1、實驗一 顯微鏡的使用及觀察動物組織李國衛 131140075一、實驗目的 1.生物量級和胚層的發育。 2.細胞及基本生物組織結構。 3.掌握顯微鏡的結構功能、成像原理及使用操作。 4.了解平像場物鏡、色差、暗視野明視野、干涉、螢光等對成像的影響與作用。二、實驗原理 1、光學顯微鏡主要由調焦部分、載物臺、聚光器、目鏡和物鏡組成。物鏡將標本成倒立放大的實像，實像經目鏡再次放大后成放大的虛像被人眼所觀察。顯微鏡的總放大倍數等于物鏡和目鏡放大倍數的乘積。 2、生物界類群：1)、原核生物界：真細菌類群；古細菌：甲烷菌、嗜鹽菌、嗜熱酸菌。2）、原生生物界：原生動物；藻類；黏菌。3）、真菌界：接合菌；子囊菌

2、；擔子菌；半知菌。4）、植物界：苔蘚類植物；維管植物：無種子（石松、木賊、真蕨類）；有種子：裸子植物、被子植物（單子葉植物、雙子葉植物）。5）、動物界：側生動物（海綿）；輻射對稱動物（刺胞動物門，水母、水螅；櫛水母動物門，海胡桃）。兩側動物無體腔動物（渦蟲）；假體腔動物（線蟲）；真體腔動物：原口動物（環節動物、軟體動物、節肢動物）；后口動物（棘皮動物、半索動物、脊索動物）。6）、脊索動物：魚類；兩棲類；爬行類；鳥類；哺乳類。 3、分辨力（resolution）人眼距目標物25厘米處，或者顯微鏡，能夠分辨最小間隔之能力，單位是距離。RK/nSin/2，說明：K是透鏡品質，光學透鏡與電磁透鏡的品質

3、，光學一般在0.611.0之間；光鏡/電鏡之光波波長/電子波長；n光鏡之介質折射率；鏡口角，樣本對物鏡之鏡口張角，一般小于180度，Sin/2小于1。N.A.鏡口率（numeric aperture），nSin/2，分辨力之影響因子。 4、胚胎發育的胚胎期胚層發育方向： 受精卵桑椹胚胚泡三個胚層 外胚層發育出神經系統（包括腦、脊髓、脊神經、自主神經、視網膜、內耳及腎上腺髓質），表皮（包括毛發、汗腺、油脂腺、乳腺、晶體及口腔黏膜）。 中胚層發育出肌肉、骨骼、血液、真皮、心臟血管系統、泌尿生殖系統和結締組織等。 內胚層發育出消化系統和呼吸系統的上皮和有關的腺體（如胰、肝）以及膀胱上皮等。三、材料與

4、器材 1.實驗材料：13張組織標本玻片 2.實驗設備：光學顯微鏡四、方法與步驟 1.實驗分組 2.實驗報告格式要求 3.光學顯微鏡原理、結構、操作講解。 4.光學顯微鏡的操作與觀察 1）安放顯微鏡，插上電源，打開開關。 2）檢查儀器。 3）放上玻片，調節光量。 4）用低倍鏡尋找實物視野 5）換用高倍鏡，對焦觀察。 五、實驗觀察結果六、實驗結論 氣管上皮由數量眾多的的柱狀上皮細胞。表面覆蓋纖毛， 纖毛能夠向咽喉作規律性擺動，使粘膜表面的粘液、粉塵等推向喉部聚集成痰，最終以吐痰的方式排出體外，使人體吸入的空氣得到凈化。人體在遭受細菌、病毒侵害或吸入有害氣體時，纖毛變性、膨脹或消失，以致痰廢液不能及

5、時排出，導致氣道堵塞，出現呼吸困難等癥狀。 上皮還有杯狀細胞，數量較多，嵌于纖毛柱狀細胞之間。肥大細胞圓或卵圓形，其細胞核常呈三角形，常成群聚集在小血管旁，胞質內充滿粗大的嗜堿性顆粒，顆粒中含有黏蛋白（一種糖蛋白，PSA反應陽性），故稱黏原顆粒，醛復紅染色呈紫色。杯狀細胞中的黏原顆粒，分泌后于黏膜表面形成一層粘液性屏障，可吸附空氣中的粉塵異物，溶解CO、SO2等有害氣體。 基細胞體積較小，呈錐形或三棱形，沿基膜排列，不與腔面直接相連。有較大的細胞核且核仁明顯。基細胞分化程度較低，可分化為纖毛柱狀細胞和杯狀細胞等。在一定條件下，可以使黏膜上皮轉為復層扁平上皮。 透明軟骨成“C”形骨環，與纖維性結

6、締組織構成。軟骨環為支架結構，可保持氣管暢通。軟骨之間以環狀韌帶相連接。在軟骨環缺口處含有富含彈性纖維組織相連，內含平滑肌束，可調節氣管的管徑。七、問題解答 1、相差、微分干涉、暗視野、螢光顯微鏡術的基本原理？ 相差顯微鏡有環形光闌的聚光器、帶有相板的相差物鏡。當光線經過相差聚光器、樣品、相差物鏡，將光束分為兩部分，一部分是樣品結構的折射光，另一部分為不受樣品影響的光，經過相板，二者干涉，形成干涉圖像。由于兩束光的相位接近/2，相差顯微鏡使相位變化轉為振幅變化，形成反差分明的圖像。 微分干涉顯微鏡術是用平面偏振光經棱鏡折射后分成兩束，于不同時間經過樣品的相鄰部位，此后又經另一棱鏡將此兩束光匯合，使樣品厚度的微小區別形成明暗差異，增強樣品反差并具立體感。 暗視野顯微鏡與普通光鏡主要不同點是聚光器不同。照明的光線不直接進入物鏡，因此視野是黑暗的。通過樣品本身的光反射和折射的光進入物鏡形成亮的象。在黑暗背景中觀察到發亮的細胞結構。 熒光顯微鏡可觀察細胞中的熒光。當用激發光照射時，細胞發射熒光。這種熒光被稱為原發熒光，由細胞中固有的熒光物質比如還原輔酶I(NADH) 發出的。另一種是用熒光染料對細胞中的成分進行特異染色，再經激發光照射。照射后經化學反應使組織中的非熒光物質轉變為熒光物質所發的熒光成為誘發熒光。其他的還有免疫熒光等。 2、杯狀細胞名稱由來。 分泌的粘液