1、紫外-可見吸收光譜鑒別技術紫外-可見分光光度法也稱為紫外-可見吸收光譜法（UV-vis ）,它是依據物 質對紫外和可見光區不同波長光的吸收程度進行定性、定量的分析方法。1 物質對光的選擇性吸收光是一種電磁波，按波長順序可以劃分為不同的光區。 不同波長的光具有不 同的能量，波長越長，能量越低；波長越短，能量越高。圖2光通過溶液示意圖I 0-為入射光強度I t-為透射光強度綠當一束白光通過棱鏡后色散為紅、 橙、黃、綠、青、藍、紫等各種顏色的光， 每種顏色的光又有一定的波長范圍。 如果把兩種光按一定強度比例混合， 也可成 為白光，這兩種顏色的光稱為互補色光。 圖1是互補色光示意圖，處于直線關系 的兩

2、種顏色即為互補色光。溶液所以呈現不同的顏色是由于該溶液對光具有選擇性吸收。當一束白光通過某一有色溶液時,部分光被溶液選擇吸收，另一部分光則通過溶液。 例如當白光入射通過KMnO溶液時，溶液 選擇性吸收綠光，溶液本身呈現綠光的互補色光，即紫紅色2 .光吸收的基本定律一一朗伯-比爾定律當一束平行單色光垂直照射到一定濃度 c、液層厚度為b的均勻透明溶液時（如圖2），由于溶液吸收了一部分光能，光的強度減弱。透射光強度 It與入射 光強度Io之比稱為透射比，用T表示；單色光通過溶液時被吸收的程度， 稱為吸 光度，用A表示。朗伯和比爾總結了光的吸收與液層厚度、 溶液濃度的定量關系。其數學表達式為：A= k

3、 b c。其物理意義是：當一束平行單色光垂直通過均勻、 透明的吸光物質的稀溶液 時，溶液的吸光度A與溶液濃度c和液層厚度b的乘積呈正比。朗伯-比爾定律是紫外-可見分光光度法進行定量分析的理論依據， 適用于可 見光、紫外光、紅外光和均勻非散射的液體、氣體及透光固體。比例常數k稱為吸光系數，是吸光物質的特征常數，與入射光的波長、物質 的性質和溶液的溫度等因素有關，與溶液的濃度大小和液層厚度無關。它表示物 質對某一特定波長光的吸收能力，其數值及單位與b、c所取單位有關。當入射光波長一定時，溶液濃度c為1 g/100mL （或1%、液層厚度b為1 cm 時的吸光度稱為百分吸光系數。藥典中所收載的吸光系

4、數均為百分吸光系數。吸光系數越大，表明該物質對某波長光的吸光能力越強， 測定的靈敏度也越 高，微量的物質也能準確測出。如果溶液中同時存在兩種或兩種以上吸光物質時，只要共存物質不互相影響吸光性質，則總吸光度是各共存物吸光度的和，即 A總=Aa + Ab + Ac +，而 各組分的吸光度由各自的濃度與吸光系數所決定。3吸收曲線圖3不同濃度KMnO溶液的吸收曲線將不同波長的光照射某一濃度和 液層厚度固定的溶液，并測量不同波 長下溶液的吸光度，以吸光度 A為縱 坐標，相應波長入為橫坐標繪制的曲 線，稱為吸收曲線或吸收光譜。圖 3 為KMnC溶液的吸收曲線。由圖3可見，KMn4溶液對不同波 長的光具有選

5、擇性吸收，在波長 525 nm處吸收最強，相應波長稱為最大吸收波長，用-ax表示；同一波長處不同濃度的KMn4溶液的吸光度A不同，但吸收 曲線的形狀相同，Fax也不變，表明物質的吸收曲線是一種特征曲線。因此，吸 收曲線是吸光光度法中選擇測定波長的重要依據，也是進行定性分析的依據。4.紫外-可見分光光度計紫外-可見分光光度法所用儀器是紫外-可見分光光度計，主要由光源、單色器、吸收池、檢測器和信號顯示器五部分組成，其流程如圖4所示。光源>單色器»吸收池檢測器信號顯示器圖4紫外-可見分光光度計流程示意圖(1) 光源 理想的光源應有足夠的輻射強度及良好的穩定性；光源的使用壽命長，操作方

6、便。可見光區常用的光源是鎢燈或碘鎢燈， 可使用的波長范圍為 3402500nm紫外區常用的光源是氫燈或氘燈，可使用的波長范圍為200375nn。(2) 單色器 單色器是將來自光源的復合光按波長的長短順序分散為單色 光并能隨意調節所需波長光的一種裝置，是紫外 -可見分光光度計的核心部件。(3) 吸收池 又稱比色皿，用于盛放被測溶液的無色、透明、耐腐蝕的裝置。吸收池一般有玻璃和石英兩種材料， 光學玻璃吸收池只能用于可見光區， 石 英吸收池既可用可見光區也可用于紫外光區。吸收池要挑選配對，使它們的性能 基本一致。最常用的是1cm的吸收池。(4) 檢測器 檢測器能將檢測到的光強度信號轉變為電信號，是一種光電 轉換元件。常用的檢測器有硒光電池、 光電管、光電倍增管和光電二極管陣列檢 測器。(5) 信號顯