金剛烷胺是一種廉價、高效的抗病毒藥物，曾用于禽流感的防治，但是過量使用金剛烷胺會對環境和人體產生嚴重危害[1]。氟蟲腈是一種廣譜殺蟲劑，曾在國內被廣泛使用，但氟蟲腈會通過生物鏈富集最終對人體健康產生威脅[2]。金剛烷胺和氟蟲腈的常用檢測方法有液相色譜法、液相色譜串聯質譜法、酶聯免疫法和免疫層析法等[2-3]。本文采用超高效液相色譜串聯質譜法檢測雞蛋中的金剛烷胺和氟蟲腈的含量，研究出同時提取雞蛋中金剛烷胺和氟蟲腈的前處理方法。1材料與方法1.1材料與儀器1.1.1樣品雞蛋，絞碎并均質，-18℃保存。1.1.2試劑乙腈（色譜級）、氯化鈉（分析純）、無水硫酸鈉（分析純）、金剛烷胺標準物質（Dr.EhrenstorferGmbH）、金剛烷胺-D6（上海安譜璀世標準技術服務有限公司）和4種氟蟲腈及其代謝物混標溶液（100μg·mL-1，FintStandard）。1.1.3儀器TSQvanquish超高效液相色譜-三重四極桿串聯質譜儀：配有電噴霧離子源；天平：感量為0.01g和0.00001g；渦旋混合器；振蕩器；離心機；QuEChERS凈化管（COQ01002型，深圳逗點生物科技有限公司）；0.22μm微孔有機相濾膜。1.2實驗方法1.2.1溶液的配制（1）金剛烷胺標準儲備液（100μg·mL-1）。精密稱取10mg標準物質用乙腈溶解并定容至100mL，-18℃保存。（2）金剛烷胺內標工作液（1μg·mL-1）。精密量取100μg·mL-1的金剛烷胺標準儲備液100μL用乙腈溶解并定容至10mL，-18℃保存。（3）混合標準工作液（1μg·mL-1）。準確吸取100μL金剛烷胺標準儲備液（100μg·mL-1）和4種氟蟲腈及其代謝物混標溶液（100μg·mL-1）用乙腈溶解并定容至10mL，-18℃保存。（4）標準溶液的配制。吸取混合標準工作液0.02mL、0.05mL、0.10mL、0.20mL、0.50mL、1.00mL和2.00mL于100mL容量瓶中，再分別加入金剛烷胺內標工作液0.50mL，用乙腈定容，配制成濃度為0.20ng·mL-1、0.50ng·mL-1、1.00ng·mL-1、2.00ng·mL-1、5.00ng·mL-1、10.00ng·mL-1和20.00ng·mL-1的系列標準溶液，含內標濃度為5.00ng·mL-1，供液相色譜-串聯質譜儀測定。1.2.2測定步驟①提取。稱取樣品5.00g（精確到0.01g）于50mL離心管中，加入100μL內標工作液，渦旋1min，加入20mL乙腈，2g氯化鈉，6g無水硫酸鈉，振蕩10min，8000r·min-1離心5min，取上清液，備用[4-6]。②凈化。取1mL備用液，加入QuEChERS凈化管，渦旋混勻1min，8000r·min-1離心3min，取上清液，過0.22μm微孔濾膜，供液相色譜-串聯質譜儀測定。將試樣溶液注入儀器中，以保留時間和離子豐度比雙重定性，以金剛烷胺與金剛烷胺-D6峰面積的比值帶入標準曲線定量，以氟蟲腈峰面積帶入標準曲線定量。1.3儀器條件1.3.1色譜條件（1）金剛烷胺色譜條件。色譜柱：BEHC18柱（2.1mm×50mm，1.7μm）；流動相：0.1%甲酸水溶液（A）+0.1%甲酸甲醇溶液（B）；梯度洗脫：0～0.50min，80%A+20%B；1.25～3.25min，15%A+85%B；4.00～5.00min，80%A+20%B；流速：0.2mL·min-1；柱溫：25℃；進樣量：2μL。（2）氟蟲腈色譜條件。色譜柱：BEHC18柱（2.1mm×50mm，1.7μm）；流動相：水（A）+乙腈（B）；梯度洗脫：0～0.5min，80%A+20%B；1.0～3.0min，5%A+95%B；3.5～5.0min，80%A+20%B；流速：0.25mL·min-1；柱溫：25℃；進樣量：2μL。1.3.2質譜條件電噴霧離子源，金剛烷胺為正離子掃描，氟蟲腈為負離子掃描，多反應監測方式；毛細管溫度：350℃；噴霧器溫度：350℃；鞘氣壓力：40Arb；輔助氣壓力：15Arb；噴霧電壓：3500V；監測離子對、碰撞氣能量和去簇電壓參數見表1。表1待測物定性離子對，定量離子對、碰撞能量、錐孔電壓參數表2結果與分析2.1質譜條件的優化質譜條件優化了待測物及對應內標物，提高了靈敏度，得到了最優離子對以及碰撞能（見表1）和離子色譜圖（見圖1）。圖1金剛烷胺離子對、氟蟲腈、金剛烷胺-D6離子對色譜圖2.2標準曲線和檢出限在1.3.2質譜條件下測定，結果表明金剛烷胺、氟蟲腈在0.20～20.00ng·mL-1有良好的線性關系。相關系數R均大于0.9990。本方法的金剛烷胺定量限為2μg·kg-1；氟蟲腈定量限為5μg·kg-1。金剛烷胺、氟蟲腈線性方程和相關系數見表2。表2金剛烷胺和氟蟲腈的線性方程和相關系數表2.3回收率以及精密度實驗準確稱取空白雞蛋樣品，加入混合中間工作液，分別添加濃度水平為2μg·kg-1、5μg·kg-1、20μg·kg-1的金剛烷胺、氟蟲腈溶液，進行6次平行實驗，計算加標回收率和精密度。由表3可知，樣品回收率在85.0%～103.3%，精密度在1.6%～8.9%。表3精密度和加標回