皮膚科常見診斷技術本課程介紹現代皮膚科診斷技術目錄1基礎檢查視診、觸診、伍德燈、皮膚鏡2取樣檢查皮膚活檢、實驗室檢查、病理學3特殊檢查免疫技術、過敏原檢測、影像學4新興技術第一部分：基礎皮膚檢查視診觀察皮損形態分布觸診感知質地溫度硬度輔助檢查視診形態觀察斑疹、丘疹、水皰結節、膿皰、鱗屑分布特點對稱性、線狀、成群泛發性、局限性顏色變化紅色、褐色、紫色觸診溫度評估炎癥區域溫度升高質地感知軟硬程度、平滑粗糙硬度測定皮下組織質地改變深度評估伍德燈檢查工作原理利用紫外線照射皮膚波長320-400nm特定物質產生熒光臨床應用白癜風呈純白色花斑癬呈黃綠色熒光痤瘡丙酸桿菌呈珊瑚紅色操作要點暗室進行燈光預熱1分鐘距離皮膚10-15厘米皮膚鏡檢查設備類型手持式皮膚鏡檢查方法接觸法需涂抹油脂數碼皮膚鏡可記錄圖像追蹤變化偏振光皮膚鏡無需接觸液體皮膚鏡檢查皮膚病皮膚鏡特征黑素細胞痣對稱色素網狀結構基底細胞癌樹枝狀血管、藍灰色卵圓巢惡性黑色素瘤不規則色素網、藍白色面紗銀屑病均勻分布的點狀血管扁平苔蘚Wickham條紋第二部分：皮膚活檢選擇部位代表性、活動性皮損局部麻醉1%利多卡因注射獲取樣本刮取、鉆取或切除固定保存10%福爾馬林溶液皮膚活檢概述1869年歷史起源首次記載皮膚活檢技術90%診斷準確率結合臨床可達高準確率15分鐘操作時間標準程序所需時間3-5天報告時間常規病理結果等待時間皮膚活檢類型刮取活檢表淺病變如疣手術刀片刮除無需縫合鉆取活檢直徑2-8mm圓柱狀可取全層皮膚小直徑無需縫合切除活檢橢圓形全層切除適用深部病變需縫合皮膚活檢操作步驟消毒準備碘伏消毒皮膚局部麻醉皮下注射麻醉藥執行活檢垂直皮膚旋轉鉆取器提取標本鑷子輕提組織剪斷基底剪刀剪斷皮下組織縫合傷口適用大于4mm傷口皮膚活檢注意事項1避免低血供區域小腿遠端、足踝等愈合差2防止感染風險無菌操作、術后護理3注意瘢痕形成面部等重要部位慎重4出血風險控制抗凝藥物患者提前停藥皮膚活檢的適應癥可疑腫瘤色素改變、快速生長不明原因皮損常規治療無效病例感染性疾病特殊感染診斷自身免疫性疾病狼瘡、天皰瘡等不典型皮疹臨床表現不典型第三部分：實驗室檢查血液學血常規、炎癥指標生化檢查肝腎功能、電解質免疫學自身抗體、補體微生物學培養、鑒定病原體血液學檢查檢查項目臨床意義相關皮膚病白細胞計數感染、炎癥反應膿皰病、皮膚感染嗜酸性粒細胞過敏反應特應性皮炎、藥疹血小板計數出血傾向血管炎、紫癜紅細胞沉降率非特異性炎癥結節性紅斑、系統性血管炎C反應蛋白急性炎癥反應蜂窩織炎、膿皮病生化檢查肝功能轉氨酶：藥物反應監測白蛋白：營養狀態膽紅素：肝損傷腎功能肌酐：藥物調整劑量尿素氮：腎功能評估電解質：系統性影響代謝指標血糖：糖尿病皮膚病變血脂：黃色瘤癥尿酸：痛風結晶沉積免疫學檢查自身抗體抗核抗體(ANA)抗Ro/La抗體抗中性粒細胞胞漿抗體基底膜帶抗體表皮細胞間抗體補體系統C3、C4水平CH50活性補體消耗相關疾病系統性紅斑狼瘡皮肌炎硬皮病大皰性皮膚病血管炎微生物學檢查樣本采集拭子、分泌物、組織培養與分離選擇適當培養基鏡檢鑒定形態學特征觀察藥敏試驗確定有效抗生素病毒學檢查PCR技術檢測病毒DNA/RNA血清學檢測IgM、IgG抗體電子顯微鏡直接觀察病毒顆粒病毒培養特定細胞系培養第四部分：皮膚病理學確定診斷金標準診斷方法疾病分類亞型和階段鑒別3嚴重程度評估侵犯深度和范圍皮膚病理學概述組織取樣獲取代表性皮膚組織樣本處理固定、包埋、切片染色技術常規與特殊染色顯微觀察形態學改變分析4組織病理學檢查流程1組織固定10%福爾馬林浸泡24小時2脫水處理酒精梯度遞增脫水3透明處理二甲苯溶液浸泡4石蠟包埋液態石蠟浸透組織5切片制作4-6μm厚度切片6染色處理HE染色或特殊染色HE染色技術蘇木精染色細胞核呈藍紫色伊紅染色細胞質呈粉紅色完整觀察顯示組織結構層次特殊染色技術染色方法用途顯示結構PAS染色真菌檢測真菌呈洋紅色銀染色基底膜、真菌呈黑色或棕色Giemsa染色細胞質內包涵體嗜堿性結構Masson三色膠原纖維膠原纖維呈藍色剛果紅染色淀粉樣物質淀粉樣物質橘紅色免疫組織化學基本原理抗原抗體特異性反應酶標記抗體結合靶點底物顯色反應可視化常用標記物CD標記：淋巴細胞亞群細胞角蛋白：上皮來源S-100：神經源性腫瘤臨床應用腫瘤分類和分型淋巴瘤免疫表型轉移癌原發灶確定常見皮膚病的病理特征第五部分：免疫熒光技術免疫熒光原理抗原抗體特異性結合熒光標記可視化紫外線激發發光直接免疫熒光檢測組織內自身抗體活檢組織直接處理診斷自身免疫性疾病間接免疫熒光檢測血清中循環抗體使用標準底物定量血清抗體水平直接免疫熒光（DIF）取樣要求活檢組織不可固定樣本處理冷凍切片制備熒光抗體標記抗IgG/IgA/IgM等3熒光顯微鏡觀察熒光分布模式4間接免疫熒光（IIF）血清稀釋梯度稀釋患者血清底物孵育標準組織切片與血清反應熒光抗體加入熒光標記的抗人免疫球蛋白顯微觀察判讀熒光強度和分布模式免疫熒光在自身免疫性皮膚病中的應用天皰瘡細胞間IgG沉積大皰性類天皰瘡基底膜帶線性IgG沉積皮肌炎基底膜帶顆粒狀IgG、C3狼瘡基底膜帶顆粒狀IgG、IgM、C3第六部分：皮膚過敏原檢測明確過敏原確定具體致敏物質尋找病因找出致敏源頭避免接觸預防再次發作斑貼試驗貼敷操作標準過敏原貼于背部保持48小時不可淋浴、劇烈運動移除貼片記錄初始反應再次復查72小時、96小時讀取結果皮內試驗1前臂操作選擇前臂掌側皮膚2微量注射0.02-0.05ml過敏原溶液3對照設置陽性對照（組胺）和陰性對照（生理鹽水）415-30分鐘讀取測量紅斑和風團直徑特異性IgE檢測免疫熒光法UniCAP系統ELISA法酶聯免疫吸附試驗微陣列技術多種過敏原同時檢測分子診斷組分分辨過敏原第七部分：影像學檢查皮膚超聲檢查原理高頻聲波反射成像無創實時觀察可顯示皮膚各層結構設備20MHz：觀察真皮50-100MHz：表皮觀察多普勒：血流評估優勢無輻射安全成本相對較低可重復檢查皮膚超聲檢查皮膚病超聲表現良性痣均勻低回聲結節基底細胞癌邊界不規則低回聲區鱗狀細胞癌中等回聲腫塊伴侵襲性皮膚囊腫無回聲區伴后方增強血管瘤低回聲伴豐富血流信號CT和MRI在皮膚病診斷中的應用CT檢查優勢骨骼侵犯評估深部軟組織觀察淋巴結轉移檢測MRI檢查優勢軟組織對比度高多平面成像能力無輻射傷害適應癥惡性腫瘤分期深部血管畸形脂肪組織疾病第八部分：分子生物學技術PCR技術擴增特定基因片段基因測序確定DNA序列變異基因芯片多基因表達分析基因編輯研究基因功能PCR技術在皮膚病診斷中的應用樣本收集皮膚活檢、分泌物DNA提取提取純化核酸PCR擴增特異性引物擴增結果檢測凝膠電泳或實時熒光基因測序技術文庫構建DNA片段化與標記2測序反應新一代測序平臺數據分析生物信息學處理臨床解讀變異致病性評估基因芯片技術基本原理DNA探針固定于芯片雜交過程樣本與探針互補結合信號檢測熒光掃描信號強度數據分析基因表達差異分析第九部分：新興診斷技術0.5μm共聚焦顯微鏡分辨率細胞級皮膚成像1-2mmOCT穿透深度真皮層無創成像95%AI黑色素瘤識別準確率計算機輔助診斷5秒拉曼光譜采集時間快速分子組成分析共聚焦激光掃描顯微鏡工作原理激光掃描焦平面去除非焦平面信號細胞級分辨率臨床應用色素性病變鑒別原位觀察細胞形態動態觀察生理過程優勢特點無創"光學活檢"實時觀察無需染色光學相干斷層掃描（OCT）分層成像皮膚各層清晰顯示腫瘤診斷顯示異常組織結構特殊部位指甲、毛囊評估拉曼光譜分析激光照射單色光照射樣本散射現象分子振動引起能量變化光譜收集記錄散射光波長變化3分子"指紋"特定物質特征譜圖4人工智能輔助診斷圖像采集皮損臨床照片圖像處理提取關鍵特征算法分析深度學習模型識別結果輸出診斷建議與概率第十部分：特殊皮膚病的診斷技術銀屑病診斷技術薄膜現象刮除鱗屑見薄膜點狀出血繼續刮除見點狀出血組織病理表皮肥厚、角化不全PASI評分標準化嚴重程度評估濕疹診斷技術臨床評估SCORAD評分系統EASI評分系統病變面積與嚴重度過敏原檢測斑貼試驗特異性IgE食物激發試驗輔助檢查組織病理：海綿水腫皮膚屏障功能測定經表皮水分丟失測量皮膚腫瘤診斷技術ABCDE原則不對稱、邊緣、顏色、直徑、演變皮膚鏡檢查特征結構分析全身攝影痣圖譜追蹤變化活檢病理確定性診斷分期檢查淋巴結超聲、CT/MRI、PET-CT自身免疫性皮膚病診斷技術自身抗體檢測循環抗體滴度檢測免疫熒光組織沉積免疫復合物病理活檢特征性病理改變免疫異常指標補體水平、炎癥標志物感染性皮膚病診斷技術病原體類型檢查方法特點細菌革蘭染色、培養快速初步鑒定真菌KOH直接鏡檢顯示菌絲孢子病毒Tzanck涂片多核巨細胞寄生蟲刮取鏡檢直接觀察蟲體各類病原體PCR檢測高特異性鑒定第十一部分：診斷技術的選擇和綜合應用確定診斷最終綜合判斷實驗室檢查客觀指標確認輔助技術特殊檢查手段病史與體格檢查基礎臨床信息收集診斷策略的制定臨床問題明確診斷目標鑒別診斷列出可能疾病選擇檢查成本效益評估結果判讀整合分析決策多種診斷技術的聯合應用臨床評估詳細病史與體格檢查影像學皮膚鏡、超聲等病理檢查組織學確診3實驗室檢