1、實用標準文案產品注冊進度安排一、擬注冊產品名稱根據產品的市場量及同行相應產品的注冊情況以及成本量擬定前三批注冊 產品名稱： 第一批項目：1 .人乳頭瘤病毒（HPV 23型（18種高危型5種低危型）2 .沙眼衣原體（CT）第二批項目：1 .解月尿月尿原體（UU2 .淋球菌（NG3 .結核分枝桿菌 第三批項目： 1.手足口病（三重） 2.流感病毒（兩重）4 .乙肝病毒（定量）二、研發內容（根據注冊要求）1 .核酸提取核酸提取可配套注冊或不注冊，但需合理選擇RN初離/純化試劑，并提供詳細的驗證資料。2 .最低檢測限2.1 最低檢測限的確定建議使用培養后病毒原液的梯度稀釋液進行最低檢測限確定，每個梯度

2、的病毒稀釋液重復35份，每份進彳T不少于20次的重復檢測，將具有 90%- 95%W生檢出率的病毒水平作為最低檢測限。通過另制備至少5份最低檢測限濃度水平的病毒稀釋液對90%- 95%勺檢出率進行確認。建議采用半數組織培養感染量（50% tissue cultureinfectious dose, TCID50）、空斑形成單位（plaque forming units , PFU 法或 copies/ml 的方式進行病毒濃度確認，并采用上述方式作為病毒濃度的表示方式。在進行最低檢測限的確認時，參與研究的病毒應至少包括不同來源的兩個具有代表性的病毒株的系列稀 釋梯度。2.2 最低檢測限的驗證申報

3、試劑應在最低檢測限或接近最低檢測限的病毒濃度對每種常見待測流感病毒亞型具有時間和區域特征性的至少3個病毒株進行驗證。3 .分析特異性3.1 交叉反應用于病毒核酸檢測試劑交叉反應驗證的病原體種類主要考慮以下幾方面可能性：核酸序列具有同源性、 易引起相同或相似的臨床癥狀、采樣部位正常寄生或易并發的其他微生物。建議在病毒和細菌感染的醫學相關水平進行交叉反應的驗證。通常，細菌感染的水平為106 cfu/ml 或更高，病毒為 105 pfu/ml或更高。首先，應在病毒不同型別和亞型間進行交叉反應驗證；其次，采用其他的病原微生物進行驗證。申請人應提供所有用于交叉反應驗證的病毒和細菌的來源、種屬/型別和濃度

4、確認等試驗資料。3.2 干擾物質潛在的干擾物質主要包括：與樣本有相關性的物質，如流感病毒的常見干擾物質：血液、鼻分泌物或粘液、用于緩解鼻塞和咽部充血、鼻腔干燥、刺激、哮喘和過敏癥狀 的藥物。使用醫學相關水平的干擾物濃度進行驗證，另外，建議申請人在每種干擾物質的潛在最大濃度(“最差條件”)條件下進行評價。申請人應采用每種病毒亞型的至少兩種病毒株對樣本中物質的潛在抑制影響進行評估，建議在每種流感病毒的檢測臨界值水平對每種干擾物質的干擾影響進行檢測。4 .精密度(1)對可能影響檢測精密度的主要變量進行驗證，除申報試劑(包括提取組分和RT-PCR1分)本身的影響外，還應對PCR分析儀、操作者、地點等要

5、素進行相關的驗證。(2)合理的精密度評價周期，例如：為期至少 20天的連續檢測，每天至少由2人完成不少于2次的完整檢測，從而對批內/批間、日內/日間以及不同操作者之間的精 密度進行綜合評價。如有條件，申請人應選擇不同的實驗室進行重復實驗以對室間精密 度進行評價。(3)用于精密度評價的質控品應至少包括3個水平：陰性質控品：待測物濃度低于最低檢測限或為零濃度，陰性檢出率應為100%(n>20)。臨界陽性質控品：待測物濃度略高于試劑盒的最低檢測限，陽性檢出率應高于95%(n>20)。陽性質控品：待測物濃度呈中度到強陽性，陽性檢出率為100%& CVC 10%n>20) o5

6、 .陽性/陰性參考品如申報產品有相應的國家參考品，則企業內部陽性/陰性參考品應參考國家參考品的項目設置。在不低于國家參考品要求的前提下，申請人可以結合實際情況設置合理的企業內部陽性/陰性參考品。對于沒有國家參考品的產品，申請人應根據產品性能驗證 的實際情況自行設定企業內部參考品，陽性參考品應著重考慮病毒型別、亞型及滴度要求，陰性參考品則主要涉及對分析特異性(交叉反應)的驗證情況。申請人應對內部陽性/陰性參考品的來源、型別鑒定、病毒滴度等信息進行精確的 實驗驗證，并提交詳細的驗證資料。6 .適用機型對于適用多個機型的產品，應提供如產品說明書 【適用機型】項中所列的所有型號儀器的性能評估資料。7

7、.參考值(參考范圍)確定參考值確定資料主要是指 Ct值的確認資料，建議申請人采用受試者工作特征 (ROC 曲線的方式對申報產品用于結果判斷的臨界值予以確認。8 .穩定性研究(1)穩定性研究資料主要涉及兩部分內容，申報試劑的穩定性和適用樣本的穩定性研究。前者主要包括實時穩定性(有效期)、運輸穩定性、開瓶穩定性及凍融次數限制等研究，申請人可根據實際需要選擇合理的穩定性研究方案。穩定性研究資料應包括研究方法的確定依據、具體的實施方案、詳細的研究數據以及結論。 對于實時穩定性研究， 應提供至少三批樣品在實際儲存條件下保存至成品有效期后的研究資料。(2)考慮到病毒RNA>易被降解的特性， 企業也應

8、對樣本穩定性進行研究，主要包括冷藏和冷凍兩種條件下的有效期驗證，可以在合理的溫度范圍內選擇35個溫度點(應至少包括范圍的上限和下限溫度)，每間隔一定的時間段即對儲存樣本進行全性能的分析驗證，從而確認不同類型樣本的效期穩定性。在對樣本進行效期穩定性的評價時，精彩文檔同時應對推薦使用的采樣拭子、樣本保存液及保存容器進行合理驗證。適于冷凍保存的樣本還應對凍融次數進行評價。（3）加速破壞試驗研究資料9.臨床試驗研究9.1 研究方法對于已有同類產品上市的試劑的臨床研究，選擇境內已批準上市、 臨床普遍認為質量較好的同類產品作為參比試劑，采用擬申報產品（以下稱考核試劑） 與之進行對比試驗研究，證明本品與已上

9、市產品等效或優于已上市產品。另外，申請人還應選擇一定數量的新鮮采集樣本進行考核試劑與流感病毒檢測的“金標準”方法一病毒分離培養鑒 定方法的比較研究，每種樣本類型不少于 30例經病毒分離培養方法確定為陽性的樣本。對于無法選擇參比試劑的新型流感病毒核酸檢測試劑，其臨床研究應選擇病毒分離培養鑒定和/或病毒核酸序列測定方法作為參比方法，總例數不少于500例。用于核酸序列測定的引物序列應不同于考核試劑中用于檢測目的基因的引物序列。9.2 臨床研究單位的選擇考慮到病毒不同病毒株的區域性特征較強，故建議申請人在國內不同區域選擇臨床單位，盡量使各單位的臨床樣本有一定的區域代表性；臨床研究單位應具有呼吸道疾患診

10、療和分子生物學方法檢測的優勢，實驗操作人員應有足夠的時間熟悉檢測系統的各環節（儀器、試劑、質控及操作程序等），熟悉評價方案。在整個實驗中，考核試劑和參比方法都應處于有效的質量控制下，最大限度保證試驗數據的準確性及可重復性。9.3 臨床試驗方案臨床試驗實施前，研究人員應從流行病學、統計學、臨床醫學、檢驗醫學等多方面考慮，設計科學合理的臨床研究方案。各臨床研究機構的方案設置應基本一致，且保證在整個臨床試驗過程中遵循預定的方案實施，不可隨意改動。整個試驗過程應在臨床研究機構的實驗室內并由本實驗室的技術人員操作完成，申報單位的技術人員除進行必要的技術指導外，不得隨意干涉實驗進程，尤其是數據收集過程。試

11、驗方案中應確定嚴格的病例納入/排除標準，任何已經入選的病例再被排除出臨床研究都應記錄在案并明確說明原因。在試驗操作過程中和判定試驗結果時應采用盲法以保證試驗結果的客觀性。 各研究單位選用的參比試劑及所用機型應完全一致，以便進行合理的統計學分析。另外，考核試劑的樣本類型不應超越參比試劑對樣本類型的檢測 要求，如果選擇了參比試劑適用樣本類型以外的樣本，則應選擇病毒分離培養鑒定或其他合理方法對額外的樣本類型進行驗證。9.4 病例選擇及樣本類型臨床試驗應選擇具有癥狀 /體征或相似癥狀的人群作為研究對象。申請人在建立病例納入標準時，應考慮到各年齡段人群的差異， 盡量覆蓋各個年齡段人群。 在進行結果統計分

12、析時，除總體病例數的要求外，建議對各年齡段人群分層進行數據統計分析。9.5 統計學分析對臨床試驗結果的統計應選擇合適的統計方法，如檢測結果一致性分析、受試者工作特征（ROC曲線分析、陰性/陽性符合率等。對于本類產品對比實驗的等效性研究，常選擇交叉四格表的形式總結兩種試劑的定性檢測結果，對定性結果進行四格表卡方或kappa檢驗以驗證兩種試劑定性結果的一致性，統計分析應可以證明兩種方法的檢測結果無明顯統計學差異。 在臨床研究方案中應明確統計檢驗假設，即評價考核試劑與參比試劑是否等效的標準。9.6 結果差異樣本的驗證在數據收集過程中，對于兩種試劑檢測結果不一致的樣本， 應采用“金標準”方法或臨床上普

13、遍認為質量較好的第三種同類試劑進行復核，同時結合患者的臨床病情對差異原因及可能結果進行分析。、預算與計劃時間每個產品研發注冊的平均費用與時間概算表階段名稱明細預算（萬元）時間（月）研發階段研發階段前期設計、制備、試用及優化改進11內部驗證（先生產1批進行性能研究）討論內部驗證方案1.5 （僅包括試劑和塑料耗材）3QS 及企業標準品的標定確定陽性對照的濃度最低檢出限特異性準確度線性范圍批內精密度原材料質控標準臨床樣本測定，確定參考值完成說明書內部驗證文檔整理及完成說明書、標準草案、 生產工藝及反應體系研究資料、參考值正式分析性能評估靈敏度4.512開瓶穩定性反復凍融穩定性特異性干擾物質交叉污染準確度線性范圍批內、批間精密度模擬運輸穩定性文件整理、完成分析性能評估資料1年穩定性測試、完成穩定性研究報告檢驗階段注冊檢驗根據企業標準檢驗2.52臨床研究根據臨