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文檔簡介

第八章

薄層色譜法葉樺珍福建衛生職業技術學院教學目標掌握薄層色譜法的特點、基本原理、操作方法熟悉結果分析方法了解薄層色譜法在藥物分析方面的應用第二節

基本原理

一、分離分析過程

二、定性參數

比移值（retardationfactor，Rf）是指組分移動的距離與展開劑移動距離的比值,其數值等于基線至斑點中心的距離和基線至展開劑前沿的距離比值。

例：計算右圖中中A、B、B'三個斑點的Rf

解：根據：A、B、B'三個斑點的Rf分別為

（一）?固定相的種類

吸附劑、化學鍵合相、離子交換劑、色譜凝膠等

三、固定相（二）固定相的選擇

應根據試樣的性質選擇吸附劑的種類與活性。如試樣為弱酸性，宜選擇硅膠、酸性氧化鋁或中性氧化鋁作為吸附劑。若試樣中的各組分無色且無熒光，可選擇添加了無機熒光劑的硅膠。一般而言，對極性小的試樣，可選擇吸附活性較強的吸附劑以保證對試樣有足夠的吸附力；對極性大的試樣，宜選擇活性較弱的吸附劑以免試樣被牢牢吸附，造成Rf（比移值）過小。（一）展開劑的種類?1.單一展開劑對于成分簡單的混合物，可用單一展開劑。2.多元展開劑對于組分結構差異較小或極性接近的試樣，通常采用多元溶劑（可從二元至六元）作展開劑以提高分離效果。四、展開劑（二）展開劑的選擇方法選擇的依據是“相似相溶”原理，即極性大的組分選用極性大的展開劑分離，極性小的組分選用極性小的展開劑分離。第二節

操作方法

薄層色譜法的一般操作流程為：

制板→加樣→展開→斑點定位→結果分析

一、薄層板制備和處理1.制板前準備

制板前先選擇適當的支持物，要求表面光潔、平整無油污，且具有一定的機械強度，能經受一定的高溫，對所用溶劑和顯色劑呈化學惰性。通常采用玻璃板，也可以用塑料板或鋁基板。常用有5cm×20cm，10cm×10cm，10cm×20cm，20cm×20cm等幾種規格。2.制板過程

制板時除另有規定外，將1份固定相和3份水置于研缽中，按同一方向研磨混合均勻并去除氣泡，倒入已放置好支持物的專用的涂布器中進行涂布。涂布完畢取下薄層板，置水平臺上于室溫下晾干后，在110℃烘30分鐘以去除吸附劑所吸附的水分，冷置室溫后隨即使用或置于干燥箱或干燥器中保存備用。二、加樣材料準備毛細管試樣標準品畫原點線（點樣基線距底邊1.5~2.0cm）毛細管點樣迅速吹干

材料準備（層析缸或展開槽）傾入展開劑，開始展開將展開劑倒入層板缸薄層板放在無展開劑一邊，飽和

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