1研究背景及意義不同產(chǎn)地的蜂蜜所富含的營養(yǎng)成分不同，其商品價值也存在巨大差異[1-2]，導(dǎo)致蜂蜜制假、摻假、冒充產(chǎn)地等違法行為層出不窮。因此，解決蜂蜜原產(chǎn)地制假售假等問題，已刻不容緩[3-5]。現(xiàn)今，蜂蜜產(chǎn)地多樣、復(fù)雜，傳統(tǒng)產(chǎn)地鑒別手段已具有十分明顯的局限性。本文基于穩(wěn)定同位素分析技術(shù)，并采用主成分分析（PCA）、線性判別分析（LDA）、偏最小二乘判別分析（PLS-DA），計算整體鑒別率，以評價該方法在蜂蜜產(chǎn)地鑒別實踐中的可行性。2基于穩(wěn)定同位素分析技術(shù)的蜂蜜產(chǎn)地鑒別研究2.1材料與試劑（1）蜂蜜樣品。分別采自云南、廣西、陜西、河北、河南、黑龍江6個省份，每個省份采集20份，總計120份。樣本均從當?shù)胤滢r(nóng)處直接購買，采集后將其放置在4℃條件下保存。（2）試劑。穩(wěn)定碳同位素參照標準物質(zhì)［IAEACH6（δ13C：-10.4‰）］，英國SerCon公司；二氧化碳氣體（純度≥99.999%），中國標準物質(zhì)中心；氦氣（純度≥99.999%），北京市亞南氣體有限公司；氮氣（純度≥99.999%），北京北分氣體工業(yè)有限公司；二氧化硫氣體（純度≥99.999%），北京北分氣體工業(yè)有限公司；鎢酸鈉（Na2WO4·2H2O）和濃硫酸（優(yōu)級純），北京國藥集團化學試劑有限公司；水[GB/T6682—2008（28）規(guī)定的一級水]。2.2儀器與設(shè)備穩(wěn)定同位素比值質(zhì)譜儀Sercon20-22，英國Sercon公司；液相色譜串聯(lián)同位素質(zhì)譜儀DeltaVPlus，美國ThermoFisher公司；元素分析儀EAGSL，英國Sercon公司；超純水制備儀Milli-QG，美國Millipore公司；恒溫水浴箱德國TW20，Julabo公司；臺式離心機HeraeusMultifugeX3R，美國ThermoScientific公司；烘箱UT20，美國Thermo公司；微量取樣器，德國Eppendorf公司；尼龍濾膜0.22μL，天津津騰公司。2.3結(jié)果與分析2.3.1不同產(chǎn)地蜂蜜穩(wěn)定碳同位素指紋利用EA-IRMS和LC-IRMS，測定云南（YN）、廣西（GX）、河北（HB）、河南（HN）、陜西（SX）、黑龍江（HLJ）6省份蜂蜜中碳同位素比值，結(jié)果見表1。蜂蜜中δ13C（Protein）值范圍比δ13C（Honey）值的范圍窄，與李沈軼等[5]研究結(jié)果相同。表16省份蜂蜜中碳同位素比值表2.3.2主成分分析對測定的5種δ13C數(shù)據(jù)進行PCA分析，僅提取了1種主成分，累積方差貢獻率達84.25%，結(jié)合PCA得分圖（圖1）得知，6個省份的樣品大部分區(qū)間重疊，分離效果較差。圖1基于穩(wěn)定同位素分析技術(shù)的蜂蜜PCA得分圖2.3.3線性判別分析對測定的6個省份的蜂蜜的δ13C數(shù)據(jù)進行線性判別分析，結(jié)果見表2。表2基于穩(wěn)定同位素分析技術(shù)的蜂蜜產(chǎn)地判別函數(shù)系數(shù)表建立基于穩(wěn)定同位素分析技術(shù)的蜂蜜產(chǎn)地訓練集和測試集，得到6省蜂蜜樣品預(yù)測準確率，測試集預(yù)測準確率3項指標，皆小于50%（見表3），表示該模型不具備預(yù)測有效性。表3基于穩(wěn)定同位素分析技術(shù)的蜂蜜產(chǎn)地測試集預(yù)測準確率表2.3.4偏最小二乘判別分析結(jié)合圖2、3可知，方程擬合效果較差。其中，δ13C（Protein）作為關(guān)鍵影響因子，可能與樣本的選擇有關(guān)。換言之，6個省份地理差異極大，從黑龍江到云南，幾乎跨越了整個中國，導(dǎo)致樣本中的蛋白質(zhì)含量產(chǎn)生特征性差異。圖2穩(wěn)定碳同位素指標VIP值圖圖3基于穩(wěn)定同位素分析技術(shù)的蜂蜜PLS-DA得分圖3結(jié)語本研究基于穩(wěn)定碳同位素，對6省蜂蜜進行產(chǎn)地鑒別，建立了產(chǎn)地鑒別模型，并采用IRMS測定了不同產(chǎn)區(qū)蜂蜜樣品中的5種碳穩(wěn)定同位素比值。結(jié)果表明，不同產(chǎn)區(qū)蜂蜜樣品存在顯著性差異（P＜0.05）。在此基礎(chǔ)上，本研究結(jié)合主成分分析（PCA）、線性判別分析（LDA）和偏最小二乘判別分析（PLS-DA），構(gòu)建了基于穩(wěn)定同位素分析技術(shù)的蜂蜜產(chǎn)地鑒別模型。結(jié)果顯示，PCA分析只提取了一個主成分，累積方差貢獻率為84.25%；LDA分析測試集預(yù)測準確率小于