，12、13、14凹分別加生理鹽水1、2、3滴，用滴管采用抽吸法，由稀到濃（1412）小心混勻各凹，勿使濺入相鄰凹中。每混勻一凹便取其1滴放入同列的2排凹中，剩余稀釋唾液應全部放回原凹中。在盛有不同稀釋度唾液的第2排各凹中，均加入4滴緩沖液（pH6.8），2滴1%的淀粉液和2滴蒸餾水，用混勻法充分混勻，置37下5min。在第2排各凹中加I液一滴，混勻，觀察比較各凹顏色，以淺棕-紅色對應的稀釋倍數，用生理鹽水稀釋3ml制備唾液備用。二、唾液淀粉酶的專一性以及溫度、pH、激活劑和抑制劑對唾液淀粉酶活性影響的觀

24、察（一）取試管3支編號，按下表1操作表1  唾液淀粉酶專一性的實驗觀察    試劑   試管pH6.8緩沖液1淀粉溶液1蔗糖溶液制備唾液煮沸唾液120滴10滴5滴220滴10滴5滴320滴10滴5滴將上述各管混勻后，置37水浴中保溫10分鐘，然后每管加入班氏試劑20滴，再放入沸水浴中煮沸約15分鐘，觀察各管顏色反應，并說明原因。（二）溫度影響酶促反應的實驗觀察1.取試管3支編號，按下表2操作：表2  溫度影響酶促反應的實驗觀察管號試劑1231.pH6.8緩沖液20滴20滴20滴2.1淀粉溶液10滴10滴10滴3.預熱5min

25、 37水浴沸水浴冰浴4.直接加入稀釋唾液，立即混勻、計時5滴5滴5滴5.保溫10min37水浴沸水浴冰浴2.將一、二管移入冰水浴中，待各管溫度一致后速向各管加入碘液1滴，混勻后觀察各管顏色的區別，并說明溫度對酶促反應的影響。四、pH影響酶促反應的實驗觀察1. 取試管3支編號，按下表3操作：表3  pH影響酶促反應的實驗觀察 pH4.0緩沖液pH6.8緩沖液pH8.0緩沖液1淀粉溶液稀釋唾液試管120滴10滴5滴試管220滴10滴5滴試管320滴10滴5滴2.將上述各管混勻后，置37水浴中保溫10分鐘，然后每管加入碘液1滴，混勻后觀察各管顏色的區別，并說明pH對酶促反應的影響

26、。五、激動劑和抑制劑影響酶活性的實驗觀察1. 取試管4支編號，按下操作：表4  激動劑和抑制劑影響酶活性的實驗觀察 pH 6.8緩沖液1淀粉溶液蒸餾水0.9NaCl1CuSO41Na2SO4稀釋唾液120滴10滴10滴5滴220滴10滴10滴5滴320滴10滴10滴5滴420滴10滴10滴5滴2. 將上述各管放入37水浴中保溫10分鐘，然后每管加入碘液1滴，混勻后觀各管顏色的區別，并說明激動劑和抑制劑對酶促反應的影響。注意事項：1.反應試管應清洗干凈，不同酶液、試劑及其滴管不能交叉混用；2.使用混合唾液，或通過預試選出合適的唾液稀釋度，效果更為顯著。實驗五 血中葡萄糖含量的

27、測定（鄰甲苯胺法）一.實驗目的掌握血糖的測定方法。二.實驗原理 葡萄糖在熱的醋酸溶液中，與鄰甲苯胺縮合成雪夫氏堿(Schiff base)。 雪夫氏堿呈蘭綠色，其最高吸收峰為620nm波長，顏色深淺與葡萄糖量成正比，和標準液比較求得其量。反應式如下: 三、實驗材料、主要儀器和試劑1、材料：血漿2、儀器：沸水浴、冰浴、分光光度計等。3、試劑：（1）鄰甲苯胺試劑：取冰醋酸 920毫升，硫脲1.5克，溶解后加入鄰甲苯胺80毫升，混勻，再加入飽和硼酸溶液（硼酸6克加水100毫升，放置過夜后過濾備用）42毫升，充分混勻。置于棕色瓶內密閉保存，至少可用兩個月。 （2）葡萄糖標準貯存液(10mg/ml)：準

28、確稱取干燥無水葡萄糖1克，加0.25%苯甲酸液至100毫升，置冰箱內保存備用。 （3）葡萄糖標準應用液(1mg/ml)：準確吸取上述貯存液10ml，加0.25%苯甲酸至100毫升。 （4） 0.25%苯甲酸液：稱取苯甲酸2.5克，加入煮沸的蒸餾水1000毫升中，使成飽和液，冷卻后，取上清液備用。 （5）蒸餾水。四. 實驗方法及步驟 取試管三支，標號，依下表加入試劑，混勻，置沸水中 15 分鐘，立即移入冷水浴中 3-5分鐘，選用620nm 的單色光，以空白管調零，讀取各管光密度。 五. 計算 葡萄糖mg/dl×0.1××100 正常值: 70100毫克/100毫升（

29、血漿或血清）。六.附注 1. 本法不需要除去蛋白質，鄰甲苯胺試劑只與醛糖顯色，血液中其他還原性物質基本上無影響。 2. 鄰甲苯胺試劑與葡萄糖顯色的深淺及其穩定性與試劑中鄰甲苯胺濃度、冰醋酸濃度、加熱時間有關。此法顯色穩定，24小時內無變化。如將加熱時間縮短，生成顏色容易消褪。 3. 此法也適用于全血葡萄糖測定，特別是小兒病人作靜脈抽血困難時，可采用指端血或耳垂血 0.1毫升，加入 3% 三氯醋酸溶液1.9 毫升中，以沉淀蛋白質。離心后吸取上清液 1.0毫升，加入鄰甲苯胺試劑 5毫升作為測定管。在標準管中加入葡萄糖標準應用液（0.05mg/ml）1.0毫升及鄰甲苯胺試劑 5毫升，在空白管中加入蒸餾水 1.0毫升及鄰甲苯胺試劑 5毫升，然后按上表進行測定。測定結果即為全血葡萄糖含量。 4. 輕度溶血的血清對結果無明顯影響。根據推導，血清中含血紅蛋白 450毫克/100毫升時，可使測定結果降低約10%。 5. 高脂血的標本最后顯色有時會出現渾濁，影響測定結果。可先制備血濾液后再行測定。 實驗六 血清谷丙轉氨酶的測定一. 實驗目的掌握血清谷丙轉氨酶的測定方法。二. 實驗原理 血清谷丙轉氨酶（S、G、P、T）作用于丙氨酸及-酮戊二