AbMole|羥基酪醇通過PI3K/Akt-Nrf2信號通路和自噬協同保護腸道免受氧化損傷近年來，腸道氧化應激被廣泛認為是多種腸道疾病，如炎癥性腸病（IBD）和結直腸癌（CRC）的主要致病因素。羥基酪醇（Hydroxytyrosol,HT），一種在橄欖油中含量豐富的多酚類化合物，因其強大的抗氧化活性而備受關注。來自中國農業科學院動物科學研究所動物營養與飼養國家重點實驗室的XiaobinWen,ShanlongTang,FanWan等多名研究人員發表了題為《ThePI3K/Akt-Nrf2SignalingPathwayandMitophagySynergisticallyMediateHydroxytyrosoltoAlleviateIntestinalOxidativeDamage》的研究成果。在該文章中，研究人員使用了Hoechst33258（AbMole，M5110）。研究通過一系列精心設計的實驗，深入探討了HT對腸道氧化損傷的保護作用及其潛在的分子機制。研究團隊首先通過腹腔注射二吡啶基（Diquat,DQ）構建了豬腸道氧化應激模型。實驗對象被隨機分為四組：對照組（CON）、DQ組、HT組（基礎飼料中添加500mg/kgHT）和HT+DQ組。在28天的實驗周期后，收集結腸組織、粘膜及內容物樣本進行分析。此外，研究還采用了IPEC-J2豬腸上皮細胞系進行體外實驗，以進一步驗證HT的作用機制。在豬模型中，與DQ組相比，HT處理顯著提高了血清和結腸粘膜中的總抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）和過氧化氫酶（CAT）水平，同時降低了丙二醛（MDA）和過氧化氫（H2O2）水平。這些變化表明，HT顯著增強了機體的抗氧化防御系統，有效對抗了DQ誘導的氧化應激。圖1羥基酪醇（HT）提高了仔豬模型的抗氧化能力并減輕了腸道氧化損傷。通過H&E染色和透射電鏡（TEM）觀察，研究發現DQ處理導致結腸粘膜和上皮顯著損傷，而HT處理則有效減輕了這些損傷，保持了腸道結構的完整性。此外，HT處理還顯著降低了血清中的D-乳酸和二胺氧化酶（DAO）水平，這兩種指標常用于評估腸道通透性。進一步的Westernblotting分析顯示，HT處理增加了緊密連接蛋白（ZO-1、Occludin和Claudin-1）的表達，這些蛋白對于維持腸道屏障功能至關重要。在探索HT的作用機制時，研究團隊發現HT處理顯著增加了豬和IPEC-J2細胞中磷酸化PI3K（p-PI3K）和磷酸化Akt（p-Akt）的水平。為了驗證PI3K/Akt信號通路在HT作用中的重要性，研究使用了PI3K/Akt信號通路抑制劑LY294002。結果顯示，抑制該通路顯著降低了HT對抗氧化能力和細胞活力的保護作用。此外，HT處理還增加了Nrf2的磷酸化（p-Nrf2）和下游抗氧化基因（如HO-1和NQO1）的表達。當使用Nrf2信號通路抑制劑ML385時，HT的保護作用被顯著抑制，進一步證實了PI3K/Akt-Nrf2信號通路在HT抗氧化作用中的關鍵作用。圖2羥基酪醇（HT）通過Nrf2信號通路增加抗氧化能力并減輕氧化應激。除了PI3K/Akt-Nrf2信號通路外，研究還發現HT處理誘導了豬和IPEC-J2細胞中的自噬體形成，并增加了自噬相關蛋白（如Parkin、LC3II和ATG5）的表達。為了驗證自噬在HT作用中的重要性，研究使用了自噬抑制劑Mdivi-1。結果顯示，抑制自噬顯著降低了HT對抗氧化能力和細胞活力的保護作用，并增加了ROS水平。此外，研究還發現抑制Nrf2信號通路促進了自噬，而抑制自噬則增加了Nrf2的磷酸化和下游抗氧化基因的表達，表明Nrf2信號通路和自噬之間存在相互作用。圖3羥基酪醇（HT）激活線粒體自噬以調節仔豬和IPEC-J2細胞的氧化應激。本研究表明，HT通過激活PI3K/Akt-Nrf2信號通路和促進自噬來減輕腸道氧化損傷。這些發現為HT在腸道疾病治療中的應用提供了新的理論依據和實驗支持。未來的研究可以進一步探索HT在其他疾病模型中的作用機制，并考慮與其他抗氧化藥物的聯合應用以提高治