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文檔簡介
第2課時動物細胞融合技術(shù)與單克隆抗體
課標內(nèi)容(1)舉例說出動物細胞融合技術(shù)的概念、原理及應(yīng)用。(2)闡明利用動物
細胞融合技術(shù)制備單克隆抗體的過程。(3)認同單克隆抗體在臨床上有重要的應(yīng)用
價值。
一?自主梳理?
知識點1動物細胞融合技術(shù)
使兩個或多個動物細
細胞膜具
H原理卜1概念)-胞結(jié)合形成一個細胞
有流動性一
的技術(shù)
突破了有性
誘導(dǎo)①PEG融合法
雜交的局限,
,融合一②電融合法
使遠緣雜交一|義,
的方法③滅活病毒誘導(dǎo)法
成為可能
烏有原來兩個或登誘導(dǎo)動物相!
個紳胞的應(yīng)能融合特有“
動物細胞融合技術(shù)
的方法
:形成朵(jmL
二交細面至A
;(i)鹿痂訴究前府踵而、如麻血詆、師疝前顯著';
:生物新品種等的重要手段1
;(2)用于制造單克隆抗體;
\_________________________________________________,
知識點2單克隆抗體及其應(yīng)用
1.傳統(tǒng)抗體的獲得
多種從血清
方L抗兇動物絲產(chǎn)多種
、法廠I原肝|體內(nèi)成B淋巴中分離
生抗體
細胞抗體
缺
點產(chǎn)量低、純度低、特異性差
2.單克隆抗體及其應(yīng)用
(1)制備原理
B淋巴一個B淋巴細胞只分泌一種特
細胞「異性抗體
方需-能在體外大量增殖
細胞---
兒六一1B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合
喟舞一得到的雜交瘤細胞,既能大量
細胞增殖又能產(chǎn)生大量特定抗體
(2)制備過程
基于單克隆抗體制備的過程,完成下列問題:
I.A操作注射特定的抗原,目的是可以從小鼠的脾中得到產(chǎn)生特定抗體的B淋巴
細胞。
II.雜交瘤細胞技術(shù)選擇融合的兩種細胞:細胞①多種B淋巴細胞,細胞②骨髓瘤
細胞。
in.過程B和C為誘導(dǎo)細胞融合的過程,獲得的細胞③是多種(填“一種”或“多
種”)。
IV.細胞③到細胞④的過程使用特定的選擇培養(yǎng)基進行篩選,只有細胞④雜交瘤細
胞才能生長,其他細胞不能生長。
V.細胞⑤來源于細胞④(填數(shù)字序號),細胞⑤為抗體檢測呈陽性的雜交瘤細胞,
其分泌的抗體能與特定抗原結(jié)合。
VI.培養(yǎng)雜交瘤細胞的方法是注射到小鼠腹腔和D體外培養(yǎng),從小鼠腹水或細胞中
可提取⑥單克隆抗體。
⑶單克隆抗體的優(yōu)點
能準確地識別抗原的細微差別,與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合,并且可以大量制備。
(4)單克隆抗體的應(yīng)用
①用作診斷試劑,在多種疾病的診斷和病原體鑒定中發(fā)揮重要的作用。
②用于治療疾病和運載藥物。
[1自查自糾,
(1)動物細胞融合過程中既有細胞膜融合也有核的融合。(。)
(2)與植物原生質(zhì)體融合相比,動物細胞融合特有的誘導(dǎo)因素有聚乙二醇、滅活的
病毒。(X)
提示:與植物原生質(zhì)體融合相比動物細胞融合特有的誘導(dǎo)因素為滅活的病毒。
⑶用特定的抗原對小鼠進行免疫后,從小鼠脾臟中只能得到一種B淋巴細胞。(X)
提示:免疫后的小鼠從脾臟中獲取的是多種B淋巴細胞。
(4)單克隆抗體是單個B淋巴細胞增殖并產(chǎn)生的抗體。(X)
提示:單克隆抗體是雜交瘤細胞產(chǎn)生的抗體。
(5)單克隆抗體制備過程中的兩次篩選目的相同。(X)
提示:第一次篩選的目的是獲得雜交瘤細胞,而第二次篩選是為了獲得能分泌所
需抗體的雜交瘤細胞。
-----?合作探究?-----
一、動物細胞融合技術(shù)
【情境探疑】
植物體細胞雜交技術(shù),可以跨越植物種屬間生殖隔離的屏障,培育出新的作物類
型。科學(xué)家經(jīng)過長期的探索,也實現(xiàn)了用不同種動物的體細胞進行雜交。
參考圖示,回答問題。
融
-
合
用滅活病毒誘導(dǎo)動物細胞融合過程的示意圖
(1)動物細胞融合和植物體細胞雜交技術(shù)的原理分別是什么?
提示:動物細胞融合的原理是細胞膜具有流動性和細胞增殖;植物體細胞雜交技
術(shù)的原理是細胞膜具有流動性和植物細胞一般具有全能性。
⑵兩者在方法上有什么異同?
提示:都可用聚乙二醇(PEG)融合法和電融合法誘導(dǎo)融合;但動物細胞還可用滅
活病毒誘導(dǎo)法誘導(dǎo)細胞融合。
(3)兩者在最終結(jié)果上有什么不同?
提示:動物細胞融合最終得到的是雜交細胞,而植物體細胞雜交技術(shù)最終得到的
是雜種植株。
(4)動物細胞融合中為什么不用兩個而用多個細胞進行細胞間融合?
提示:就目前常用的細胞融合方法來看,不管物理法、化學(xué)法,還是生物法,其
融合率都不可能達到100%。僅用兩個細胞融合,效率太低,不一定能得到融合
細胞。
國歸納提升
植物體細胞雜交和動物細胞融合的比較
:植物體細越東交1項目;;動物細胞融合:
1_________________________I
VVV
細胞膜具有流動性、
細胞膜具有
植物細胞一般具有[原理)?
流動性
全能性
除去細胞壁I融合前處理)使細胞分散開
胰蛋白酶、膠原
纖維素酶和果膠酶
蛋白酶
物理法:電融合法
和離心法等;
PEG融合法、電
化學(xué)法:聚乙二醇
融合法和滅活病
()融合法、高
PEG毒誘導(dǎo)法等
Ca2+—高pH融合
法等
[結(jié)果]
雜種植株雜交細胞
培育植物新品種*[應(yīng)用)*制造單克隆抗體
巨
V
突破遠緣雜交不親和的障礙,打破了
生殖隔離,擴展了雜交的親本組合
【典例應(yīng)用】
例1(2023?哈爾濱三中高二檢測)下列有關(guān)動物細胞融合的敘述,錯誤的是()
A.指兩個或多個細胞融合成一個細胞的現(xiàn)象
B.可以在基因型相同或不同的細胞間進行
C.常用的誘導(dǎo)動物細胞融合的方法有聚乙二醇融合法、滅活病毒誘導(dǎo)法、電融合
法、紫外線照射等
D.其原理是細胞膜具有一定的流動性
答案C
解析動物細胞融合是指兩個或多個動物細胞結(jié)合形成一個細胞的過程,融合后
形成的雜交細胞具有原來兩個或多個細胞的遺傳信息,A正確;細胞融合技術(shù)的
優(yōu)點是突破了有性雜交的局限,使遠緣雜交成為可能,可以在基因型相同或不同
的細胞間進行,B正確;常用的誘導(dǎo)動物細胞融合的方法有電融合法、聚乙二醇
(PEG)融合法、滅活病毒誘導(dǎo)法等。紫外線照射不是誘導(dǎo)動物細胞融合的方法,C
錯誤;細胞膜具有一定的流動性,所以通過一定的手段進行誘導(dǎo),會發(fā)生動物細
胞融合,D正確。
例2下列有關(guān)植物體細胞雜交與動物細胞融合的比較,敘述正確的是()
A.兩者應(yīng)用的原理都完全相同
B.兩者都可用電融合法或聚乙二醇(PEG)融合法誘導(dǎo)細胞融合
C.兩者融合完成的標志都是形成融合細胞核
D.兩者的目的都是用于大量生產(chǎn)分泌蛋白
答案B
解析植物體細胞雜交的原理是細胞膜具有流動性和植物細胞一般具有全能性,
動物細胞融合的原理是細胞膜具有流動性;電融合法或聚乙二醇(PEG)融合法既
可誘導(dǎo)動物細胞融合,也可誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合;植物原生質(zhì)體融合完成的標
志是雜種細胞再生出細胞壁,動物細胞融合完成的標志是形成融合細胞核;植物
體細胞雜交的目的是產(chǎn)生雜種植株,動物細胞融合可用于大量生產(chǎn)分泌蛋白等。
二、單克隆抗體及其應(yīng)用
【情境探疑】
1.“生物導(dǎo)彈”是免疫導(dǎo)向藥物的形象稱呼,由單克隆抗體與藥物結(jié)合而成,單
克隆抗體的制備過程如圖所示。
為了獲得能產(chǎn)生和庇加林的B淋巴紳胞
注射特里/
免疫勺鴻產(chǎn)原百一培養(yǎng)骨髓
小鼠片?瘤細胞
多種B門述右謨骨髓瘤
淋巴細胞細胞
[京導(dǎo)融合
???領(lǐng)領(lǐng)
多種雜J'/S"7S"A'::ziS"7S'l自身融
交細胞…合細胞
第一次篩選[用特定選擇培養(yǎng)基篩選
雜交瘤細胞。。
I克隆上述雜交瘤細胞
8q如殳專一抗體檢驗陽性
第二次篩詵|將不同種雜交瘤細胞分開,
I并克隆專一抗體檢驗陽性細胞
注射到小
鼠腹腔內(nèi)!般為在3鼠成腔內(nèi)
”喬培茶則從腹水?中
提取;為在?培養(yǎng)?
液中培家,則從
單克隆抗體培春海中提取
(1)圖中B過程表示動物細胞融合,與原生質(zhì)體融合相比,該過程特有的誘導(dǎo)方法
為滅活病毒誘導(dǎo)法。
(2)若只考慮細胞兩兩融合,B過程會獲得工種類型的細胞。經(jīng)特定選擇培養(yǎng)基篩
選后,未融合的親本細胞和融合的具有同種核的細胞都會死亡,只有融合的雜交
瘤細胞才能生長。
(3)單克隆抗體制備過程中,兩次篩選的目的分別是什么?方法分別是什么?
提示:第一次篩選的目的是篩選出雜交瘤細胞;方法是用選擇培養(yǎng)基進行篩選。
第二次篩選的目的是篩選出能分泌所需抗體的雜交瘤細胞;方法是抗體檢測,其
原理是抗原一抗體的特異性結(jié)合。
⑷注射到小鼠體內(nèi)進行培養(yǎng)的細胞具有的特點是既能大量增殖又能產(chǎn)生特定抗
fto
(5)圖示過程生產(chǎn)出的單克隆抗體不能直接用于人體,理由是小鼠形成的抗體對人
體來說是抗原,存在著排異反應(yīng)。
(6)“生物導(dǎo)彈”中單克隆抗體的作用是將藥物定向運到靶細胞。
2.研究表明,細胞合成DNA有D和S兩條途徑,其中D途徑能被氨基蝶吟阻斷。
免疫的B淋巴細胞中有這兩種DNA的合成途徑,但它不能分裂增殖,其本身也
不能在體外長期存活。鼠骨髓瘤細胞中只有D途徑,沒有S途徑,但它能不斷分
裂增殖,如果它的D途徑被阻斷的話,它會因不能合成DNA而死。請據(jù)此提出
篩選雜交瘤細胞的方法。
提示:向培養(yǎng)液中加入氨基蝶吟,收集增殖的細胞。加入氨基蝶吟后,使D合成
途徑阻斷,僅有D合成途徑的骨髓瘤細胞及其彼此融合的細胞就不能增殖,但B
淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合后的雜交瘤細胞可以利用B淋巴細胞的S途徑合成
DNA而增殖。
但歸納提升
1.單克隆抗體制備過程中兩次篩選的比較
;項目]
'第一次篩選;\第二次篩選:
V'一7一'V
由于小鼠在生活中
誘導(dǎo)融合后得到多還受到其他抗原的
種雜交細胞,另外刺激,所以經(jīng)選擇
還有未融合的細胞培養(yǎng)獲得的雜交瘤
細胞中有能產(chǎn)生其
他抗體的細胞
用特定的選擇培養(yǎng)
基篩選;未融合的
用多孔培養(yǎng)皿培養(yǎng),
細胞和同種細胞融
在每個孔只有一個
合后形成的細胞
雜交瘤細胞的情況
(B-B雜交細胞、
下開始克隆化培養(yǎng)
瘤-瘤雜交細胞)
和抗體檢測,經(jīng)多
都會死亡,只有雜
次篩選得到能產(chǎn)生
交瘤細胞(瘤-B雜
所需抗體的雜交瘤
交細胞)才能生長
細胞
得到能分泌所需抗
得到雜交瘤細胞
體的雜交瘤細胞
2.ADC分子的作用機制及應(yīng)用
(1)組成:ADC通常由抗體、接頭和藥物(如細胞毒素)三部分組成,如下圖。
①抗體
(2)作用原理:通過將藥物與能特異性識別腫瘤抗原的單克隆抗體結(jié)合,實現(xiàn)了對
腫瘤細胞的選擇性殺傷。
ADC的作用機制示意圖
(3)應(yīng)用:廣泛用于治療疾病和運載藥物(主要用于癌癥治療,也有少量用于治療其
他疾病)。
(4)優(yōu)點:ADC被譽為抗腫瘤藥物中的“智能生物導(dǎo)彈”,其“彈頭”的威力大
小直接關(guān)乎療效。靶向遞送毒性小分子的“生物導(dǎo)彈”具有療效高、毒副作用小
的優(yōu)點。
【典例應(yīng)用】
例3下列關(guān)于單克隆抗體制備的說法,正確的是()
A.將特定抗原注射到小鼠體內(nèi),可以從小鼠血清中獲得單克隆抗體
B.經(jīng)特定抗原免疫過的B淋巴細胞在體外培養(yǎng)時可分泌單克隆抗體
C.誘導(dǎo)B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合后,發(fā)生融合的細胞均為雜交瘤細胞
D.篩選出雜交瘤細胞后,需利用特定抗原再次篩選出能分泌所需抗體的細胞
答案D
解析制備單克隆抗體過程中,可在體外雜交瘤細胞的培養(yǎng)液中,或小鼠體內(nèi)腹
水中獲得純化的單克隆抗體,A錯誤;免疫過的B淋巴細胞高度分化,不能增殖,
無法分泌單克隆抗體,B錯誤;發(fā)生融合的細胞可能有三種(僅考慮兩兩融合),
即B淋巴細胞與B淋巴細胞融合的細胞、B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合的細胞(雜
交瘤細胞)、骨髓瘤細胞與骨髓瘤細胞融合的細胞,C錯誤;制備單克隆抗體時,
需篩選兩次,第一次得到雜交瘤細胞,第二次得到既能大量增殖又能產(chǎn)生所需抗
體的雜交瘤細胞,D正確。
例4(多選)(2023?山東師大附中高二檢測)甘草酸是中藥甘草中的主要活性成分。
為了快速檢測甘草酸,科研人員利用細胞工程技術(shù)制備了抗甘草酸的單克隆抗體,
其基本操作過程如下圖。下列相關(guān)敘述正確的是()
給小鼠注射細胞甲抗甘
甘草酸一草酸
血清白蛋白②一③'④-⑤的單
結(jié)合抗原—克隆
①細胞乙細胞丙細胞丁抗體
骨髓瘤細胞
A.過程①注射相應(yīng)抗原后應(yīng)立即從小鼠脾臟中提取細胞甲
B.過程②誘導(dǎo)細胞融合,利用了細胞膜的流動性
C.過程③④的篩選方法相同,細胞丙、丁的遺傳物質(zhì)相同
D.過程⑤無論在體內(nèi)還是體外進行,細胞丁都可大量增殖
答案BD
解析過程①注射相應(yīng)抗原后應(yīng)經(jīng)過一段時間,使小鼠獲得能產(chǎn)生相應(yīng)抗體的B
淋巴細胞,再從小鼠脾臟中提取細胞甲,A錯誤;過程②誘導(dǎo)細胞融合,利用了
細胞膜的流動性,B正確;過程③篩選雜交瘤細胞,過程④篩選能產(chǎn)生所需抗體
的雜交瘤細胞,二者篩選方法不同,細胞丙、丁的遺傳物質(zhì)也不一定相同,C錯
誤;過程⑤無論在體內(nèi)還是體外進行,細胞丁都可大量增殖,D正確。
?課堂小結(jié)?
思維導(dǎo)圖晨讀必背
1.誘導(dǎo)動物細胞融合的常用方法有PEG
融合法、電融合法和滅活病毒誘導(dǎo)法等。
2.雜交瘤細胞既能迅速大量增殖,又能
產(chǎn)生特定抗體。
期■細胞膜具有流動性3.制備單克隆抗體過程中第一次篩選是
細胞
為了獲得雜交瘤細胞,第二次篩選是為
理_物理法、化學(xué)法、生物法
[技術(shù)了獲得能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞。
-----獲取已免疫的B淋巴細胞和骨髓瘤
單克電就細胞一融合、篩選一朵交瘤細胞一4.對經(jīng)選擇培養(yǎng)的雜交瘤細胞進行克隆
隆抗------動物細胞培養(yǎng)一提取單克隆抗體化培養(yǎng)和抗體檢測,經(jīng)多次篩選,就可
|體聯(lián)-診斷試劑;治療疾病;運載藥物
獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細
胞。
5.單克隆抗體能準確地識別抗原的細微
差異,與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合,并
且可以大量制備。
隨堂檢測
1.下列關(guān)于動物細胞融合的說法,錯誤的是()
A.細胞融合前通常用酶解法將組織分散成單個細胞
B.細胞融合的原理是細胞膜具有一定的流動性
C.融合后得到的雜交細胞具有兩個或多個親本細胞的遺傳信息
D.融合后得到的雜交細胞具有兩個細胞核
答案D
解析動物細胞融合前通常要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶等將組織分散成單個細胞,
A正確;動物細胞融合的原理是細胞膜具有一定的流動性,B正確;融合后得到
的雜交細胞具有兩個或多個親本細胞的遺傳信息,C正確;融合后得到的雜交細
胞只有一個細胞核,D錯誤。
2.(多選)下圖是單克隆抗體制備流程的簡明示意圖。下列有關(guān)敘述正確的是()
抗原
①/骨髓瘤細胞
G)③
小鼠腹腔體外培養(yǎng)
II
單克隆抗體
A.①是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的B淋巴細胞
B.②中使用胰蛋白酶促進雜交瘤細胞的形成
C.③可表示雜交瘤細胞,同時具有脾臟細胞和鼠骨髓瘤細胞的特性
D.④是經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細胞群
答案AD
解析①是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的B淋巴細胞,A正確;在動物細胞融合
的過程中,可用物理法、化學(xué)法和生物法誘導(dǎo),而胰蛋白酶是在動物細胞培養(yǎng)過
程中用于分離細胞的,B錯誤;③可表示細胞融合得到的雜交瘤細胞,它同時具
有B淋巴細胞產(chǎn)生抗體的特性和鼠骨髓瘤細胞大量增殖的特性,C錯誤;④是經(jīng)
篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的雜交瘤細胞群,D正確。
3.(2023?北京市陳經(jīng)綸中學(xué)高二期中)如圖為細胞融合的示意圖,下列敘述正確的
是()
?a?b
0c
A.若a細胞和b細胞是植物細胞,需先脫分化再誘導(dǎo)融合
B.a細胞和b細胞之間的融合需要促融處理后才能實現(xiàn)
C.c細胞的形成與a、b細胞的全能性有關(guān)
D.c細胞將同時表達a細胞和b細胞中的所有基因
答案B
解析若a細胞和b細胞是植物細胞,需先去除細胞壁再誘導(dǎo)融合,A錯誤;c
細胞的形成體現(xiàn)了細胞膜具有流動性,與a、b細胞的全能性無關(guān),C錯誤;c細
胞將選擇性地表達a細胞和b細胞中的基因,D錯誤。
4.(2023?河南西華一高高二下期中)如圖表示抗人體胃癌的單克隆抗體的制備過程,
下列有關(guān)敘述錯誤的是()
抗胃
E注射I日B淋巴
癌
甲---■?小鼠一單
細胞融.乙選擇丙專一抗,分
克
隆
骨髓杳*乙培養(yǎng)T-拓
抗
體檢測體
瘤細胞
A.圖中實驗小鼠注射的甲是能與抗人體胃癌抗體特異性結(jié)合的抗原
B.利用PEG融合法、滅活的病毒誘導(dǎo)法和電融合法等均可誘導(dǎo)細胞融合獲得乙
C.用特定的選擇培養(yǎng)基對乙篩選,融合細胞均能生長,未融合細胞均不能生長
D.丙需進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測,經(jīng)多次篩選后可獲得大量能分泌所需抗體的
T
答案C
解析選擇培養(yǎng)基只能讓特定的符合條件的細胞存活下來,在題目給定的選擇培
養(yǎng)基上,只有雜交瘤細胞才能夠存活,C錯誤。
課時精練
(時間:30分鐘)
【基礎(chǔ)對點】
知識點1動物細胞融合技術(shù)
1.下列關(guān)于動物細胞融合技術(shù)的敘述,錯誤的是()
A.細胞融合技術(shù)能應(yīng)用于細胞遺傳、細胞免疫等研究
B.動物細胞融合的成功是細胞膜具有流動性的有力證據(jù)
C.動物細胞融合的基本原理與植物原生質(zhì)體融合的基本原理不同
D.除化學(xué)法和物理法外,動物細胞融合還可由滅活病毒誘導(dǎo)
答案C
解析細胞融合技術(shù)是細胞遺傳、細胞免疫等研究的重要手段,A正確;動物細
胞融合的成功證明了組成細胞膜的分子是可以運動的,說明細胞膜具有流動性,
B正確;動物細胞融合與植物原生質(zhì)體融合的原理都是細胞膜具有一定的流動性,
C錯誤;誘導(dǎo)動物細胞融合的方法有物理法、化學(xué)法和生物法,生物法即用滅活
的病毒誘導(dǎo)細胞融合,D正確。
2.(2022.天津市階段練習(xí))如圖表示仙臺病毒誘導(dǎo)動物細胞融合的部分過程,下列
敘述正確的是()
細胞A細胞B細胞C
A.細胞A和細胞B必須為同種細胞才能融合
B.細胞C同時有細胞A和細胞B的遺傳物質(zhì)
C.該融合過程體現(xiàn)了細胞膜具有選擇透過性
D.此過程的原理是動物細胞具有全能性
答案B
解析不同種的細胞也能融合,如人、鼠細胞融合,A錯誤;如題圖所示,細胞
A、B融合成一個細胞,細胞C同時有細胞A和細胞B的遺傳物質(zhì),B正確;該
融合過程體現(xiàn)了細胞膜具有流動性,C錯誤;此過程的原理是動物細胞膜具有流
動性,D錯誤。
知識點2單克隆抗體及其應(yīng)用
3.(2023?天津靜海區(qū)高二檢測)以SARS病毒核衣殼蛋白為抗原制備出單克隆抗體。
下列相關(guān)敘述正確的是()
A.用純化的核衣殼蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi),產(chǎn)生的血清抗體為單克隆抗體
B.體外培養(yǎng)漿細胞可以獲得大量針對SARS病毒的單克隆抗體
C.融合并篩選特定的雜交瘤細胞,原代培養(yǎng)產(chǎn)生遺傳物質(zhì)改變后才能進行傳代培
養(yǎng)
D.用該單克隆抗體與SARS病毒核衣殼蛋白特異性結(jié)合的方法可診斷出病毒感染
者
答案D
解析單克隆抗體是由能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合形成的雜
交瘤細胞分泌的,A錯誤;單獨的效應(yīng)B細胞有產(chǎn)生抗體的能力,但沒有無限增
殖的能力,因此在體外培養(yǎng)漿細胞是不能得到大量的單克隆抗體的,B錯誤;單
克隆抗體制備需要細胞融合并篩選特定的雜交瘤細胞,原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)的區(qū)
別并不是遺傳物質(zhì)的改變與否,傳代培養(yǎng)的細胞遺傳物質(zhì)不一定改變,C錯誤;
單克隆抗體能準確地識別抗原的細微差異,與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合,因此利
用該單克隆抗體與SARS病毒核衣殼蛋白特異性結(jié)合的方法可診斷出病毒感染者,
D正確。
4.單克隆抗體制備過程中,骨髓瘤細胞和B淋巴細胞誘導(dǎo)融合后,要用特定培養(yǎng)
基篩選出雜交瘤細胞。在這種培養(yǎng)基上不能存活、增殖的細胞是()
①B淋巴細胞②小鼠骨髓瘤細胞③B淋巴細胞自身融合細胞④小鼠骨髓瘤
細胞自身融合細胞⑤雜交瘤細胞
A.①②③④B.①③⑤
C.②④D.①③
答案A
解析用特定培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞的目的是篩選出既能大量增殖、又能產(chǎn)生特定抗體
的雜交瘤細胞,因此除了雜交瘤細胞,其他的細胞都不能在此培養(yǎng)基上生存。所
以在這種培養(yǎng)基上不能存活、增殖的細胞有:①B淋巴細胞,②小鼠骨髓瘤細胞,
③B淋巴細胞自身融合細胞,④小鼠骨髓瘤細胞自身融合細胞。故A符合題意。
5.(2023?江蘇泰州高二期中)下列有關(guān)單克隆抗體制備過程的敘述,錯誤的是()
A.過程①注射一種滅活病毒可使小鼠體內(nèi)產(chǎn)生多種B淋巴細胞
B.過程②形成的兩兩融合細胞只有圖中的3種類型
C.過程③采用抗原一抗體雜交法進行特定雜交瘤細胞的篩選
D.過程④獲得的全部雜交瘤細胞都只能產(chǎn)生同一種抗體
答案B
解析一種滅活病毒可能存在多種抗原,因此注射一種滅活病毒可使小鼠體內(nèi)產(chǎn)
生多種B淋巴細胞,A正確;過程②形成的兩兩融合細胞包括同種細胞融合細胞
和異種細胞融合細胞,即過程②還可以形成B淋巴細胞自身融合細胞、骨髓瘤細
胞自身融合細胞,B錯誤;過程③可借助抗原一抗體雜交法進行特定雜交瘤細胞
的篩選,篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞,C正確;經(jīng)過過程③篩選獲得能
產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細胞,再經(jīng)過過程④克隆獲得的全部雜交瘤細胞都只能產(chǎn)
生同一種抗體,D正確。
6.(2023?合肥一中高二期中)某生物工程公司擬利用細胞工程方法,以新型冠狀病
毒核衣殼蛋白為抗原制備單克隆抗體。相關(guān)敘述正確的是()
A.將純化的核衣殼蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi),產(chǎn)生的血清抗體特異性強
B.體外培養(yǎng)單個B淋巴細胞還可以獲得大量針對新型冠狀病毒的細胞因子
C.利用該單克隆抗體與新型冠狀病毒核衣殼蛋白特異性結(jié)合可診斷出病毒感染者
D.將等量B淋巴細胞和骨髓瘤細胞混合,經(jīng)PEG誘導(dǎo)融合后的細胞均為雜交瘤
細胞
答案C
解析將純化的核衣殼蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi),產(chǎn)生的血清抗體不是單克隆抗
體,其特異性差,A錯誤;單獨的B淋巴細胞有產(chǎn)生抗體的能力,但沒有無限增
殖的能力,因此在體外培養(yǎng)的情況下是不可能得到大量的單克隆抗體的,而且B
淋巴細胞不分泌細胞因子,B錯誤;單克隆抗體能準確地識別抗原的細微差異,
與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合,因此利用該單克隆抗體與新型冠狀病毒核衣殼蛋白
特異性結(jié)合的方法可診斷出病毒感染者,C正確;將等量B淋巴細胞和骨髓瘤細
胞混合,經(jīng)PEG誘導(dǎo)融合后的細胞有B淋巴細胞自身融合細胞、骨髓瘤細胞自
身融合細胞和雜交瘤細胞三種(只考慮細胞的兩兩融合),D錯誤。
【綜合提升】
7.(2023?遼寧大連高三模擬)下列關(guān)于動物細胞融合技術(shù)與植物體細胞雜交技術(shù)的
比較,敘述錯誤的是()
A.都可以用電融合法或PEG融合法誘導(dǎo)融合
B.融合前都需要用纖維素酶和果膠酶處理細胞
C.兩者的原理都涉及細胞膜的結(jié)構(gòu)特點一流動性
D.前者主要是為了獲得細胞產(chǎn)品,后者主要是為了獲得雜種植株
答案B
解析動物細胞融合技術(shù)與植物體細胞雜交技術(shù)中,誘導(dǎo)細胞融合時都可以利用
電融合法或PEG融合法,A正確;動物細胞外沒有細胞壁,融合前不需要用纖維
素酶和果膠酶處理細胞,B錯誤;動物細胞融合利用了動物細胞膜的流動性,植
物體細胞雜交利用了植物細胞膜的流動性和植物細胞的全能性,C正確;動物細
胞融合技術(shù)主要是為了獲得細胞產(chǎn)品,植物體細胞雜交技術(shù)主要是為了獲得雜種
植株,D正確。
8.(2023?廣西南寧高二階段練習(xí))如圖是一種“生物導(dǎo)彈”的作用原理示意圖,沒
有與腫瘤細胞結(jié)合的“生物導(dǎo)彈”一段時間后被機體清除。阿霉素是一種抗腫瘤
藥,可抑制DNA和RNA的合成,對正常細胞也有一定毒性。下列說法錯誤的是
()
X單克隆抗體
腫瘤
堿性磷酸酶細胞
堿性磷酸酶
生物導(dǎo)彈非活化磷
酸阿霉素阿霉素
A.單克隆抗體是由雜交瘤細胞合成和分泌的
B.活化阿霉素能抑制細胞中的DNA復(fù)制和轉(zhuǎn)錄過程
C.在治療中,應(yīng)先注射非活化磷酸阿霉素再注射生物導(dǎo)彈
D.單克隆抗體特異性強,能減輕阿霉素對正常細胞的傷害
答案C
解析根據(jù)題意可知,“阿霉素可抑制DNA和RNA的合成”,因此活化阿霉素
能抑制細胞中的DNA復(fù)制和轉(zhuǎn)錄過程,B正確;在治療中,應(yīng)將非活化磷酸阿
霉素和生物導(dǎo)彈同時注射,單克隆抗體能與腫瘤細胞特異性結(jié)合,而堿性磷酸酶
能將非活化磷酸阿霉素轉(zhuǎn)化成活化阿霉素,進而治療癌癥,C錯誤;單克隆抗體
特異性強,使阿霉素能定位殺死腫瘤細胞,從而減輕阿霉素對正常細胞的傷害,
D正確。
9.(2023?河北衡水中學(xué)高二檢測)雙特異性單克隆抗體是指可同時與癌細胞和藥物
結(jié)合的特異性抗體。下圖是科學(xué)家設(shè)計的生產(chǎn)能同時識別癌胚抗原和長春堿(一種
抗癌藥物)的雙特異性單克隆抗體的部分過程。相關(guān)敘述錯誤的是()
③④
注射長春堿
骨髓瘤細胞
提取雙特異性
單克隆抗體-
A.單克隆抗體的制備需要用到動物細胞融合和動物細胞培養(yǎng)技術(shù)
B.該過程需要多次篩選,才可篩選出單克隆雜交一雜交瘤細胞
C.過程⑤的目的與過程①的目的不同
D.通過該技術(shù)合成的雙特異性單克隆抗體的靈敏度更高
答案C
解析制備單克隆抗體過程中需要骨髓瘤細胞和B淋巴細胞融合形成雜交瘤細胞
和培養(yǎng)雜交瘤細胞,A正確;該過程需要多次篩選,第一次篩選是過程③,篩選
出初次免疫的B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合得到的雜交瘤細胞;第二次篩選是過
程④,篩選出能產(chǎn)生所需抗體的單克隆雜交瘤細胞;第三次篩選是過程⑥,篩選
出再次免疫的B淋巴細胞和單克隆雜交瘤細胞融合得到的單克隆雜交一雜交瘤細
胞;第四次篩選是過程⑦,篩選出能產(chǎn)生雙特異性單克隆抗體的單克隆雜交一雜
交瘤細胞,B正確;過程⑤與過程①均是對小鼠注射特定抗原,目的相同,都是
獲得相應(yīng)的B淋巴細胞,C錯誤;該雙特異性單克隆抗體能同時識別癌胚抗原和
長春堿(一種抗癌藥物),故通過該技術(shù)合成的雙特異性單克隆抗體的靈敏度更高,
D正確。
10.(多選)下列有關(guān)單克隆抗體制備及其應(yīng)用的敘述,錯誤的是()
A.利用“生物導(dǎo)彈”治療癌癥就是利用單克隆抗體殺死癌細胞
B.需要從雜交瘤細胞中篩選出能產(chǎn)生所需抗體的細胞
C.雜交瘤細胞的培養(yǎng)只能在體內(nèi)進行
D.制備單克隆抗體運用的技術(shù)有動物細胞融合和動物細胞培養(yǎng)
答案AC
解析利用“生物導(dǎo)彈”治療癌癥,是將藥物與能特異性識別腫瘤抗原的單克隆
抗體結(jié)合,注入體內(nèi),借助單克隆抗體的導(dǎo)向作用,將藥物定向帶到癌細胞所在
位置,在原位殺死癌細胞,A錯誤;每種雜交瘤細胞只能分泌一種特異性抗體,
因此需要從雜交瘤細胞中篩選出能產(chǎn)生所需抗體的細胞,B正確;篩選出的雜交
瘤細胞可以在體外進行大規(guī)模培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖,即其培養(yǎng)可以通過
體外和體內(nèi)兩種途徑,C錯誤;制備單克隆抗體運用的技術(shù)有動物細胞融合和動
物細胞培養(yǎng),D正確。
11.(多選)(2023?江蘇蘇州高二檢測清蒿素主要用于惡性瘧疾的癥狀控制以及耐氯
喳蟲株的治療。為了快速檢測青蒿素,科研人員利用細胞工程技術(shù)制備了抗青蒿
素的單克隆抗體,其基本操作過程如下圖。以下有關(guān)敘述正確的是()
給小鼠注射細胞甲抗青
蒿素
②③④的單
結(jié)合抗原克隆
細胞乙細胞丙細胞丁抗體
①
小鼠喟?髓瘤細胞
A.過程②體現(xiàn)了細胞膜的流動性,過程⑤若在體內(nèi)進行則操作更簡單
B.過程③常使用選擇培養(yǎng)基,過程④常使用抗原一抗體雜交技術(shù)
C.若細胞乙均由細胞兩兩融合而成,則細胞乙、丙、丁在相同分裂期時染色體組
數(shù)相同
D.骨髓瘤細胞通常是從小鼠脾臟中提取的,其表面糖蛋白減少,培養(yǎng)時失去接觸
抑制
答案ABC
解析過程②為將具有免疫能力的B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合,體現(xiàn)了細胞膜
的流動性;過程⑤為提取單克隆抗體,若在體內(nèi)進行(可從小鼠腹水中提取),則
操作更簡單,A正確;過程③是篩選雜交瘤細胞,常使用選擇培養(yǎng)基;過程④用
抗體檢測和克隆化培養(yǎng)得到大量能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞,常使用抗原一抗
體雜交技術(shù),B正確;因細胞甲和骨髓瘤細胞均來源于小鼠,若細胞乙均由細胞
兩兩融合而成,則細胞乙和經(jīng)篩選后的細胞丙、丁在相同分裂期時的染色體組數(shù)
相同,C正確;骨髓瘤細胞是從小鼠的骨髓中提取的,脾臟中無骨髓瘤細胞,D
錯誤。
12.(多選)(2023?山東濟寧高二檢測)將特定藥物與單克隆抗體相結(jié)合制成的“生物
導(dǎo)彈”,能夠用于殺死人類某些癌細胞,其過程如下圖所示。下列有關(guān)敘述正確
的是()
免疫后抗癌藥物
結(jié)
脾臟中1?癌
的細胞①雜交瘤②單克隆里“生物細
細胞抗體一導(dǎo)彈”胞
骨髓瘤-
細胞
A.①過程的原理和植物原生質(zhì)體融合的原理基本相同
B.經(jīng)①過程形成的雜交瘤細胞都能無限增殖并產(chǎn)生特定抗體
C.②過程需要篩選并克隆單個雜交瘤細胞
D.抗體的靶向作用使③過程具有高度特異性
答案ACD
解析①過程的原理和植物原生質(zhì)體融合的原理基本相同,都是細胞膜的流動性,
A正確;經(jīng)①過程形成的雜交瘤細胞不一定都能產(chǎn)生特定抗體,需要經(jīng)過抗體陽
性檢測篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞,B錯誤;②過程需要采用抗體陽性
檢測篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞,然后進行克隆化培養(yǎng)(包括體內(nèi)培養(yǎng)和
體外培養(yǎng)),C正確;癌細胞是抗原,抗體能與抗原發(fā)生特異性結(jié)合,因此,抗體
的靶向作用使③過程具有高度特異性,D正確。
13.如圖為細胞融合的簡略過程,請據(jù)圖回答問題:
M回
X
Cp
甲
(1)植物細胞工程常用的技術(shù)手段有;動物細胞工程的
各技術(shù)手段的基礎(chǔ)是。
(2)若圖中甲、乙是植物細胞,在細胞融合之前應(yīng)用處
理,除去_____________;甲細胞、乙細胞到丙細胞的過程中,常用的化學(xué)法是
;融合完成的標志是o
(3)與植物細胞相比,動物細胞融合特有的方法是。
(4)若利用動物細胞融合技術(shù)來生產(chǎn)單克隆抗體,應(yīng)將和進行融
合,融合后需經(jīng)多次篩選,以得到能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞,第一次篩選一
般利用進行,第二次篩選需對細胞進行反復(fù)的培養(yǎng)和
檢測,以篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞。
⑸生產(chǎn)少量單克隆抗體時,可將篩選得到的雜交瘤細胞注射到小鼠腹腔內(nèi)繁殖,
該方法的優(yōu)點是____________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________O
答案(1)植物組織培養(yǎng)、植物體細胞雜交動物細胞培養(yǎng)(2)纖維素酶和果膠酶
細胞壁聚乙二醇(PEG)融合法再生出新的細胞壁(3)滅活病毒誘導(dǎo)法(4)經(jīng)
免疫的B淋巴細胞骨髓瘤細胞選擇培養(yǎng)基克隆化抗體(5)操作簡便,成
本低,易于控制培養(yǎng)條件等
14.(2023?山東濰坊高二檢測)下圖為制備單克隆抗體和多克隆抗體的示意圖,據(jù)圖
回答下列問題:
多克隆抗體單克隆抗體
(1)圖中向小鼠注射包含多種抗原決定簇的抗原后,所獲得的免疫抗血清實際上是
含有(填寫抗體的名稱)的混合物,這種方法制備的多克隆抗體
不僅產(chǎn)量低、純度低。與多克隆抗體相比,單克隆抗體突出的優(yōu)點是
________________,并能大量制備。
⑵圖中選用B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合成雜交瘤細胞,說明細胞膜具有
.,如果僅考慮細胞的兩兩融合,其融合細胞有
種類型(不考慮B淋巴細胞種類)。
(3)圖中兩次篩選的目的不同,其中篩選①的目的是篩選出___________,篩選②
的目的是篩選出________________________。篩選時所用的培養(yǎng)基是特定的
________培養(yǎng)基。
(4)科學(xué)工作者正在研究的治療癌癥使用的
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