第

43課微生物的培養與應用普查講43

微生物的培養與應用一張圖學透兩組題講透目錄微生物的實驗室培養和分離第（1）題第（2）題第（3）題隨堂普查練43第1題第2題第3題第（5）題第（6）題微生物的分離與計數第4題第（4）題目錄課后提分練43第1題第2題第3題第4題第5題第6題A組B組第

43課微生物的培養與應用一張圖學透微生物的實驗室培養和分離一張圖學透微生物的實驗室培養和分離碳源無機鹽一張圖學透微生物的實驗室培養和分離一張圖學透微生物的實驗室培養和分離外來雜菌入侵巴氏消毒法灼燒滅菌高壓蒸汽滅菌平板劃線法稀釋涂布平板法一張圖學透微生物的分離與計數一張圖學透微生物的分離與計數脲酶尿素酚紅纖維二糖一張圖學透微生物的分離與計數一張圖學透微生物的分離與計數顯微計數法活菌計數法纖維素剛果紅紅色復合物透明圈一張圖學透微生物的分離與計數一張圖學透微生物的分離與計數纖維素選擇培養基梯度稀釋配制培養基除了考慮營養物質的需求外，還需滿足微生物生長對pH、特殊營養物質以及O2的需求，如維生素等，故A項正確。碳源和氮源必須具有一定比例，但碳元素的含量不一定最多，自養型微生物的培養基不需要碳源，故B項錯誤。鑒別微生物一般用固體培養基，可利用固體培養基上菌落的特征來判斷和鑒別細菌的類型，故C項錯誤。解析：兩組題講透（1）（多選）（2019匯編，6分）下列關于培養基的敘述，正確的是（）A.在配制培養基時，除滿足營養需求外，還應考慮pH、O2及特殊營

養物質的需求B.碳源和氮源必須具有一定比例，碳元素的含量最多，其次為氮

元素C.可利用液體培養基上菌落的特征來判斷和鑒別細菌的類型第43課第（1）題P320微生物在培養時，培養基中不一定都需要有水、碳源、氮源、無機鹽，如自養型微生物的培養基中可以不加碳源，固氮微生物的培養基中可以不加氮源，故D項錯誤。為了避免微生物污染環境和操作者，感染雜菌的培養基和使用過的培養基都必須經滅菌處理后才能丟棄，故E項正確。解析：兩組題講透（1）（多選）（2019匯編，6分）下列關于培養基的敘述，正確的是（）D.每種微生物在培養時，培養基中都需要有水、碳源、氮源、無

機鹽E.感染雜菌的培養基和使用過的培養基都必須經滅菌處理后才能

丟棄第43課第（1）題P320不論何種培養基，在各成分都溶化后分裝前，要先調整pH，然后進行滅菌，故F項正確。微生物平板培養需倒置平板，目的是防止冷凝水珠污染培養基，故G項正確。倒平板時，用左手將培養皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，右手將錐形瓶中的培養基（約10～20mL）倒入培養皿，左手立即蓋上培養皿的皿蓋，不能打開然后將皿蓋放到一邊，故H項錯誤。解析：兩組題講透（1）（多選）（2019匯編，6分）下列關于培養基的敘述，正確的是（）F.配制培養基時，溶化后分裝前，必須要進行的是調整pH和滅菌G.微生物平板培養需倒置平板，目的是防止冷凝水珠污染培養基H.倒平板時，應將打開的皿蓋放到一邊，以免培養基濺到皿蓋上

（

2015江蘇單科）第43課第（1）題P320AEFG小提示第43課小提示P320（2）（2018全國Ⅱ，15分）在生產、生活和科研實踐中，經常通過消毒和滅菌來避免雜菌的污染。回答下列問題：①在實驗室中，玻璃和金屬材質的實驗器具_____（填“可以”或“不可以”）放入干熱滅菌箱中進行干熱滅菌。第43課第（2）題P320可以

①在實驗室中，能耐高溫的、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿和金屬用具等可以采用干熱滅菌法滅菌，因此在干熱滅菌箱中可以對玻璃和金屬材質的實驗器具進行干熱滅菌。解析：②煮沸消毒法溫度相對較高，導致牛奶中營養成分損失較多。巴氏消毒法溫度相對較低，可在殺死牛奶中微生物的同時，使牛奶中的營養成分不被破壞；高溫瞬時消毒法的滅菌時間較短，既能殺死較耐熱的微生物，又可最大限度地減少牛奶中營養成分的損失。（2）（2018全國Ⅱ，15分）在生產、生活和科研實踐中，經常通過消毒和滅菌來避免雜菌的污染。回答下列問題：解析：第43課第（2）題P320②牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法。與煮沸消毒法相比，這兩種方法的優點是_______________________________________。在達到消毒目的的同時，營養物質損失較少

③紫外線可以破壞生物的DNA結構，所以可以采用紫外線照射密閉空間內的空氣進行消毒。在照射前，適量噴灑石炭酸等消毒液，可以加強消毒效果。（2）（2018全國Ⅱ，15分）在生產、生活和科研實踐中，經常通過消毒和滅菌來避免雜菌的污染。回答下列問題：解析：第43課第（2）題P320③密閉空間內的空氣可采用紫外線照射消毒，其原因是紫外線能______________。在照射前，適量噴灑_______，可強化消毒效果。破壞DNA結構消毒液

④自來水消毒使用的是氯氣，氯氣易溶于水，與水結合生成次氯酸和鹽酸，在整個消毒過程中起主要作用的是次氯酸。（2）（2018全國Ⅱ，15分）在生產、生活和科研實踐中，經常通過消毒和滅菌來避免雜菌的污染。回答下列問題：解析：第43課第（2）題P320④水廠供應的自來水通常是經過_____（填“氯氣”“乙醇”或“高錳酸鉀”）消毒的。氯氣⑤在使用高壓蒸汽滅菌鍋進行滅菌時，其原理是把鍋內的水加熱煮沸，將其中的冷空氣排盡后，將鍋密閉繼續加熱，氣壓上升，溫度也升到100℃以上。因此若溫度沒有達到要求，可能原因是未將鍋內冷空氣排盡。（2）（2018全國Ⅱ，15分）在生產、生活和科研實踐中，經常通過消毒和滅菌來避免雜菌的污染。回答下列問題：解析：第43課第（2）題P320⑤某同學在使用高壓蒸汽滅菌鍋時，若壓力達到設定要求，而鍋內并沒有達到相應溫度，最可能的原因是___________________。未將鍋內冷空氣排盡第43課小積累P320小積累常見物品的消毒或滅菌方法（3）（2018江蘇單科，8分）酵母的蛋白質含量可達自身干重的一半，可作為飼料蛋白的來源。有些酵母可以利用工業廢甲醇作為碳源進行培養，這樣既可減少污染又可降低生產成本。研究人員擬從土壤樣品中分離該類酵母，并進行大量培養。如圖所示為操作流程，請回答下列問題：第43課第（3）題P320請回答下列問題：①配制培養基時，按照培養基配方準確稱量各組分，將其溶解、定容后，調節培養基的____，及時對培養基進行分裝，并進行__________________滅菌。高壓蒸汽（濕熱）

①配制培養基的一般過程包括計算、稱量、溶化、調節pH、分裝、滅菌等，其中培養基的滅菌方法常用高壓蒸汽滅菌或濕熱滅菌。解析：pH第43課第（3）題P320請回答下列問題：②取步驟B中不同梯度的稀釋液加入標記好的無菌培養皿中，在步驟C中將溫度約______（在25℃、50℃或80℃中選擇）的培養基倒入培養皿混勻，冷凝后倒置培養。

②步驟C中平板澆注的溫度應選擇50℃，理由是25℃時培養基呈固態，不能澆注，而80℃時，酵母菌被殺死。解析：50℃第43課第（3）題P320請回答下列問題：③挑取分離平板中長出的單菌落，按步驟D所示進行劃線。下列敘述合理的有______。a.為保證無菌操作，接種針、接種環使用前都必須滅菌b.劃線時應避免劃破培養基表面，以免不能形成正常菌落

③步驟D是利用平板劃線培養的方法進一步進行酵母菌的分離和純化。為保證無菌操作，接種針、接種環使用前都必須滅菌，故a項正確。劃線時應避免劃破培養基表面，避免影響菌落的形態，故b項正確。解析：第43課第（3）題P320請回答下列問題：③挑取分離平板中長出的單菌落，按步驟D所示進行劃線。下列敘述合理的有________。c.挑取菌落時，應挑取多個菌落，分別

測定酵母細胞中甲醇的含量d.可以通過逐步提高培養基中甲醇的濃

度，獲得甲醇高耐受株

平板劃線接種過程中用滅菌過且冷卻的接種環只能挑取一個菌落，以達到純化菌種的目的，故c項錯誤。通過逐步提高培養基中甲醇的濃度，可以富集培養能利用高濃度甲醇的酵母菌菌種，獲得甲醇高耐受株，故d項正確。綜上所述，本小題選a、b、d。解析：a、b、d第43課第（3）題P320請回答下列問題：④步驟E中，為使酵母數量迅速增加，培養過程中需保證充足的營養和______供應。為監測酵母的活細胞密度，將發酵液稀釋1000倍后，經等體積臺盼藍染液染色，用25×16型血細胞計數板計數5個中格中的細胞數，理論上___色

酵母菌為兼性厭氧菌，為使酵母菌數量迅速增加，培養過程中應該給予充足的營養和氧氣供應，酵母菌進行有氧呼吸能產生大量的能量。臺盼藍是細胞活性染料，常用于檢測細胞是否存活。活細胞不會被臺盼藍染成藍色，而死細胞會被染成藍色。因此計數時應該記錄解析：細胞的個數應不少于___，才能達到每毫升3×109個活細胞的預期密度。第43課第（3）題P320請回答下列問題：④步驟E中，為使酵母數量迅速增加，培養過程中需保證充足的營養和______供應。為監測酵母的活細胞密度，將發酵液稀釋1000倍后，經等體積臺盼藍染液染色，用25×16型血細胞計數板計數5個中格中的細胞數，理論上___色

沒有被染色的細胞，即無色的活細胞。設5個中格中共有活酵母菌x個，則有（5x/10－4）×1000×2＝3×109，求出x＝30，其中5x指25個中格中酵母菌總數；10－4指一大格下方溶液體積為1mm×1mm×0.1mm＝10－4cm3＝10－4mL；1000指稀釋倍數；2指加入等體積臺盼藍溶液后發酵液又被稀釋2倍。解析：氧氣細胞的個數應不少于___，才能達到每毫升3×109個活細胞的預期密度。無30第43課第（3）題P320方法便箋第43課方法便箋P321微生物的計數方法——間接計數法（活菌計數法）第43課小積累P321小積累平板劃線法和稀釋涂布平板法的比較第43課小積累P321小積累平板劃線法和稀釋涂布平板法的比較第43課小積累P321小積累平板劃線法和稀釋涂布平板法的比較

①只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作為氮源，能分解尿素的細菌是一種分解者，屬于異養型生物，不能以尿素的分解產物CO2作為碳源，必須利用現成的葡萄糖作為碳源，進入細菌體內的葡萄糖的主要作用是為細胞生命活動提供能量，同時葡萄糖還可以轉化成脂肪、某些氨基酸等物質，所以進入細菌體內的葡萄糖能為其他有機物的合成提供原料。（4）（2017全國Ⅰ，15分）某些土壤細菌可將尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用。回答下列問題：①有些細菌能分解尿素，有些細菌則不能，原因是前者能產生______。能分解尿素的細菌不能以尿素的分解產物CO2作為碳源，原因是____________________________________________________，但可用葡萄糖作為碳源，進入細菌體內的葡萄糖的主要作用是_____________________________________________________（答出兩點即可）。解析：第43課第（4）題P321脲酶分解尿素的細菌是異養生物，不能利用CO2來合成有機物提供能量，為其他有機物的合成提供原料為細胞生命活動

②為了篩選可分解尿素的細菌，在配制培養基時，應選擇以尿素作為唯一氮源的選擇培養基，而其他兩組都含有含氮物質NH4NO3，因此不能選其他兩組。（4）（2017全國Ⅰ，15分）某些土壤細菌可將尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用。回答下列問題：②為了篩選可分解尿素的細菌，在配制培養基時，應選擇______（填“尿素”“NH4NO3”或“尿素＋NH4NO3”）作為氮源，不選擇其他兩組的原因是______________________________________________________________________________________________。解析：尿素其他兩組都含有NH4NO3，能分解尿素的細菌和不能分解尿素的細菌都能利用NH4NO3，不能起到篩選作用第43課第（4）題P321

③用來篩選分解尿素細菌的培養基含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用是KH2PO4和Na2HPO4構成緩沖液，可維持培養基的pH相對穩定；KH2PO4和Na2HPO4能為微生物生長提供無機營養。（4）（2017全國Ⅰ，15分）某些土壤細菌可將尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用。回答下列問題：③用來篩選分解尿素細菌的培養基含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用有____________________________________________________________（答出兩點即可）。解析：為細菌生長提供無機營養，作為緩沖劑保持細胞生長過程中pH穩定第43課第（4）題P321

①微生物產生的纖維素酶是一種復合酶，包括C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶，其中的葡萄糖苷酶可將纖維二糖分解成葡萄糖。（5）（經典題，15分）植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解。回答下列問題：①分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶，該酶是由3種組分組成的復合酶，其中的葡萄糖苷酶可將_________分解成_______。解析：葡萄糖纖維二糖第43課第（5）題P321

②在含纖維素的培養基中加入剛果紅（CR）時，CR可與纖維素形成紅色復合物。用含有CR的該種培養基培養纖維素分解菌時，培養基上會出現以該菌的菌落為中心的透明圈。（5）（經典題，15分）植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解。回答下列問題：②在含纖維素的培養基中加入剛果紅(CR)時，CR可與纖維素形成____色復合物。用含有CR的該種培養基培養纖維素分解菌時，培養基上會出現以該菌的菌落為中心的________。解析：透明圈紅第43課第（5）題P321（5）（經典題，15分）植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解。回答下列問題：③為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落，某同學設計了甲、乙兩種培養基（成分如表所示）：據表判斷，培養基甲_____（填“能”或“不能”）用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是_____________________________；不能液體培養基不能用于分離單菌落

③分析表格可知，培養基甲為液體培養基，不能用于分離和鑒別纖維素分解菌，纖維素分解菌鑒別培養基屬于固體培養基。解析：第43課第（5）題P321（5）（經典題，15分）植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解。回答下列問題：③為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落，某同學設計了甲、乙兩種培養基（成分如表所示）：培養基乙____（填“能”或“不能”）用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是______________________________________________________________________________________________。不能培養基中沒有纖維素，不會形成CR—纖維素紅色復合物，即使出現單菌落也不能確定其為纖維素分解菌

培養基乙沒有纖維素，不能和CR形成紅色復合物，即使出現單菌落也不能確定為纖維素分解菌，因此也不能用于分離和鑒別纖維素分解菌。解析：第43課第（5）題P321第43課小積累P322小積累微生物的篩選和鑒別方法第43課小積累P322小積累微生物的篩選和鑒別方法

①欲篩選出能降解原油的菌株，培養基中應只含有原油而無其他碳源，不能降解原油的細菌在此培養基上不能生存，這類培養基屬于選擇培養基。（6）（經典題，8分）有些細菌可分解原油，從而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同學欲從受原油污染的土壤中篩選出能高效降解原油的菌株。回答下列問題：①在篩選過程中，應將土壤樣品稀釋液接種于以_____為唯一碳源的固體培養基上，從功能上講，該培養基屬于_____培養基。解析：第43課第（6）題P322原油選擇

②分離純化菌種時，需采用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，使聚集在一起的細菌細胞分散成單個細胞，從而能在培養基表面形成單個的菌落，以便純化菌種。（6）（經典題，8分）有些細菌可分解原油，從而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同學欲從受原油污染的土壤中篩選出能高效降解原油的菌株。回答下列問題：②純化菌種時，為了得到單菌落，常采用的接種方法有兩種，即___________和________________。解析：平板劃線法稀釋涂布平板法③降解原油能力越強的菌株，在菌落周圍形成的分解圈越大。③為了篩選出高效菌株，可比較單菌落周圍分解圈的大小，分解圈大說明該菌株的降解能力___。強第43課第（6）題P322

④實驗室常用的滅菌方法有灼燒滅菌（如接種環）、干熱滅菌（如培養皿）、高壓蒸汽滅菌（如培養基）等。無菌操作要求在整個實驗過程中操作都在酒精燈火焰附近進行，以避免周圍微生物的污染。（6）（經典題，8分）有些細菌可分解原油，從而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同學欲從受原油污染的土壤中篩選出能高效降解原油的菌株。回答下列問題：④通常情況下，在微生物培養過程中實驗室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、_________和____________。無菌技術要求實驗操作應在酒精燈_____附近進行，以避免周圍環境中微生物的污染。解析：干熱滅菌火焰高壓蒸汽滅菌第43課第（6）題P322第43課小積累P322小積累選擇培養基的四種常見制備方法及實例第43課小積累P322小積累選擇培養基的四種常見制備方法及實例1.（2018北京通州區一模，6分）下列有關微生物培養的敘述正確的是（）A.通常使用液體培養基分離獲得細菌單菌落B.若培養基需要調節pH，應該在滅菌后進行C.用顯微鏡直接計數固體培養基中微生物數量D.倒置平板可防止培養基被滴落的冷凝水污染第43課第1題P323隨堂普查練通常使用固體培養基分離獲得細菌單菌落，故A項錯誤。若培養基需要調節pH，應該在滅菌前進行，故B項錯誤。利用顯微鏡計數時只能用液體培養基，故C項錯誤。倒置平板可防止培養基被滴落的冷凝水污染，故D項正確。解析：DA.生活污水中含有大量微生物，是分離產漆酶菌株的首選樣品B.篩選培養基中需要加入漆酶的底物，通過菌落特征挑出產漆酶的

菌落2.（多選）（2016江蘇單科，3分）漆酶屬于木質素降解酶類，在環境修復、農業生產等領域有著廣泛用途。如圖是分離、純化和保存漆酶菌株的過程，相關敘述正確的是（）第43課第2題P323漆酶屬于木質素降解酶類，生活污水中含木質素類的物質少，則能降解木質素的產漆酶微生物較少，因此生活污水不是分離產漆酶菌株的首選樣品，故A項錯誤。篩選培養基中需要加入漆酶的底物，通過菌落特征挑出產漆酶菌落，從而獲得產漆酶菌株，故B項正確。解析：C.在涂布平板上長出的菌落，再通過劃線進一步純化D.斜面培養基中含有大量營養物，可在常溫下長期保存菌株2.（多選）（2016江蘇單科，3分）漆酶屬于木質素降解酶類，在環境修復、農業生產等領域有著廣泛用途。如圖是分離、純化和保存漆酶菌株的過程，相關敘述正確的是（）第43課第2題P323在涂布平板上長出的菌落可能含有其他雜菌，可以通過平板劃線法進一步純化，故C項正確。對于需要長期保存的菌株，不適宜在常溫下保存，故D項錯誤。解析：BC

（1）鏈霉素是一種抗生素，能干擾或抑制細菌的生長，在用于篩選真菌的培養基中添加鏈霉素是為了抑制細菌的增殖，進而選擇出真菌，所以添加了鏈霉素的培養基相當于選擇培養基。3.（2018全國Ⅰ，15分）將馬鈴薯去皮切塊，加水煮沸一定時間，過濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出液中加入一定量蔗糖和瓊脂，用水定容后滅菌，得到M培養基。回答下列問題：（1）M培養基若用于真菌的篩選，則培養基中應加入鏈霉素以抑制_____的生長，加入了鏈霉素的培養基屬于_____培養基。解析：選擇細菌第43課第2題P325第43課第3題P323

（2）微生物的培養基的營養構成一般都含有水、碳源（如蔗糖）、氮源（如蛋白胨）、無機鹽和生長因子。氮源是為微生物提供氮元素的物質，而氮元素進入細胞后可以用于合成蛋白質、核酸等生物大分子。（2）M培養基中的馬鈴薯浸出液為微生物生長提供了多種營養物質，營養物質類型除氮源外還有_____________（答出兩點即可）。氮源進入細胞后，可參與合成的生物大分子有_____________（答出兩點即可）解析：碳源、無機鹽第43課第2題P325第43課第3題P323核酸、蛋白質

（3）淀粉遇碘液會變藍，而淀粉酶能將淀粉水解，所以當蔗糖被淀粉替代后可以根據藍色是否消失來判斷是否獲得了相應的微生物。若平板上長出的菌落中有能產淀粉酶的微生物，則其會將周圍的淀粉水解，形成透明圈。（3）若在M培養基中用淀粉取代蔗糖，接種土壤濾液并培養，平板上長出菌落后可通過加入顯色劑篩選出能產淀粉酶的微生物。加入的顯色劑是_____，該方法能篩選出產淀粉酶微生物的原理是____________________________________________________________。解析：碘液第43課第2題P325第43課第3題P323淀粉遇碘液顯藍色，產淀粉酶的菌落周圍淀粉被水解，形成透明圈

（4）甲同學3個平板統計的菌落數結果相近，而乙同學3個平板統計的結果中“27”與其他2個數值相差較大，說明實驗結果的重復性差，所以認為乙同學得出的結果可信度低。（4）甲、乙兩位同學用稀釋涂布平板法測定某一土壤樣品中微生物的數量，在同一稀釋倍數下得到以下結果：甲同學涂布了3個平板，統計的菌落數分別是110、140和149，取平均值133；乙同學涂布了3個平板，統計的菌落數分別是27、169和176，取平均、值124。有人認為這兩位同學的結果中，乙同學的結果可信度低，其原因是_________________________________________________________________。解析：第43課第2題P325第43課第3題P323乙同學的結果中，1個平板的計數結果與另2個相差懸殊，結果的重復性差4.（2017江蘇單科，7分）苯酚及其衍生物廣泛存在于工業廢水中，對環境有嚴重危害。小明同學準備依據如圖1操作步驟，從處理廢水的活性污泥中分離篩選酚降解高效菌株。請回答下列問題：第43課第2題P325第43課第4題P323請回答下列問題：（1）酚降解菌富集培養基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水，其中可作為碳源的有_____________。第43課第2題P325第43課第4題P323蛋白胨、苯酚

（1）碳源是微生物生長的一類營養物，是含碳化合物，其中可作為碳源的有蛋白胨和苯酚。解析：于菌落計數與分離。制備平板培養基時除了需要水、營養物質外，還必須添加_______。請回答下列問題：（2）將采集到的樣品接種培養，苯酚用量應隨轉接次數增加而逐漸_______（填“增加”或“減少”），以達到富集酚降解菌的目的。若圖1平板中菌落過于密集，應進一步________，以便第43課第2題P325第43課第4題P323增加

（2）將采集到的樣品接種培養的目的是富集酚降解菌，則苯酚用量應隨轉接次數增加而逐漸增加。平板中菌落過于密集，說明菌種密度過大，應進一步稀釋。平板培養基呈固態，應向其中添加凝固劑。解析：稀釋涂布凝固劑請回答下列問題：（3）如圖2為連續劃線法示意圖，在圖中___（填圖中序號）區域更易獲得單菌落。第43課第2題P325第43課第4題P323

（3）下一次劃線的起始端是上次劃線的末端，隨著劃線的進行，菌種的密度越來越小，更易形成單菌落，故③區域更易獲得單菌落。解析：③請回答下列問題：（4）采用比色測定法（使用苯酚顯色劑）檢測降解后的廢水中苯酚殘留量。先制作系列濃度梯度并進行顯色反應，如表中1～5號比色管的苯酚濃度應分別為____________________。第43課第2題P325第43課第4題P323

（4）1號管為空白對照管，不加苯酚，6號管中苯酚濃度為1mg/L，1～6號管苯酚濃度為0～1mg/L，可判斷濃度梯度為0.2mg/L，則2～5號管中苯酚濃度分別是0.2mg/L、0.4mg/L、0.6mg/L、0.8mg/L。解析：0、0.2、0.4、0.6、0.8請回答下列問題：（4）如果廢水為50mg/L苯酚溶液，降解后約有21%的苯酚殘留，則需將殘留液稀釋___（填序號：①5②10③20）倍后，再進行比色。第43課第2題P325第43課第4題P323

廢水中苯酚溶液濃度為50mg/L，降解后約有21%的苯酚殘留，則苯酚溶液濃度為10.5mg/L，由于制作的比色管中苯酚濃度介于0～1mg/L之間，則殘留液需稀釋20倍后，再進行比色。解析：③1.（2018江蘇揚州模擬，2分）微生物培養過程中，要十分重視無菌操作，現代生物學實驗中的許多方面也要進行無菌操作，防止雜菌污染。請分析下列操作中錯誤的是（）①煮沸消毒可以殺死微生物的營養細胞和部分芽孢②接種操作要在酒精燈火焰附近進行③家庭制作葡萄酒時要將容器和葡萄進行滅菌④培養基要進行高壓蒸汽滅菌⑤加入培養基中的指示劑和染料不需要滅菌A.①③B.②④C.③⑤D.④⑥課后提分練

煮沸消毒法在100℃煮沸5～6min可以殺死微生物細胞和一部分芽孢，①正確；酒精燈火焰附近存在一個無菌區，為保證無菌操作，接種操作要在酒精燈火焰附近進行，②正確；利用葡萄制作葡萄酒時，起主要作解析：第43課第1題P891.（2018江蘇揚州模擬，2分）微生物培養過程中，要十分重視無菌操作，現代生物學實驗中的許多方面也要進行無菌操作，防止雜菌污染。請分析下列操作中錯誤的是（）①煮沸消毒可以殺死微生物的營養細胞和部分芽孢②接種操作要在酒精燈火焰附近進行③家庭制作葡萄酒時要將容器和葡萄進行滅菌④培養基要進行高壓蒸汽滅菌⑤加入培養基中的指示劑和染料不需要滅菌A.①③B.②④C.③⑤D.④⑥C課后提分練

用的是附著在葡萄皮上的野生型酵母菌，所以制作葡萄酒時不需要對葡萄進行滅菌，以免殺死酵母菌，③錯誤；培養基的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌，④正確；指示劑和染料可能混有微生物，故加入培養基前需滅菌，⑤錯誤。綜上所述，操作錯誤的是③⑤，故C項正確。解析：第43課第1題P892.（2018北京東城區模擬，6分）黑茶是以肉食為主的中國邊疆游牧民族的主要飲品。在一系列微生物的作用下，黑茶會產生一種對人體非常有益的金黃色顆粒“金花”。研究人員對“金花”中的微生物進行了分離和鑒定，過程如圖所示。下列說法不正確的是（）若向“金花”樣品中加入蒸餾水制成懸液，則分離的微生物可能來自蒸餾水，因此應向“金花”樣品中加入無菌水制成樣品懸液，故A項錯誤，符合題意。可根據菌落特征對菌種進行初步鑒定，故B項正確，不符合題意。解析：第43課第2題P89A.向“金花”樣品中加入蒸餾水制成樣品懸液B.可根據菌落特征對菌種進行初步鑒定2.（2018北京東城區模擬，6分）黑茶是以肉食為主的中國邊疆游牧民族的主要飲品。在一系列微生物的作用下，黑茶會產生一種對人體非常有益的金黃色顆粒“金花”。研究人員對“金花”中的微生物進行了分離和鑒定，過程如圖所示。下列說法不正確的是（）A涂布平板上長出的菌落通常不是一種菌落，而是混合菌落，可通過平板劃線法進一步純化微生物，故C項正確，不符合題意。通過基因組測序可以對菌種進行準確鑒定，故D項正確，不符合題意。解析：C.涂布平板上長出的菌落可通過劃線進一步純化D.可通過基因組測序對菌種進行準確鑒定第43課第2題P89

（1）牛肉膏蛋白胨培養基適合培養細菌，若用其培養酵母菌，培養基污染后可能會有細菌生長，很難區分出酵母菌的菌落；MS培養基可用于植物組織培養；麥芽汁瓊脂培養基可用于培養酵母菌。對培養基通常采用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌。菌落是指由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體。3.（2018全國Ⅲ，15分）回答下列與酵母菌有關的問題：（1）分離培養酵母菌通常使用___________（填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麥芽汁瓊脂”）培養基，該培養基應采用_________滅菌法滅菌。若將酵母菌劃線接種在平板上，培養一段時間后可觀察到菌落，菌落的含義是_________________________________________。解析：麥芽汁瓊脂第43課第3題P89由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體高壓蒸汽

（2）酵母菌是兼性厭氧型微生物，在有氧條件下，酵母菌進行有氧呼吸，大量繁殖；在無氧條件下，酵母菌能進行酒精發酵，因此酵母菌液體培養時，若通入氧氣，可促進菌體快速增殖；若進行厭氧培養，可促進乙醇產生。3.（2018全國Ⅲ，15分）回答下列與酵母菌有關的問題：（2）酵母菌液體培養時，若通入氧氣，可促進____________（填“菌體快速增殖”“乙醇產生”或“乳酸產生”）；若進行厭氧培養，可促進_________（填“菌體快速增殖”“乙醇產生”或“乳酸產生”）。解析：菌體快速增殖第43課第3題P89乙醇產生

（3）制作面包時，為使面包松軟通常要在面粉中添加一定量的酵母菌，這是因為酵母菌能分解面粉中的葡萄糖產生CO2，CO2是氣體，遇熱膨脹而使面包形成許多小孔，從而使面包變得松軟。3.（2018全國Ⅲ，15分）回答下列與酵母菌有關的問題：（3）制作面包時，為使面包松軟通常要在面粉中添加一定量的酵母菌，酵母菌引起面包松軟的原因是___________________________________________。解析：第43課第3題P89酵母菌分解葡萄糖會產生CO2，CO2使面包松軟

（1）脲酶能夠催化尿素分解為氨，故圖中選擇培養應以尿素作為唯一氮源。由于尿素被分解成了氨，氨會使培養基的堿性增強，pH升高，使酚紅指示劑變紅色。4.（2019改編，10分）如圖是從土壤中篩選產脲酶細菌的過程，請回答下列問題：（1）圖中選擇培養基應以_____為唯一氮源；鑒別培養基還需添加_____作指示解析：第43課第4題P89尿素酚紅劑，產脲酶細菌在該培養基上生長一段時間后，其菌落周圍的指示劑將變成___色。紅

（2）若要判斷選擇培養基是否起到了選擇作用，應與未接種的細菌培養基進行對照。4.（2019改編，10分）如圖是從土壤中篩選產脲酶細菌的過程，請回答下列問題：（2）若要判斷選擇培養基是否起到了選擇作用，需設置__________________作解析：第43課第4題P89未接種的細菌培養基對照，將實驗組和對照組平板倒置，37℃恒溫培養24～48小時，然后進行微生物的培養與觀察。養一段時間后，平板上長出的細菌菌落數分別為13、156、462、178和191。該過程采取的接種方法是_______________，每克土壤樣品中的細菌數量為____×108個；與血細胞計數板計數法相比，此計數方法測得的細菌數較___。

（3）用于計算細菌菌落數的接種方法是稀釋涂布平板法，統計的菌落數應介于30～300之間，故選擇細菌菌落數為156、178和191的平板計數，每克土壤樣品中的細菌數量為（156＋178＋191）/3÷0.1×105＝1.75×108。由于兩個或多個細菌連接在一起時，往往統計的是一個菌落，故用此方法測得的細菌數偏低。4.（2019改編，10分）如圖是從土壤中篩選產脲酶細菌的過程，請回答下列問題：（3）在5個細菌培養基平板上，均接種稀釋倍數為105的土壤樣品液0.1mL，培解析：第43課第4題P89稀釋涂布平板法1.75少

（1）分離菌落常用稀釋涂布平板法或平板劃線法。5.（經典題，15分）臨床使用抗生素前，有時需要做細菌耐藥實驗。實驗時，首先要從病人身上獲取少量樣本，然后按照一定的實驗步驟操作，以確定某致病菌對不同抗生素的敏感性。回答下列問題：（1）為了從樣本中獲取致病菌單菌落，可用_____________法或__________________法將樣本接種于固體培養基表面，經過選擇培養、鑒別等步驟獲得。解析：（平板）劃線第43課第5題P90稀釋涂布（或涂布）（2）取該單菌落適當稀釋，用_____法接種于固體培養基表面，在37℃培養箱中培養24h，使其均勻生長，布滿平板。（2）取該單菌落適當稀釋，用涂布法接