3T/CQSES**-202*基于環(huán)境DNA的長江水生生物監(jiān)測與完整性評價技術導則本文件規(guī)定了基于環(huán)境DNA技術對長江水生生物進行監(jiān)測和完整性評價的技術要求。本文件適用于在長江流域范圍內(nèi)，對水生生物進行監(jiān)測與生物完整性的評價，其他流域可參照使用。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T30989高通量基因測序技術規(guī)程GB/T35537高通量基因測序結(jié)果評價要求GB/T40226環(huán)境微生物宏基因組檢測高通量測序法HJ91.2地表水環(huán)境質(zhì)量監(jiān)測技術規(guī)范HJ1295水生態(tài)監(jiān)測技術指南河流水生生物監(jiān)測與評價（試行）HJ1296水生態(tài)監(jiān)測技術指南湖泊和水庫水生生物監(jiān)測與評價（試行）SL/T793河湖健康評估技術導則SN/T4278國境口岸醫(yī)學媒介昆蟲DNA條形碼鑒定操作規(guī)程T/CSES81淡水生物監(jiān)測環(huán)境DNA宏條形碼法3術語和定義下列術語和定義適用于本標準。3.1生物完整性biologicalintegrity生態(tài)系統(tǒng)具備支持和維護區(qū)域內(nèi)平衡的、完整的、自適應的生物群落的能力，生物群落具有與自然生境狀態(tài)相適應的物種組成、多樣性和功能組織。[來源：HJ1295—2023，3.6，有修改]4T/CQSES**-202*3.2環(huán)境DNAenvironmentalDNA環(huán)境樣品中發(fā)現(xiàn)的源自于許多不同生物的DNA復雜混合物，環(huán)境樣品包括土壤、沉積物、水或空氣等，樣品中含有完整細胞、游離DNA、甚至完整的生物體。3.3DNA條形碼DNAbarcode一種利用生物體細胞核或細胞器中特定的、標準的短DNA序列來快速鑒別和分類物種的分子工具，該序列具備種間變異性和種內(nèi)保守性。3.4通過PCR或文庫準備過程中為每個樣品添加一個短序列的核苷酸堿基對，允許多個樣品在一個高通量測序運行中被匯集。這個序列對于運行中的每個樣本都是不同的，并使序列能夠在測序后分配回它們來自的樣本。[來源：T/CSES81—2023，3.10]3.5操作分類單元operationaltaxonomicunit；OTU將測序得到的海量序列根據(jù)相似性聚類策略分組，獲得的在分子水平上表征物種的單元。[來源：DB11_T2358-2024，3.8，有修改]4技術流程基于環(huán)境DNA對長江水生生物進行監(jiān)測與完整性評價的技術流程見圖1。T/CQSES**-202*5基于環(huán)境DNA的長江水生生物監(jiān)測質(zhì)量控制與質(zhì)量保證質(zhì)量控制與質(zhì)量保證條形碼基因擴增高通量測序生物信息學分析長江水生生物完整性評價評價指標指標賦分方法評價步驟建立參照狀態(tài)確定指標參考值指標賦分浮游動物重點生物浮游動物重點生物魚類動物分級評價圖1基于環(huán)境DNA的長江水生生物監(jiān)測與完整性評價技術流程5基于環(huán)境DNA的長江水生生物監(jiān)測5.1環(huán)境DNA采樣5.1.1目標生物類群及采樣介質(zhì)監(jiān)測目標生物類群包括：魚類、大型底棲無脊椎動物、浮游動物和重點保護水生生物等，其常見采樣介質(zhì)及適用水體類型見表1。T/CQSES**-202*6表1監(jiān)測的目標水生生物類群及其環(huán)境DNA采樣介質(zhì)水生生物類群常用采樣介質(zhì)適用水體類型魚類水體河流、湖庫大型底棲無脊椎動物表層沉積物河流、淺水湖泊浮游動物水體湖泊重點保護水生生物根據(jù)棲息環(huán)境確定有重點保護水生生物分布的水體5.1.2采樣點位、頻次和時間5.1.2.1總體要求根據(jù)水文和污染等情況，避開死水區(qū)、回水區(qū)和排污口處，選取代表性點位取樣，并記錄采樣點位的環(huán)境狀況。在河口感潮河段，宜在退潮期采樣，并記錄采樣時的潮汐狀況。5.1.2.2采樣點位的布設可參考生態(tài)環(huán)境部公布的長江水生態(tài)考核水體（附錄A）或長江水生生物監(jiān)測點位（附錄B），也可根據(jù)需要自行確定。5.1.2.3采樣垂線的設置參照HJ91.2執(zhí)行，具體為：水面寬度≦50m時，采樣垂線數(shù)設為1條（中泓線）；50m<水面寬度≦100m時，采樣垂線數(shù)設為2條（左、右岸有明顯水流處水面寬度>100m時，采樣垂線數(shù)設為3條（左、中、右）。湖庫采樣不設斷面，對于無明顯功能區(qū)別的湖庫，可用網(wǎng)格法均勻設置采樣垂線，否則按水體類別針對不同水域分別設置采樣垂線。5.1.2.4采樣垂線上采樣點的設置參照HJ91.2執(zhí)行，具體為：水深≦5m時，設置1個采樣點（水面下0.5m,水深不足1m時，在1/2水深處）；5m<水深≦10m時，設置2個采樣點（水面下0.5m，水底上0.5m）;水深>10m時，設置3個采樣點（水面下0.5m，中層1/2水深處，水底上0.5m）。5.1.2.5采樣頻次依據(jù)研究或工作需要而定。5.1.2.6采樣時間可按水期、季節(jié)或?qū)嶋H研究需要等確定。5.1.3采樣方法5.1.3.1水樣a）采集方法。樣品采集時，使用清洗干凈的玻璃或不銹鋼采水器，在不同水體深度采集樣品，同時對采樣現(xiàn)場環(huán)境進行拍照記錄。T/CQSES**-202*7b）樣品過濾。樣品應現(xiàn)場過濾，或冷藏保存并于采樣后24小時內(nèi)過濾收集環(huán)境DNA。每個采樣點的樣品過濾前應對抽濾裝置清潔消毒（如，用大于1.5%次氯酸鈉消毒液浸泡抽濾裝置10min以上并洗凈，再用70%乙醇去除抽濾裝置的消毒液殘留）。對于比較干凈的水體，宜將一份水樣過濾于同一張濾膜（一般孔徑為0.45μm）；對于渾濁水樣可換多張濾膜過濾。每個樣品抽濾前，應采用相同體積的無菌水代替樣品進行過濾獲得濾膜，作為空白對照。c）水樣過濾體積。一般情況下，長江水體中環(huán)境DNA的水樣過濾體積宜為5L以上。d）渾濁樣品的處理。對于明顯渾濁的水樣，應放置于4℃靜置30min后取上層澄清水樣過濾。e）濾膜樣品的保存。過濾完成后，將濾膜樣品轉(zhuǎn)移至無菌離心管或凍存管中，置于液氮或干冰中冷凍運輸，或者置于保存溶液（無水乙醇或其他合適的保存劑）中運輸。需要長期保存的濾膜樣品置于-80℃保存。5.1.3.2沉積物樣品使用抓泥斗或其他便利工具，采集表層沉積物（0～5cm）50g（濕重）以上，剔除雜物及明顯的生物殘體后，收集至無菌離心管中，現(xiàn)場干冰保存。需要長期保存的樣品置于-80℃保存。5.2環(huán)境DNA提取5.2.1樣品預處理5.2.1.1濾膜樣品對于在保存劑中保存的濾膜樣品，在DNA提取之前需進行預處理。根據(jù)選擇的DNA提取方法，必要時以抽濾等方式先將保存劑（如乙醇）清洗干凈，然后將濾膜剪碎，再利用研磨珠和裂解液將濾膜振蕩破碎。5.2.1.2沉積物樣品將樣品均質(zhì)后冷凍干燥并混勻。5.2.2DNA提取根據(jù)采樣介質(zhì)不同，可選擇適宜的DNA提取試劑盒，按照試劑盒的使用說明書提取環(huán)境DNA。常見的DNA提取方法包括苯酚氯仿抽提法、離心柱法或磁珠法等，可參見常規(guī)分子生物學實驗方法或參照GB/T40226。T/CQSES**-202*85.2.3DNA質(zhì)量檢測DNA提取后，應對其濃度和質(zhì)量進行檢測。一般用于后續(xù)擴增實驗的樣本DNA濃度應不低于1ng/μL，最佳濃度范圍為10ng/μL以上。DNA樣品在230nm、260nm和280nm處的吸光度比值應符合以下要求：OD260/280應在1.7～2.0之間，OD260/230應大于2.0。5.2.4DNA樣品保存提取后的環(huán)境DNA樣品分裝保存于-80℃,避免反復凍融。5.3條形碼基因擴增5.3.1擴增引物的確定針對不同的水生生物類群或重點保護水生生物，選擇特異性的一對或多對引物對目標類群的條形碼基因進行擴增。推薦引物可參照T/CSES81—2023或相關文獻報道。對于旗艦物種中華鱘和長江江豚，可參照附錄C的特異性引物及擴增方式進行擴增，其他旗艦物種條形碼基因的擴增可參考相關文獻。5.3.2索引的添加針對大批量樣品的擴增，可在引物序列前添加索引（一般6～8bp）以區(qū)分樣品。5.3.3基因擴增5.3.3.1PCR反應體系各組分濃度和體積參照PCR反應試劑盒使用說明書，并可根據(jù)實驗情況進行調(diào)整，剩余體積用滅菌超純水補齊。5.3.3.2PCR反應程序PCR反應程序的一般設置為：95℃預變性5min；95℃變性30s，53℃退火30s，72℃延伸45s，行35個循環(huán)；然后，72℃延伸10min。實驗過程中可根據(jù)具體情況進行調(diào)整。5.3.3.3陰性和陽性對照分別以滅菌超純水和含有目的片段的DNA作為PCR擴增的陰性和陽性對照。5.3.3.4擴增產(chǎn)物的檢測用1%～2%的瓊脂糖凝膠電泳檢測擴增產(chǎn)物，結(jié)果應呈現(xiàn)單一清晰明亮、無拖尾的條帶，且擴增產(chǎn)物的分子量應符合預期。對于單一生物的條形碼基因擴增產(chǎn)物，可通過測序鑒定擴增產(chǎn)物是否正確。若電泳檢測顯示樣品出現(xiàn)非目的條帶，可參照SN/T4278的規(guī)定對擴增產(chǎn)物進行純化。用DNA濃度分光光度計檢測擴增產(chǎn)物的濃度，并保存于-20℃或以下溫度條件。T/CQSES**-202*95.4高通量測序5.4.1文庫構(gòu)建5.4.1.1混庫對于大批量樣品，可將已經(jīng)在PCR擴增時添加了索引的同一個引物的PCR擴增產(chǎn)物進行等比例混庫，混庫體積應大于200μL。混庫后對樣品行瓊脂糖凝膠電泳，確定目的條帶位置符合預期。5.4.1.2末端處理選擇相關的試劑盒，按照試劑盒使用說明書進行操作，將混庫產(chǎn)物中的DNA末端補平，并在5’段進行磷酸化和3端添加dA尾，以產(chǎn)生黏性末端。5.4.1.3接頭連接使用相關試劑盒，按照試劑盒使用說明書進行操作，給末端處理產(chǎn)物添加接頭。連接時一般推薦的接頭和末端處理產(chǎn)物的摩爾比在10：1-200：1之間，具體依據(jù)試劑盒說明書確定。對接頭連接產(chǎn)物進行磁珠純化，去除多余接頭。5.4.1.4.文庫擴增根據(jù)實際需求可對文庫進行擴增，以增加文庫濃度，提高文庫質(zhì)量。5.4.1.5文庫質(zhì)檢對文庫長度分布和濃度進行檢測，評價文庫質(zhì)量。利用電泳檢測文庫長度，確保長度符合預期。利用Qubit等方法檢測文庫濃度，一般要求最低濃度應達到1~3ng/μL。5.4.2高通量測序?qū)τ谫|(zhì)檢合格的文庫，按照GB/T30989和GB/T35537的規(guī)定進行高通量測序，每個樣本的預期序列數(shù)應不低于30000條，可根據(jù)具體情況調(diào)整。5.5生物信息學分析5.5.1下機數(shù)據(jù)預處理與數(shù)據(jù)清洗a）根據(jù)樣本索引將序列分配于不同樣本中；b）合并雙端測序的序列，并去除測序接頭、樣本索引和引物序列；c）基于滑動窗口法修剪去除低質(zhì)量堿基，窗口內(nèi)堿基平均質(zhì)量一般要求>Q20；d）去除序列長度過短（一般<50bp）的Reads。e）識別并去除嵌合體序列；T/CQSES**-202*f）剔除陰性對照中的污染序列。5.5.2構(gòu)建OTUa）序列去重后，將相似性≥97%的序列聚類成OTU；b）識別與OTU內(nèi)其他序列平均距離最小的序列作為代表性序列，并檢測去除代表性序列中可能的嵌合體序列；c）將測序得到的序列比對到每個OTU的代表性序列，獲得每個OTU在每個樣品中的序列數(shù)；d）對于非稀有物種的一般性檢測，去除低豐度（一般總序列數(shù)為1～5）的OTU。5.5.3物種注釋與統(tǒng)計a）根據(jù)目標基因和擴增區(qū)域，選擇合適的條形碼基因數(shù)據(jù)庫，如SLIVA數(shù)據(jù)庫（常用于16S/18SrRNA基因序列比對）、BOLD數(shù)據(jù)庫（常用于COI基因序列比對）、Mitofish數(shù)據(jù)庫（常用于12S基因序列比對）；b）將OTU序列與數(shù)據(jù)庫中的信息進行比對分析，綜合考慮置信度得分（一般≥0.7）、序列一致性（一般≥97%）、比對覆蓋度（一般≥80%）和E值（一般≤1e-5）等，確定物種注釋信息；c）物種注釋結(jié)果需進行人工校驗，綜合考慮選用的條形碼片段、參考數(shù)據(jù)庫的完整性、物種棲息環(huán)境等，結(jié)合專家經(jīng)驗謹慎確定，盡可能減少不確定性；d）每個樣本的OTU統(tǒng)計表由OTU名稱、序列、物種注釋信息、序列數(shù)和序列相對豐度組成，每個點位檢出的OTU相對豐度為所有生物重復樣本的平均值。e）每個樣品宜保留序列相對豐度＞0.01%的分子分類單元，且某個OTU在某一點位的生物重復樣品中檢出率不應低于2/3，否則應舍棄。5.6質(zhì)量控制與保證5.6.1質(zhì)量控制a）在樣品采集、DNA提取、條形碼基因擴增和測序階段應分別設置陰性對照（無菌水）和陽性對照（已知物種組成的樣本、特定物種樣本或測序?qū)φ赵噭籦）每個采樣點位應采集不少于3個重復樣本，也可以在實驗過程中設置3個技術重復；c）對于同一批實驗數(shù)據(jù)，生物信息學分析流程及過濾等參數(shù)設置應保持一致；d）對于混合群落的宏條形碼，注釋物種的假陽性率和假陰性率均不應超過10%；T/CQSES**-202*e）對于特定物種的條形碼，如果出現(xiàn)假陰性，需要重新優(yōu)化實驗流程；如果出現(xiàn)假陽性，除優(yōu)化實驗流程外，如果是針對特定物種，也可以通過測序進行鑒別，如果能夠區(qū)分則可以接受。5.6.2質(zhì)量保證a）所有采樣工作遵循標準化采樣流程，使用無菌技術采集樣品，避免樣品間交叉污染。樣品保存與運輸應符合其環(huán)境特需性；b）實驗場所應滿足分子生物學實驗室的各項條件，實驗前應對實驗室環(huán)境消毒滅菌，避免污染和交叉污染；c）每個樣品應具備其特定編號，原始數(shù)據(jù)應歸檔保存，確保數(shù)據(jù)的可溯性。6長江水生生物完整性評價6.1評價指標采用生物完整性指數(shù)（IBI）的方式進行評價，計算各生物類群IBI指數(shù)包括的評價指標，以及適用的水體類型見表2。6.2指標賦分方法根據(jù)評價指標的不同，分別利用比值法和偏離度法進行賦分，具體見表2。表2長江水生生物類群完整性評價指標、賦分方法及適用水體類型序號監(jiān)測對象評價指標賦分方法適用水體類型1魚類種類數(shù)河流、湖泊、水庫優(yōu)勢科偏離度法2大型底棲無脊椎動物種類數(shù)河流、淺水湖泊優(yōu)勢種偏離度法3浮游動物多樣性湖泊4重點保護水生生物種類數(shù)有重點保護水生生物分布的水體6.3評價步驟6.3.1建立參照狀態(tài)從人類活動干擾強度、河湖/庫的物理形態(tài)結(jié)構(gòu)，以及水環(huán)境質(zhì)量等方面進行評估和篩選，確定未受或少受人類活動干擾的參照點位，具體參照SL/T793—2020執(zhí)行；無法獲得T/CQSES**-202*參照點位時，可采用最優(yōu)狀態(tài)法或歷史數(shù)據(jù)法等確定參照狀態(tài)，具體參照HJ1295—2023執(zhí)6.3.2確定指標參考值指標參考值按照優(yōu)先度取參照點位的實測平均值，或參照狀態(tài)計算值，或?qū)＜以u判的理想狀態(tài)。對于重點保護水生生物種類數(shù)指標，以國家公布的期望值（附錄A）作為參考值。6.3.3指標賦分6.3.3.1魚類a）對于魚類種類數(shù)指標，采用比值法賦分。首先按照式（1）計算比值：魚類種類數(shù)比值=魚類種類監(jiān)測值/魚類種類參考值（1）獲得比值后，再按照表3中的賦分標準對指標進行賦分：表3魚類種類數(shù)指標賦分標準賦分0204060(50%,60%](60%,70%](70%,80%](80%,90%]>90%b）對于魚類優(yōu)勢科指標，采用偏離度法賦分。首先按照式（2）和（3）計算偏離度：魚類優(yōu)勢科種類比例=魚類前2位優(yōu)勢科種類數(shù)/魚類總種類數(shù)（2）魚類優(yōu)勢科種類比例監(jiān)測值-魚類優(yōu)勢科種類比例參考值偏離度=魚類優(yōu)勢科種類比例監(jiān)測值-魚類優(yōu)勢科種類比例參考值魚類優(yōu)勢科種類比例參考值獲得偏離度值后，再按照表4中的賦分標準對指標進行賦分：表4魚類優(yōu)勢科指標賦分標準賦分0204060偏離度≥25%(20%,25%](15%,20%](10%,15%](5%,10%]c）取魚類種類數(shù)和魚類優(yōu)勢科種類比例兩項指標中得分較低者值作為魚類完整性指數(shù)的得分。6.3.3.2大型底棲無脊椎動物a）對于大型底棲無脊椎動物種類數(shù)指標，采用比值法賦分。首先按照式（4）計算比值：獲得比值后，再按照表5中的賦分標準對指標進行賦分：T/CQSES**-202*表5大型底棲無脊椎動物種類數(shù)指標賦分標準賦分0204060(20%,30%](30%,40%](40%,60%](60%,80%]>80%b）對于大型底棲無脊椎動物優(yōu)勢種指標，采用偏離度法賦分。首先按照式（5）計算物種優(yōu)勢度，判定優(yōu)勢種，然后按照式（6）和（7）計算偏離度：Y=(ni/N)×fi（5）式中，Y為物種優(yōu)勢度；ni為物種i的個體數(shù)；N為物種的總個體數(shù)，fi為出現(xiàn)頻率。Y值＞0.02的物種判定為優(yōu)勢種。底棲動物優(yōu)勢種個體比例=底數(shù)（6）底棲動物優(yōu)勢種個體比例監(jiān)測值-底棲動物優(yōu)勢種個體比例參考值偏離度=底棲動物優(yōu)勢種個體比例監(jiān)測值-底棲動物優(yōu)勢種個體比例參考值底棲動物優(yōu)勢種給體比例參考值獲得偏離度值后，再按照表6中的賦分標準對指標進行賦分：表6大型底棲無脊椎動物優(yōu)勢種指標賦分標準賦分0204060偏離度≥24%(20%,24%](16%,20%](12%,16%](8%,12%]c）取大型底棲無脊椎動物種類數(shù)和優(yōu)勢種個體比例兩項指標中得分較低者值作為大型底棲無脊椎動物完整性指數(shù)的得分。6.3.3.3浮游動物以香農(nóng)多樣性指數(shù)表征浮游動物完整性，采用比值法賦分。首先按式（8）計算浮游動物的香農(nóng)多樣性指數(shù)，然后按式（9）計算比值：（8）式中，Pi為第i種浮游動物的密度（傳統(tǒng)監(jiān)測）或OTU數(shù)量（環(huán)境DNA監(jiān)測）百分比，S為評價點位浮游動物的總物種數(shù)。浮游動物多樣性比值=（9）獲得比值后，再按照表7中的賦分標準對指標進行賦分，即為浮游動物完整性指數(shù)的得T/CQSES**-202*表7浮游動物多樣性指標賦分標準賦分0204060(50%,60%](60%,70%](70%,80%](80%,90%]>90%6.3.3.4重點保護水生生物以重點保護水生生物（國家I級和II級重點保護水生生物）種類數(shù)表征其完整性，采用比值法賦分。首先按照式（10）計算比值：重點保護水生生物種類數(shù)比值=（10）獲得比值后，再按照表8中的賦分標準對指標進行賦分，即為重點保護水生生物完整性指數(shù)的得分。表8重點保護水生生物種類數(shù)指標賦分標準賦分0204060(30%,40%](40%,50%](50%,60%](60%,80%]>80%6.3.4水生生物完整性指數(shù)最終得分針對某一評價點位，計算魚類、大型底棲無脊椎動物、浮游動物和重點保護水生生物完整性指數(shù)得分的平均值，作為該點位水生生物完整性指數(shù)的最終得分。6.3.5分級評價根據(jù)完整性指數(shù)最終得分情況，按照表9中的分級標準對評價點位的水生生物完整性進行分級評價。表9水生生物完整性評價等級劃分等級優(yōu)良中差劣分值>80[80,60)[60,40)[40,20)T/CQSES**-202*附錄A（資料性）長江水生態(tài)考核試點水體名單及重點保護水生生物期望值序號省份水體類型水體重點保護水生生物物種數(shù)1青海河流長江干流（青海）32長江干流（四川）3赤水河（四川）4岷江5嘉陵江（四川）6沱江7雅礱江8西藏長江干流（西藏）59云南長江干流（云南）云南赤水河（云南）7重慶長江干流（重慶）重慶嘉陵江（重慶）重慶烏江（重慶）貴州赤水河（貴州）9貴州烏江（貴州）貴州清水江甘肅7甘肅嘉陵江（甘肅）湖北長江干流（湖北）湖北漢江（湖北）湖南長江干流（湖南）湖南湘江湖南資江3T/CQSES**-202*序號省份水體類型水體重點保護水生生物物種數(shù)湖南河流沅江湖南澧水5江西長江干流（江西）江西贛江9漢江（陜西）嘉陵江（陜西）河南丹江（河南）/廣西湘江西源/安徽長江干流（安徽）江蘇長江干流（江蘇）浙江東苕溪1浙江西苕溪1上海長江干流（上海）上海黃浦江3云南湖泊滇池6貴州草海/40湖北洪湖/41湖南洞庭湖42江西鄱陽湖643安徽巢湖/44江蘇太湖/45江蘇淀山湖—元蕩（江蘇）/46上海淀山湖—元蕩（上海）/47重慶水庫三峽水庫（重慶）948湖北三峽水庫（湖北）9T/CQSES**-202*序號省份水體類型水體重點保護水生生物物種數(shù)49湖北水庫丹江口水庫（湖北）5河南丹江口水庫（河南）5T/CQSES**-202*附錄B（資料性）長江流域水生生物監(jiān)測位點清單序號點位名稱經(jīng)度緯度水體類型1直門達97.248133.0219河流2通天河大橋95.826634.0358河流3庚卓如瓦96.962233.3438河流4洛須鎮(zhèn)溫托村98.997529.7111河流5江達具鄧科鄉(xiāng)97.981132.4644河流6江達縣波羅鄉(xiāng)98.602031.1879河流7金江橋26.1838河流8五孫廟26.5654河流9金沙江樹底橋27.0058河流龍洞26.5384河流新華99.958326.9331河流三塊石28.6317河流倒流子28.4728河流黃沙坡28.6469河流洗白27.4996河流岔河渡口27.7147河流洛甸河水文站27.6859河流金沙江崗托橋98.596731.6178河流倮果26.6010河流石門子28.7406河流水磨溝村99.055029.9381河流掛弓山28.7815河流T/CQSES**-202*序號點位名稱經(jīng)度緯度水體類型江南鎮(zhèn)沙嘴上28.7849河流納溪大渡口(左岸)28.7488河流手爬巖28.8950河流沙溪口28.8813河流蒙姑26.5719河流賀龍橋99.389228.1706河流拉鯡26.3652河流渭門橋31.7589河流鎮(zhèn)平鄉(xiāng)32.1636河流悅來渡口29.7273河流岷江青衣壩29.4974河流涼姜溝28.7799河流彭山岷江大橋30.2114河流岷江東青交界29.9044河流映秀31.0456河流岳店子下30.3575河流河口渡口29.1419河流40月波29.0423河流41雅礱江口26.6120河流42雅江縣城上游29.2033河流43呷拉鄉(xiāng)雅礱江99.978831.6115河流44柏枝沙灘27.1095河流45長須干馬鄉(xiāng)99.006132.7519河流46沙溪(底)31.6200河流T/CQSES**-202*序號點位名稱經(jīng)度緯度水體類型47金溪電站31.1572河流48上石盤32.3890河流49金子30.2134河流烈面30.5035河流元西村32.5368河流伍嘉碼頭30.9585河流新政電站31.3108河流小渡口30.7336河流麻柳包31.4010河流醒覺溪28.8045河流宏緣30.6033河流拱城鋪渡口30.0608河流大磨子28.9678河流李家灣29.1044河流老翁橋29.2658河流銀山鎮(zhèn)29.6872河流幸福村(河東元壩)29.9614河流腳仙村29.4413河流沱江大橋(底)28.8849河流和尚山29.5076河流江津大橋29.2670河流寸灘29.6180河流豐收壩29.3949河流沙溪鎮(zhèn)29.7129河流T/CQSES**-202*序號點位名稱經(jīng)度緯度水體類型北溫泉29.8368河流井口(嘉陵江右岸)29.6633河流大溪溝29.5705河流梁沱(左岸)29.6012河流長江涪陵菜場沱29.7115河流麻柳嘴29.5955河流鑼鷹29.3867河流江口鎮(zhèn)爛泥坨29.2818河流鹿角29.1333河流大關橋26.8673河流六廣27.0067河流烏江下五龍27.3012河流大烏江鎮(zhèn)27.4009河流烏楊樹27.9969河流沿河28.6225河流清池27.7390河流黃歧坳27.7817河流茅臺27.8603河流九龍囤28.2917河流鰱魚溪28.6078河流茶園岔河26.3604河流興仁橋26.3247河流下司26.4944河流旁海26.7482河流T/CQSES**-202*序號點位名稱經(jīng)度緯度水體類型茅坪26.7476河流崔家25.5236河流大沖口25.7272河流大源屋26.0130河流白果村26.2509河流白龍江兩河口橋33.6975河流姚渡32.7865河流洛大33.9797河流固水子村33.3280河流33.6034河流站兒巷33.7820河流烈金壩33.0438河流老君關32.7156河流黃金峽33.1934河流南柳渡33.1118河流蘭灘32.8794河流八廟溝32.8315河流魯光坪33.3117河流黃牛鋪34.1950河流灶火庵33.9021河流鳳州33.9567河流淅川史家灣33.0805河流荊紫關丹江河橋33.2533河流寺灣鎮(zhèn)丹江河橋33.1605河流T/CQSES**-202*序號點位名稱經(jīng)度緯度水體類型沈灣32.4650河流白家灣32.0584河流仙人渡32.2259河流陳家坡32.8046河流羅漢閘30.6898河流皇莊31.1851河流黑流渡30.5411河流轉(zhuǎn)斗31.4598河流余家湖31.9142河流漢南村30.4045河流石到30.4183河流小河30.6805河流石牌港30.9930河流岳口30.5010河流宗關30.5772河流云池(白洋)30.4310河流調(diào)關29.6982河流柳口29.9714河流磚瓦廠30.2848河流觀音寺30.2322河流荊江口29.4664河流南津關30.7687河流白滸山30.5484河流紗帽30.3083河流T/CQSES**-202*序號點位名稱經(jīng)度緯度水體類型黃蓋湖鎮(zhèn)右29.8661河流中官鋪29.8443河流風波港(右岸)30.2143河流劉佐(左岸)29.8233河流燕磯30.4067河流桑植打鼓泉渡口29.4551河流永定澄潭(區(qū)水廠)29.1253河流張公廟29.6008河流澧水三江口29.5884河流窯坡渡29.5937河流永定潭口29.1897河流沙河口29.2600河流大夫廟26.2790河流港子口26.5032河流歸陽鎮(zhèn)26.5371河流新塘鋪26.7780河流城北水廠26.9122河流魚石村26.9792河流樟樹港28.5686河流熬洲27.3281河流桔子洲28.1678河流昭山27.9720河流馬家河27.8489河流諸葛廟26.2068河流T/CQSES**-202*序號點位名稱經(jīng)度緯度水體類型五強溪28.7746河流浦市上游28.0852河流陳家河(四水廠)28.9848河流武水匯合口28.2866河流侯家淇28.4107河流27.1486河流坡頭28.9130河流城陵磯(右岸)29.4833河流天字一號29.6978河流陸城29.6083河流江南鎮(zhèn)29.7631河流君山長江取水口29.4825河流桂花渡水廠27.2074河流桃谷山28.5419河流球溪27.6024河流萬家嘴28.6168河流新化水廠27.7194河流曬谷灘電站27.3300河流坪口28.0478河流臨資口28.7000河流瓦石磯28.7139河流株溪口28.3986河流新廟前25.9953河流青原七姑嶺26.9731河流T/CQSES**-202*序號點位名稱經(jīng)度緯度水體類型新干車頭27.6854河流生米28.5417河流豐城小港口28.2619河流吳城贛江29.1884河流周坊28.7864河流吉里28.7783河流馬當渡口29.9917河流28.7783河流彭澤紅光村29.8592河流200九江縣大屋何29.8381河流201陳家墩(右岸)31.0784河流202皖河口(左岸)30.4892河流203前江口(左岸)30.5734河流204五步溝(右岸)30.8063河流205民生水廠(右岸)30.6789河流206三興村(底)31.7788河流207元寶圩(左岸)30.9985河流208東西梁山31.5014河流209烏江(左岸)31.8425河流210塘浦30.6459河流211荊灣30.8288河流212鐵路橋30.8817河流213新港口30.9401河流214遞鋪30.6529河流T/CQSES**-202*序號點位名稱經(jīng)度緯度水體類型215汪家埠30.2572河流216城南翻水站30.5314河流217東升30.6547河流218城西大橋30.8652河流219毗山30.8784河流220團結(jié)閘31.7915河流221高港碼頭(左岸)32.2851河流222小河口上游(左岸)32.2429河流223焦山尾(右岸)32.2264河流224瀏河(右岸)31.5468河流225魏村(右岸)32.0070河流226九鄉(xiāng)河口32.1780河流227下青龍港32.0512河流228小灣(右岸)31.9401河流229啟東港31.7483河流230朝陽農(nóng)場31.1722河流231崇明東灘(左岸)31.3911河流232東風西沙31.7048河流233白龍港(右岸)31.3092河流234青草沙進水口31.4908河流235淀峰31.0897河流236夏字圩30.9723河流237閔行西界30.9794河流238吳淞口31.3836河流T/CQSES**-202*序號點位名稱經(jīng)度緯度水體類型239臨江31.1127河流240草海中心24.9917湖泊241灰灣中24.9136湖泊242羅家營24.8900湖泊243觀音山東24.8372湖泊244觀音山中24.8372湖泊245觀音山西24.8372湖泊246海口西24.7733湖泊247滇池南24.7064湖泊248白魚口24.8100湖泊249斷橋25.0150湖泊250草海楊關山26.8742湖泊251草海中部26.8515湖泊252朱家灣子26.8335湖泊253萬下河口26.8548湖泊254劉家巷26.8491湖泊255洪湖湖心A29.8396湖泊256楊柴湖29.7936湖泊257排水閘29.8281湖泊258洪湖湖心B29.8817湖泊259小港29.9284湖泊260王垸村29.8821湖泊261下新河29.9477湖泊262洪湖5#29.8760湖泊T/CQSES**-202*序號點位名稱經(jīng)度緯度水體類型263桐梓湖29.8118湖泊264鹿角(洞)29.1541湖泊265扁山29.3380湖泊266東洞庭