2025/4/13第十一章

高效毛細管電泳分析一、概述generalization二、經典電泳分析法traditionalelectrophoresis三、高效毛細管電泳分析法highperformancecapillaryelectrophoresis第一節

概述generalizationHighperformancecapillaryelectrophoresis,HPCE2025/4/13一、概述generalization

在電解質溶液中，位于電場中的帶電離子在電場力的作用下，以不同的速度向其所帶電荷相反的電極方向遷移的現象，稱之為電泳。由于不同離子所帶電荷及性質的不同，遷移速率不同，可實現分離。

1937年，Tiselius(瑞典)將蛋白質混合液放在兩段緩沖溶液之間，兩端施以電壓進行自由溶液電泳，第一次將人血清提取的蛋白質混合液分離出白蛋白和α、β、γ球蛋白；

發現樣品的遷移速度和方向由其電荷和淌度決定；第一次的自由溶液電泳；第一臺電泳儀；1948年，獲諾貝爾化學獎；（動畫）2025/4/13二、經典電泳分析

traditionalelectrophoresis

利用電泳現象對某些化學或生物物質進行分離分析的方法和技術叫電泳法或電泳技術。按形狀分類：U型管電泳、柱狀電泳、板電泳；按載體分類：濾紙電泳、瓊脂電泳、聚丙烯酰胺電泳、自由電泳；傳統電泳分析：操作煩瑣，分離效率低，定量困難，無法與其他分析相比。1981年，Jorgenson和Luckas，用75m內徑石英毛細管進行電泳分析，柱效高達40萬/m，促進電泳技術發生了根本變革，迅速發展成為可與GC、HPLC相媲美的嶄新的分離分析技術——高效毛細管電泳。2025/4/13三、高效毛細管電泳分析

highperformancecapillaryelectrophoresis高效毛細管電泳在技術上采取了兩項重要改進：

一是采用了0.05mm內徑的毛細管,；二是采用了高達數千伏的電壓。毛細管的采用使產生的熱量能夠較快散發，大大減小了溫度效應，使電場電壓可以很高。電壓升高，電場推動力大，又可進一步使柱徑變小，柱長增加，高效毛細管電泳的柱效遠高于高效液相色譜，理論塔板數高達幾十萬塊/米，特殊柱子可以達到數百萬。2025/4/13分離過程

電場作用下，毛細管柱中出現：電泳現象和電滲流現象。

帶電粒子的遷移速度=電泳+電滲流；兩種速度的矢量和。

正離子：兩種效應的運動方向一致，在負極最先流出；

中性粒子無電泳現象，受電滲流影響，在陽離子后流出；

陰離子：兩種效應的運動方向相反。ν電滲流>ν電泳時,陰離子在負極最后流出,在這種情況下,不但可以按類分離,除中性粒子外,同種類離子由于受到的電場力大小不一樣也同時被相互分離。（動畫）2025/4/13高效毛細管電泳的特點1.儀器簡單、易自動化

電源、毛細管、檢測器、溶液瓶2.分析速度快、分離效率高

在3.1min內分離36種無機及有機陰離子，4.1min內分離了24種陽離子；分離柱效：105～107/m理論塔板數；3.操作方便、消耗少

進樣量極少，水介質中進行；4.應用范圍極廣有機物、無機物、生物、中性分子；生物大分子等；分子生物學、醫學、藥學、化學、環境保護、材料等；

2025/4/13內容選擇結束第一節概述generalization第二節高效毛細管電泳的理論基礎basictheoryofHPCE第三節高效毛細管電泳儀器highperformancecapillaryelectrophoresisapparatus第四節高效毛細管電泳的分離模式separatetypesofHPCE第五節應用與進展applicationandadvancesofHPCE賣油翁下課了，回顧學習一個小故事吧！學習目標1、復述故事，深入理解文章內容，初步把握人物形象。2、學會利用文中關鍵詞句分析人物形象。3、體會文章所揭示的深刻道理。故事發生的時間、地點、人物、事件的起因、經過和結果要復述清楚。看圖復述課文內容自學指導(一)1、作者運用哪幾種方法去刻畫人物的形象？從文中找出具體句子進行分析。并說說你是如何看待這兩個人物的。2、從這個故事中你懂得了什么道理？自學指導(二)陳堯咨（善射）賣油翁（善酌）動作神態語言睨之無他，但手熟爾以我酌油知之我亦無他，惟手熟爾汝亦知射乎吾射不亦精乎爾安敢輕吾射釋擔而立但微頷之取置覆酌瀝性格:自矜（驕傲）謙虛對比道理:熟能生巧,即使有什么長處也不必驕傲自滿。忿然笑而遣之笑而遣之1、聯系生活、學習，說說熟能生巧的事例。

2、你認為一個人應該如何看待自己的長處？又如何看待他人的長處？課外延伸人外有人，天外有天。取人之長，補己之短。自滿人十事九空，虛心人萬