…………○…………內…………○…………裝…………○…………內…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年牛津譯林版選擇性必修3生物上冊階段測試試卷997考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共7題，共14分)1、腐乳是我國傳統發酵食品；具有很高的營養價值。某科研機構研究了腐乳生產過程中不同濃度的食鹽對腐乳中氨基酸含量的影響。下列敘述正確的是（）

A.生產腐乳發揮主要作用的微生物是酵母菌B.影響腐乳中氨基酸含量的最重要因素是時間C.氦基酸含量上升是由于蛋白質在酶催化下分解D.高濃度食鹽能抑制微生物生長，對制作腐乳更加有利2、研究發現；因餐廚垃圾水分和有機物含量豐富；極易腐敗、發臭，包括大腸桿菌在內的細菌會大量繁殖，嚴重影響城市環境及資源利用。研究人員研究了不同保存方式對抑菌效果的影響，測定了各組大腸桿菌數量隨保存時間的變化，具體結果如圖所示（CFU/ml是每毫升檢樣所生長出來的細菌菌落總數）。下列說法正確的是（）

A.大腸桿菌屬于化能自養型生物，具有核糖體和細胞壁B.據圖分析，直接厭氧保存組的保存方式抑菌效果最好C.乳酸菌的代謝產物可對大腸桿菌起到一定的抑制作用D.餐廚垃圾中大腸桿菌的數量是通過平板劃線法測得的3、下列有關“分解纖維素的微生物的分離”實驗的敘述中，錯誤的是（）A.植物的枝干、葉片能在土壤中完全腐爛，一定有分解纖維素的微生物起作用B.纖維素分解菌往往無法分解人工合成的化學纖維C.配置培養基分離土壤中分解纖維素的微生物時，只能以纖維素作為唯一碳源D.纖維素被微生物最終分解成葡萄糖后加以利用4、動物細胞培養是動物克隆的基礎，如下圖所示，a、b、c表示現代生物工程技術，①、②、③分別表示其結果，請據圖回答，下列說法正確的是（）

A.a如果是核移植技術，則①體現了動物細胞的全能性B.b如果是體外受精技術，②的產生屬于有性生殖，該技術為良種家畜快速大量繁殖提供了可能C.c如果是胚胎分割技術，③中個體的基因型和表型一定相同D.①②③中的受體（代孕母體）均需經過一定的激素處理，以達到超數排卵和同期發情的目的5、將土壤稀釋液涂布于選擇培養基上，若要判斷選擇培養基是否起到了選擇作用，還需要設置的對照是（）A.未接種的選擇培養基B.未接種的牛肉膏蛋白脈培養基C.相同條件下接種了的牛肉膏蛋白胨培養基D.相同條件下接種了的選擇培養基6、將正常的干細胞移植到病人體內，恢復病人的造血和免疫功能，已成為治療白血病及一些惡性腫瘤放療或化療后引起的造血系統、免疫系統功能障礙等疾病的一種重要手段。下列關于干細胞的敘述，正確的是（）A.成體干細胞具有組織特異性，能發育成完整個體B.誘導多能干細胞是病人體內自然產生的一類治療性干細胞C.胚胎干細胞存在于早期胚胎中，只能在體內分化成心肌細胞D.白血病的治療主要利用造血干細胞，其主要存在于成體的骨髓、外周血和臍帶血中7、下列關于“DNA片段的擴增及電泳鑒定”的實驗，說法錯誤的是（）A.PCR利用了DNA的熱變性原理，通過調節溫度來控制B.PCR的產物一般要通過瓊脂糖凝膠電泳來鑒定C.凝膠中DNA分子的遷移速率只與DNA分子的大小有關D.為避免外源DNA等因素的污染，PCR實驗中使用的工具也需要滅菌處理評卷人得分二、多選題(共9題，共18分)8、下列有關生物技術安全性和倫理問題的做法中，錯誤的是（）A.對轉基因生物產品進行標注，供消費者自主選擇B.為挽救患病的孩子取用嬰兒的造血干細胞或器官C.在動物克隆技術發展初期進行生殖性克隆人的研究D.全面禁止轉基因微生物研究以免用于制造生物武器9、嵌合體是指由兩個或兩個以上具有不同遺傳物質的細胞系形成的聚合胚胎發育而成的個體嵌合體的制備是研究干細胞體內分化能力的有效方法之一，有望在未來為解決器官移植供體短缺等醫學難題開辟新的方向。研究人員將小鼠誘導性胚胎干細胞（ES）注入到豬的囊胚期胚胎后獲得豬一鼠嵌合體。下列相關敘述正確的是（）A.培育嵌合體與克隆動物的生物學原理不相同，前者運用的是細胞的增殖與分化后者是動物細胞核的全能性B.胚胎干細胞具有分化為成年動物體內的任何一種類型的細胞的潛能C.將胚胎干細胞注入豬囊胚的滋養層處才能獲得豬—鼠嵌合體D.若培育出“人—獸嵌合體”將會面臨與克隆人一樣的倫理問題10、重疊延伸PCR技術是一種通過寡聚核苷酸鏈之間重疊的部分互相搭橋；互為模板；經過多次PCR擴增。從而獲得目的基因的方法。該技術在擴增較長片段的DNA、不同來源的DNA片段拼接、基因的定點誘變等方而具有廣泛的應用前景，下圖表示利用重疊延伸PCR技術擴增某目的基因的過程。下列敘述正確的是（）

A.引物中G＋C的含量越高，引物與模板DNA結合的穩定性越高B.在第一階段由于引物2和引物3發生堿基互補配對，因此兩者置于不同反應系統中C.引物1、2組成的反應系統和引物3、4組成的反應系統中均進行一次復制，共產生4種雙鏈DNA分子D.在引物1、2組成的反應系統中，經第一階段要形成圖示雙鏈DNA，至少要經過3次復制11、將單克隆抗體與前體藥物的專一性活化酶藕聯（簡稱抗體導向酶偶聯）是特異性治療腫瘤并減少對正常細胞傷害的最新研究方向。堿性磷酸酶是抗腫瘤藥物多柔比星前體的專一性活化酶，醫學研究中利用抗體導向酶偶聯機理將堿性磷酸酶與單克隆抗體制成“生物導彈”，通過活化多柔比星使其對DNA造成損傷，進而抑制以DNA為模板進行的生理活動，達到治療腫瘤的目的。下列說法正確的是（）A.為獲得單克隆抗體應首先給小白鼠注射腫瘤細胞表面抗原，得到能產生特定抗體的B淋巴細胞B.制備單克隆抗體的過程中至少要經過兩次原理和目的均不同的篩選過程C.生物導彈綜合利用了堿性磷酸酶的定向制導作用和單克隆抗體的特異性殺傷能力D.多柔比星只作用于有增殖能力的細胞12、理垃圾的有效方法之一是用微生物對其進行降解，下圖表示篩選高效降解淀粉菌種的過程。下列敘述錯誤的是（）

A.圖中培養基應以淀粉為唯一碳源，將菌液接種到培養基應使用平板劃線法B.菌落①與②周圍透明圈的大小不同原因可能是兩個菌群對碘液分解能力不同C.若菌落①與②分屬細菌和真菌，則二者結構上最主要區別是有無核膜包被的細胞核D.實驗結束后，為防止造成環境污染，使用過的培養基應滅菌處理后再倒掉13、在新冠病毒的核酸檢測過程中采用的逆轉錄PCR（RT—PCR），是聚合酶鏈式反應（PCR）的廣泛應用。在RT-PCR中，一條RNA鏈被逆轉錄成互補DNA，再以此為模板通過PCR進行DNA擴增，進而獲得檢測的目的基因S。下列關于RT-PCR的敘述錯誤的是（）A.RT-PCR所用的酶包括逆轉錄酶和熱穩定RNA聚合酶B.RT-PCR所用的兩引物序列不同，兩者間可進行互補配對C.RT-PCR過程中需添加ATP，反應過程中會有磷酸鍵斷裂D.至少經過2次循環，方可獲取與目的基因等長的DNA單鏈14、農桿菌Ti質粒上的T-DNA可以轉移并隨機插入到被侵染植物的染色體DNA中。研究者將下圖中被侵染植物的DNA片段連接成環；并以此環為模板，利用PCR技術擴增出T-DNA插入位置兩側的未知序列，以此可確定T-DNA插入的具體位置。下列說法正確的是（）

A.進行PCR擴增的依據是DNA分子雙鏈復制的原理B.進行PCR擴增需要的酶有解旋酶和熱穩定DNA聚合酶C.利用圖中的引物②、③組合可擴增出兩側的未知序列D.通過與受體細胞的基因組序列比對，可確定T-DNA的插入位置15、2020年5月22日，在世界權威醫學期刊《柳葉刀》雜志在線刊登了中國陳薇團隊研發的重組腺病毒疫苗I期人體（108位志愿者）試驗臨床數據結果：安全、能誘導免疫反應。重組腺病毒疫苗是一種重組的基因工程產品，用不會使人體致病的腺病毒作為載體，把克隆出來的編碼新冠病毒S蛋白（介導新冠病毒感染細胞的成分）基因裝入載體腺病毒，注入人體，進入人體細胞，表達出S蛋白，刺激人體產生針對新冠病毒的免疫應答。相關敘述正確的是（）A.重組腺病毒疫苗包括S蛋白基因、啟動子、終止子和標記基因等B.重組腺病毒疫苗只能使人體產生體液免疫C.重組腺病毒疫苗引發的體液免疫中有吞噬細胞、T細胞的參與D.重組腺病毒疫苗引起免疫反應后相應淋巴細胞增多，細胞周期將變長16、下列關于試管嬰兒和克隆猴的敘述，錯誤的是（）A.受精過程中，透明帶和卵細胞膜的反應保證了受精卵染色體數目的正常B.克隆猴的性狀表現與細胞核供體的一模一樣，體現了動物細胞核具有全能性C.試管嬰兒的生殖方式屬于無性生殖，克隆猴的生殖方式屬于有性生殖D.“設計試管嬰兒”與“試管嬰兒”在操作上唯一的區別是前者需要進行遺傳學診斷評卷人得分三、填空題(共7題，共14分)17、一般包括______、______等技術18、載體具備的條件：①_____。②具有一至多個限制酶切點，供外源DNA片段插入。③______。19、重組DNA或重組質粒導入受體細胞后，篩選______的依據是______。20、轉化的概念：是______進入受體細胞內，并且在受體細胞內維持______的過程。21、植物繁殖的新途徑。

微型繁殖：可以高效快速地實現種苗的大量繁殖。

作物脫毒：采用______組織培養來除去病毒（因為植物分生區附近的病毒______）

人工種子：以植物組織培養得到的______、不定芽、頂芽和腋芽等為材料，經_____包裝得到的種子。優點：完全保持優良品種的遺傳特性，______；方便儲藏和運輸。

人工種子的結構包括：______、_____和______。22、在我國市場上究竟有多少種轉基因產品呢？一位同學帶著這樣的問題，進行了調查并將結果歸納成下圖?

對該同學的調查和歸納結果，有人表示認同，有人提出質疑?質疑者認為：目前我國市場上根本沒有大豆?玉米或甜菜的轉基因產品?我們的觀點是什么_____？23、研究表明，轉基因抗蟲棉的大面積種植有效遏制了棉鈴蟲害，也顯著地降低了化學農藥的使用量?但是，科研人員也發現，棉田中一種體型很小的盲蝽蟓卻容易爆發成災?有人認為這與大面積種植轉基因抗蟲棉有關?我們應如何看待這種觀點_____？如果回答問題有困難，可以請教老師或通過互聯網尋找答案。評卷人得分四、判斷題(共4題，共32分)24、轉基因生物可能會破壞生態平衡（______）A.正確B.錯誤25、雄性動物剛剛排出的精子并不具有受精能力，必須獲能后才具備受精能力()A.正確B.錯誤26、基因工程技術已被廣泛用于改良動植物品種、提高作物和畜產品的產量等方面。（選擇性必修3P87）()A.正確B.錯誤27、生物武器包括致病菌類、病毒類和生化毒劑類等。（選擇性必修3P111）()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共4題，共32分)28、如圖為“DNA的粗提取與鑒定”實驗過程中的一些重要操作示意圖；請分析回答有關問題：

（1）正確的操作順序是_______________________（用字母和箭頭表示）。

（2）圖中C、E步驟都加入了蒸餾水，但其目的不同，分別是_______________________和_______________________。

（3）為鑒定圖中A步驟中所得到的絲狀物的主要成分為DNA，可將其溶解后，滴加________________試劑后沸水浴加熱，如果出現___________________；則證明該絲狀物的主要成分為DNA。

（4）圖中A步驟的目的是_________________________________________。29、某研究者用抗原（A）分別免疫3只同種小鼠（X；Y和Z）；每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后測定各小鼠血清抗體的效價（能檢測出抗原抗體反應的血清最大稀釋倍數），結果如下圖所示。

若要制備雜交瘤細胞；需取免疫后小鼠的B淋巴細胞（染色體數目為40條），并將該細胞與體外培養的小鼠骨髓瘤細胞（染色體數目為60條）按一定比例加入試管中，再加入聚乙二醇誘導細胞融合，經篩選培養及抗體檢測，得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細胞。

回答下列問題：

（1）制備融合所需的B淋巴細胞時，所用免疫小鼠的血清抗體效價需達到16000以上，則小鼠最少需要經過___________次免疫后才能有符合要求的。達到要求的X、Y、Z這3只免疫小鼠中，最適合用于制備B淋巴細胞的是___________小鼠，理由是______________。

（2）細胞融合實驗完成后，融合體系中除含有未融合的細胞和雜交廇細胞外，可能還有________，體系中出現多種類型細胞的原因是________________。

（3）雜交瘤細胞中有______個細胞核，染色體數目最多是_________條。

（4）未融合的B淋巴細胞經過多次傳代培養后都不能存活，原因是_____________________。30、黏多糖貯積癥是由IDUA基因突變導致的遺傳病。科研人員對此病的治療進行相關研究。

(1)黏多糖貯積癥患者細胞中IDUA基因由于堿基對___________造成突變，轉錄出的mRNA長度不變但提前出現終止密碼子，最終導致合成的IDUA酶分子量___________；與正常IDUA酶的空間結構差異顯著而失去活性，積累過多的黏多糖無法及時清除，造成人體多系統功能障礙。

(2)抑制性tRNA（sup-tRNA）與普通tRNA的結構、功能相同，但它的反密碼子可以與終止密碼子配對。在上述這一類突變基因的翻譯過程中，加入sup-tRNA可以發揮的作用是___________；從而誘導通讀獲得有功能的全長蛋白。

(3)不同的sup-tRNA可以攜帶不同氨基酸；為比較它們的通讀效果，科研人員進行了相關研究，實驗結果如圖。

注：“-”代表未加入。

據圖分析，實驗組將___________基因導入受體細胞，并采用___________技術檢測導入基因的表達情況。據結果分析，攜帶酪氨酸的sup-tRNA能___________。

(4)科研人員利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對IDUA突變基因純合小鼠及IDUA基因敲除小鼠進行治療，檢測肝臟細胞IDUA酶活性和組織黏多糖的積累量，與不治療的小鼠相比較，實驗結果為_____________，表明攜帶酪氨酸的sup-tRNA可以治療黏多糖貯積癥。31、下圖是某同學設計的傳統發酵裝置示意圖。比較傳統發酵技術與現代發酵工程；回答下列問題：

(1)傳統發酵釀酒與現代工業發酵釀酒的原理是______。請設計簡單的實驗驗證發酵過程中產生了酒精（不考慮發酵液中葡萄糖的影響），寫出實驗思路并預期實驗結果與結論______。

(2)傳統發酵技術一般以天然存在的______發酵，品質不一，現代工業發酵一般為單一菌種發酵，品質較高。自制的果酒并非商品意義上的產品，在實際生產中還需要經過______裝瓶等過程才能獲得成品酒。

(3)若要測定發酵罐中酵母菌的種群密度，取10mL發酵液稀釋1000倍，利用25×16的血細胞計數板，觀察并統計到中方格中的酵母菌平均數為9個，則每毫升發酵液中酵母菌數量約是______個。

(4)利用上圖中裝置釀酒與釀醋時，操作上的最主要的區別是______。評卷人得分六、綜合題(共3題，共6分)32、報告基因是指一類易于檢測且實驗材料本身不具備的基因。阿爾茨海默病（AD）是由淀粉樣前體蛋白（APP）過量表達導致的神經系統退變性疾病；用增強型綠色熒光蛋白（EGFP）基因作為報告基因，將ECGFP基因與AIPP基因融合，可方便；經濟、快速地篩選出促進人APPmRNA降解的藥物。研究表明，EGFP與APP基因融合后，雖能全部轉錄但僅有EGFP蛋白得到表達。ECFP基因與AP基因融合過程如圖所示。

（1）APP751；EGFP基因的cDNA是以其mRNA為模板經______________過程形成的；將其儲存于細菌質粒中，屬于構建______________。

（2）據圖分析，Klenow酶的作用是______________。切割pcDNA3．1質粒獲得APP751基因時，研究人員沒有選擇直接用HindⅢ、XbaⅠ同時切割；而是歷經①→②→③的復雜過程，原因是_______________。

（3）COS-7是來源于非洲綠猴生成纖維細胞，培養這類細胞時，為保證細胞生長和避免污染，應分別在合成培養基中添加____________，傳代培養不宜超過10代，原因是______________。33、世界衛生組織定義克隆為“遺傳同一機體或細胞系（株）的無性繁殖”。相對于植物克隆；動物尤其是高等動物的克隆比較困難，下圖表示哺乳動物克隆的幾種方法的主要步驟，據圖回答下列問題。

（1）方法2獲得的小牛的遺傳物質來源于____________，方法3中得到的胚①、②發育成的小牛的遺傳物質是否完全相同？__________________________。

（2）細胞B取自囊胚的____________細胞，具有全能性；細胞C應取自供體3的______細胞。

（3）細胞A、B、C在進行D過程之前需要進行細胞體外培養，培養時需要滿足_____。34、人胰島素基因表達的最初產物是一條肽鏈構成的前胰島素原；經加工后形成兩條肽鏈（A鏈和B鏈）的有生物活性的胰島素。此后科學家又提出了利用基因工程改造大腸桿菌生產人胰島素的兩種方法：“AB”法是根據胰島素A；B兩條肽鏈的氨基酸序列人工合成兩種DNA片段，利用工程菌分別合成兩條肽鏈后將其混合自然形成胰島素;“BCA”法是利用人體某細胞中的mRNA得到胰島素基因，表達出胰島素原后再用特定酶切掉C肽段。這兩種方法使用同一種質粒作為載體。請據下圖分析并回答下列問題：

(1)由于_________，“AB”法中人工合成的兩種DNA片段均有多種可能的序列。“BCA”法是利用人體________細胞中的mRNA，再由mRNA經_________得到的胰島素基因，_________（填“AB”；“BCA”或“AB和BCA”)法獲取的目的基因中不含人胰島素基因啟動子。

(2)如圖是利用基因工程生產人胰島素過程中使用的質粒及目的基因的部分結構。為使目的基因與載體正確連接，在設計PCR引物時可添加限制酶_________的識別序列，PCR引物應該添加在識別序列的_________（填“3’或5’）端。通過上述方法獲得人的胰島素基因后，需要通過PCR技術進行擴增，若計劃用1個胰島素基因為模板獲得m（m大于2)個胰島素基因，則消耗的引物總量是_________個。引物序列中的的GC含量越高，對PCR過程中的_________步驟〔寫出具體過程)影響最大，越_________（填“有利于”或“不利于”)目標DNA的擴增。

(3)PCR擴增的產物一般通過瓊脂糖凝膠電泳來鑒定，下列敘述中正確的有____。A．PCR反應體系中需加入耐高溫的DNA聚合酶，該酶主要在退火過程起作用B．待測樣品中DNA分子的大小和構象、凝膠的濃度等都會影響DNA在電泳中的遷移速率C．進行電泳時，帶電分子會向著與其所帶電荷相反的電極移動D．瓊脂糖溶液中加入的核酸染料利于DNA在紫外燈下被檢測(4)β-半乳糖苷酶可以分解無色的X-gal產生藍色物質使菌落呈現藍色，否則菌落為白色。經_________（處理方法）大腸桿菌后，與重組質粒混合培養一段時間，將大腸桿茵接種到添加了_________和X-gal的培養基上篩選出_________色的菌落即為工程菌種。

(5)科學家利用蛋白質工程技術，研制出了易吸收、起效快的賴脯胰島素，獲得賴脯胰島素基因的途徑是：從預期的蛋白質功能出發→_________→推測應有的氨基酸序列→找到相對應的脫氧核苷酸序列。參考答案一、選擇題(共7題，共14分)1、C【分析】【分析】

腐乳制作中有多種微生物參與；如青霉；酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的是毛霉。毛霉等微生物產生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可以將脂肪水解成甘油和脂肪酸。腐乳制作的過程：1、讓豆腐長出毛霉；2、加鹽腌制；3、加鹵湯裝瓶；4、密封腌制。操作中要注意控制好食鹽的用量。食鹽用量過低不足以抑制微生物的生長，可能會導致豆腐腐乳變質；食鹽濃度過高，會影響腐乳的口味。鹵湯中酒的含量要控制在12%左右。酒精含量過高，腐乳成熟時間會延長；酒精含量過低，不足以抑制微生物的生長，會導致腐乳腐敗變質。

【詳解】

A；腐乳制作中有多種微生物參與；如青霉、酵母、曲霉、毛霉等，其中其主要作用的是毛霉，A錯誤；

B；分析圖中曲線圖；可知本題研究探討了腐乳制作過程中食鹽濃度對氨基酸含量的影響，在45d左右時，食鹽濃度為5%時氨基酸的含量最高。影響腐乳中氨基酸含量的最重要因素是食鹽濃度，B錯誤；

C；腐乳制作過程中毛霉等微生物產生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質分解成小分子的肽和氨基酸。氦基酸含量上升是由于蛋白質在酶催化下分解；C正確；

D；食鹽濃度不是越高越好；如果濃度過高會影響腐乳的風味，D錯誤。

故選C。

【點睛】

本題結合曲線圖考查腐乳的制作。重點知識是制作過程中影響腐乳風味和制作效果的因素，比如食鹽用量、酒精用量、腌制時間等。2、C【分析】【分析】

由圖可知：滅菌+乳酸菌厭氧保存組大腸桿菌數為0；加入乳酸菌后厭氧保存對大腸桿菌起到一定的抑制作用；但不如直接厭氧保存組顯著；與自然保存相比，直接厭氧保存可以有效抑制大腸桿菌的生長增殖。

【詳解】

A；大腸桿菌屬于原核生物；細胞結構中具有核糖體和細胞壁，由題干“因餐廚垃圾水分和有機物含量豐富、極易腐敗、發臭，包括大腸桿菌在內的細菌會大量繁殖”，說明大腸桿菌的營養類型屬于化能異養型生物，A錯誤；

B；據圖分析；與滅菌+乳酸菌厭氧保存組大腸桿菌數為0效果最好的應為滅菌+乳酸菌，即厭氧保存組，B錯誤；

C；與自然保存相比；加入乳酸菌后厭氧保存對大腸桿菌起到一定的抑制作用，大腸桿菌數量減少，C正確；

D；平板劃線法不能統計大腸桿菌數量；D錯誤。

故選C。3、C【分析】【分析】

纖維素分解菌的篩選實驗流程為：土壤取樣；選擇培養、梯度稀釋、將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養基上、挑選產生透明圈的菌落。

【詳解】

A；植物的枝干、葉片能在土壤中完全腐爛是能夠分解纖維素的微生物的作用的結果；A正確；

B；人工合成的化學纖維的本質不是纖維素；故纖維素分解菌往往無法分解人工合成的化學纖維，B正確；

C；分離能分解纖維素的細菌；要以纖維素或植物秸稈為唯一的碳源的選擇培養基，觀察是否有透明圈產生，C錯誤；

D；纖維素屬于多糖；在培養基中需要被纖維素分解菌分解為成葡萄糖后加以利用，D正確。

故選C。4、B【分析】【分析】

動物細胞核移植技術表面動物細胞核具有全能性；體外受精包括精子的采集和獲能；卵母細胞的采集和培養、體外受精；該技術產生的動物稱為試管動物；胚胎分割的特點：來自同一胚胎的后代具有相同的遺傳物質，胚胎分割可以看做動物無性繁殖或克隆的方法之一。

【詳解】

A；a如果是核移植技術；則①體現了動物細胞核的全能性，A錯誤；

B、b如果是體外受精技術；②的產生屬于有性生殖，該過程可獲得大量的胚胎，因而可為良種家畜快速大量繁殖提供了可能，B正確；

C；胚胎分割技術所得個體的基因型完全相同；但表現型不一定完全相同，因為表現型還受環境的影響，即c如果是胚胎分割技術，③中個體的基因型相同，但表型不一定相同，C錯誤；

D；①②③過程中均需要胚胎移植技術；其中的受體均需注射性激素，以達到同期發情的目的，為移入的胚胎提供幾乎相同的環境，D錯誤。

故選B。5、C【分析】【分析】

對照實驗是指除所控因素外其他條件對與被對照組實驗完全對等的實驗；判斷選擇培養基是否起到選擇作用，則接種了的選擇培養基為實驗組，而接種了的牛肉膏蛋白胨培養基為對照組。

【詳解】

對照實驗是指除所控因素外其他條件對與被對照組實驗完全對等的實驗；判斷選擇培養基是否起到選擇作用，則接種了的選擇培養基為實驗組，而接種了的牛肉膏蛋白胨培養基為對照組，將菌液稀釋相同的倍數，在相同培養條件下，在牛肉膏蛋白胨培養基上生長的菌落數目應明顯多于選擇培養基上的菌落數目。因此，應設置相同條件下接種了的牛肉膏蛋白胨培養基作為對照，C正確；

故選C。6、D【分析】【分析】

一般認為；成體干細胞具有組織特異性，只能分化成特定的細胞或組織，不能發育成完整個體。

【詳解】

A；成體干細胞具有組織特異性；只能分化成特定的細胞或組織，不能發育成完整個體，A錯誤；

B；誘導多能干細胞由病人自身的體細胞進行體外誘導獲得；B錯誤；

C；胚胎干細胞存在于早期胚胎中；可以在體外分化成心肌細胞、神經元和造血干細胞等，C錯誤；

D；將正常的造血干細胞移植到病人體內；恢復病人的造血和免疫功能，已經稱為治療白血病及一些惡性腫瘤放療或化療后引起的造血系統、免疫系統功能障礙等疾病的一種重要手段，造血干細胞主要存在于成體的骨髓、外周血和臍帶血中，D正確。

故選D。7、C【分析】【分析】

DNA和蛋白質等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液；但細胞中的某些蛋白質溶于酒精；DNA對酶；高溫和洗滌劑的耐受性。

【詳解】

A；PCR技術利用了DNA的熱變性原理；通過調節該變性-復性-延伸步驟中不同溫度來控制DNA雙鏈的解聚與結合，A正確；

B；對PCR擴增后的產物；一般需要通過瓊脂糖凝膠電泳來鑒定，凝膠中的DNA分子需要染色，以便使電泳結果更直觀，B正確；

C；在凝膠中DNA分子的遷移速率與DNA分子的大小和構象、凝膠的濃度有關；C錯誤；

D；為避免外源DNA等因素的污染；PCR實驗中使用的微量離心管、槍頭、蒸餾水等在使用前都必須進行高壓滅菌處理，D正確。

故選C。二、多選題(共9題，共18分)8、B:C:D【分析】【分析】

1；轉基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應、過敏源、營養成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環境安全（對生態系統穩定性的影響）。對待轉基因技術的正確做法是趨利避害；不能因噎廢食。

2；對生物技術中的倫理問題的爭論；中國政府的態度：禁止生殖性克隆人，堅持四不原則（不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實驗），不反對治療性克隆人。

【詳解】

A；2002年；我國農業部頒布了《農業轉基因生物標識管理辦法》，要求對轉基因生物產品及其加工品加貼標注，供消費者自主選擇，A正確；

B；不能用嬰兒的造血干細胞或器官來挽救患病的孩子；B錯誤；

C；我國政府的態度是禁止生殖性克隆人的研究；C錯誤；

D；對待轉基因技術的正確做法是趨利避害；不能因噎廢食，D錯誤。

故選BCD。9、A:B:D【分析】【分析】

1；胚胎移植的基本程序主要包括：①對供、受體的選擇和處理。選擇遺傳特性和生產性能優秀的供體；有健康的體質和正常繁殖能力的受體，供體和受體是同一物種。并用激素進行同期發情處理，用促性腺激素對供體母牛做超數排卵處理。②配種或人工授精。③對胚胎的收集、檢查、培養或保存。配種或輸精后第7天，用特制的沖卵裝置，把供體母牛子宮內的胚胎沖洗出來（也叫沖卵）。對胚胎進行質量檢查，此時的胚胎應發育到桑椹胚或囊胚階段。直接向受體移植或放入-196℃的液氮中保存。④對胚胎進行移植。⑤移植后的檢查。對受體母牛進行是否妊娠的檢查。

2；胚胎移植的生理學基礎：①動物發情排卵后；同種動物的供、受體生殖器官的生理變化是相同的。這就為供體的胚胎移入受體提供了相同的生理環境。②早期胚胎在一定時間內處于游離狀態。這就為胚胎的收集提供了可能。③受體對移入子宮的外來胚胎不發生免疫排斥反應。這為胚胎在受體內的存活提供了可能。④供體胚胎可與受體子宮建立正常的生理和組織聯系，但供體胚胎的遺傳特性在孕育過程中不受影響。

【詳解】

A；培育嵌合體的生物學原理是細胞的增殖和分化；克隆動物的生物學原理是動物細胞核具有全能性，兩者的原理不相同，操作方法有差別，A正確；

B；由題干信息“將小鼠誘導性胚胎干細胞（ES）注入到豬的囊胚期胚胎后獲得豬一鼠嵌合體”可知；胚胎干細胞分化程度低，具有分化為成年動物體內的任何一種類型的細胞的潛能，B正確；

C；滋養層細胞將來發育成胎膜、胎盤；內細胞團將來發育為胚胎的各種組織、器官，故應將胚胎干細胞注入豬囊胚的內細胞團處才能獲得豬—鼠嵌合體，C錯誤；

D；若培育出“人—獸嵌合體”將會面臨與克隆人一樣的倫理問題；是不道德的，D正確。

故選ABD。

【點睛】10、A:B【分析】【分析】

PCR擴增運用DNA分子復制的原理；經過變性；復性、延伸，最終獲得大量DNA的過程。

【詳解】

A；引物中G＋C的含量越高；C和G之間是三個氫鍵連接，因此引物與模板DNA結合的穩定性越高，A正確；

B；圖中可知；引物2和引物3分別作用同一段DNA的兩條鏈，會發生堿基互補配對，因此兩者置于不同反應系統中，B正確；

C；引物1、2組成的反應系統和引物3、4組成的反應系統中均進行一次復制；共產生2種雙鏈DNA分子，C錯誤；

D；在引物1、2組成的反應系統中；經第一階段要形成圖示雙鏈DNA，至少要經過2次復制，D錯誤。

故選AB。11、A:B【分析】【分析】

單克隆抗體的制備。

（1）制備產生特異性抗體的B淋巴細胞：向免疫小鼠體內注射特定的抗原；然后從小鼠脾內獲得相應的B淋巴細胞。

（2）獲得雜交瘤細胞。①將鼠的骨髓瘤細胞與脾細胞中形成的B淋巴細胞融合。②用特定的選擇培養基篩選出雜交瘤細胞；該雜種細胞既能夠增殖又能產生抗體。

（3）克隆化培養和抗體檢測。

（4）將雜交瘤細胞在體外培養或注射到小鼠腹腔內增殖。

（5）提取單克隆抗體：從細胞培養液或小鼠的腹水中提取。

【詳解】

A；單克隆抗體制備過程中；需要給小白鼠注射腫瘤細胞表面抗原，刺激小鼠產生體液免疫，才能得到能產生特定抗體的B淋巴細胞，A正確；

B；制備單克隆抗體的過程中至少要經過兩次原理和目的均不同的篩選過程；第一次篩選雜交瘤細胞，第二次篩選能產生特異性抗體的雜交瘤細胞，B正確；

C；生物導彈綜合利用了單克隆抗體的定向制導作用和堿性磷酸酶的特異性殺傷能力；C錯誤；

D；根據題干信息“通過活化多柔比星使其對DNA造成損傷；進而抑制以DNA為模板進行的生理活動”，說明多柔比星還可以抑制細胞的轉錄過程，而不增殖的細胞也具有轉錄過程，D錯誤。

故選AB。12、A:B【分析】【分析】

1.微生物接種常用的兩種方法：

①平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過足夠稀釋后；均勻涂布在培養皿表面，經培養后，可形成單菌落。

2.選擇培養基中培養基中加入某種化學成分；根據某種微生物的特殊營養要求或其對某化學；物理因素的抗性而設計的培養基使混合菌樣中的劣勢菌變成優勢菌，從而提高該菌的篩選率。

【詳解】

A；篩選高效降解淀粉的菌種；則選擇培養基中的碳源應為淀粉，根據圖示可知，圖中菌株采用稀釋涂布平板法進行接種，目的是使菌落分布較均勻，然后放在相同且適宜條件下培養，A錯誤；

B；高效降解淀粉的菌種可以產生淀粉酶將培養基中的淀粉水解；因此可以用碘液鑒定培養基中淀粉的分解情況，菌落形成后加入碘液染色，比較菌株菌落周圍透明圈的大小。產生的淀粉酶活性越高，淀粉分解量越多，培養基中篩選菌落周圍透明圈越大，因此圖中菌落①與菌落②周圍透明圈的大小不同，說明分泌的淀粉酶活性不同，B錯誤；

C；①②分別屬于真菌和細菌；真菌屬于真核生物，有以核膜為界限的細胞核，細菌屬于原核生物，沒有以核膜為界限的細胞核，只有擬核，C正確；

D；實驗結束后；對使用過的培養基要滅菌處理后再倒掉，以防止雜菌污染環境，D正確。

故選AB。13、A:B:C【分析】【分析】

分析題干信息；在RT—PCR中，一條RNA鏈被逆轉錄成為互補DNA，再以此為模板通過PCR進行DNA擴增，由此可知該過程需要逆轉錄酶和熱穩定DNA聚合酶的催化。DNA解旋過程不需要解旋酶參與，反應過程中高溫即可解旋。

【詳解】

A；RT-PCR過程需要逆轉錄酶和耐高溫的DNA聚合酶；A錯誤；

B；引物之間不能相互配對；否則不能正常發揮作用，B錯誤；

C；RT-PCR過程中需添加的原料是dNTP；不需添加ATP，反應過程中會有特殊化學鍵斷裂，C錯誤；

D；至少經過2次循環；方可獲取與目的基因等長的DNA單鏈，D正確。

故選ABC。14、A:D【分析】【分析】

PCR技術：

1；概念：PCR全稱為聚合酶鏈式反應；是一項在生物體外復制特定DNA的核酸合成技術。

2；原理：DNA復制。

3；前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物。

4；條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩定DNA聚合酶（Taq酶）。

5；過程：①高溫變性：DNA解旋過程（PCR擴增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶；高溫條件下氫鍵可自動解開）；低溫復性：引物結合到互補鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。

【詳解】

A；PCR擴增依據的是DNA分子雙鏈復制的原理；A正確；

B；進行PCR擴增需要熱穩定DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶）；但不需要解旋酶，B錯誤；

C；DNA的兩條鏈反向平行；子鏈從引物的3′端開始延伸，則利用圖中的引物①、④組合可擴增出兩側的未知序列，C錯誤；

D；通過與受體細胞的基因組序列比對；即可確定T-DNA的插入位置，D正確。

故選AD。

【點睛】15、A:C【分析】【分析】

編碼新冠病毒的S蛋白不具有感染性；但可以引起機體產生特異性免疫，腺病毒不會使人致病，可將克隆出來的編碼新冠病毒S蛋白（介導新冠病毒感染細胞的成分）基因裝入載體腺病毒，注入人體，進入人體細胞，表達出S蛋白，刺激人體產生針對新冠病毒的免疫應答。

【詳解】

A；基因表達載體的構建是基因工程的核心；一個完整的基因表達載體至少包括目的基因（S蛋白基因）、啟動子、終止子和標記基因等，A正確；

B；由于病毒需要寄生在細胞內；且S蛋白是在細胞內合成的，所以重組腺病毒疫苗能使人體產生體液免疫和細胞免疫，B錯誤；

C；重組腺病毒疫苗引發的體液免疫中有吞噬細胞（處理抗原）、T細胞（釋放淋巴因子）的參與；C正確；

D；重組腺病毒疫苗引起免疫反應后相應淋巴細胞增多；細胞周期將變短，D錯誤。

故選AC。

【點睛】16、B:C:D【分析】【分析】

1；“試管嬰兒”是利用體外授精和胚胎移植的方法；解決不孕夫婦的生育問題。

2；設計試管嬰兒概念：是指體外受精形成的胚胎在植入母體孕育前；根據人們的需要，將胚胎的一個細胞取出，進行某些設計，當檢測結果符合人們需要時，再把胚胎植入母體孕育。

【詳解】

A；透明帶和卵細胞膜的反應可以防止多精入卵；從而保證受精卵染色體數目的正常，A正確；

B；由于細胞質中也存在基因控制生物性狀；所以克隆猴的性狀不完全與細胞核供體的相同，B錯誤；

C；試管嬰兒技術與正常的生殖過程相比僅僅是受精和早期胚胎發育的場所不同；實質沒有變化，屬于有性生殖；而克隆猴是將動物體細胞的細胞核移植到去核的卵細胞后發育成的新個體，屬于無性生殖的范疇，C錯誤；

D；設計試管嬰兒與試管嬰兒的主要區別是前者在胚胎植入前需進行遺傳學診斷；設計試管嬰兒有時除體外受精、胚胎培養和胚胎移植外還需要借助其它技術，D錯誤。

故選BCD。三、填空題(共7題，共14分)17、略

【解析】①.動物細胞培養和核移植技術、②.動物細胞融合與單克隆抗體18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】能在受體細胞中復制并穩定保存具有標記基因，供重組DNA的鑒定和選擇19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】含有基因表達載體受體細胞標記基因是否表達。20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】目的基因穩定和表達21、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】莖尖極少或沒有）胚狀體人工薄膜不受季節的限制人工種皮；胚狀體和人工胚乳。

（2）22、略

【分析】【詳解】

目前我國市場上的轉基因食品，從原料來源看，進口的主要有大豆、油菜籽和玉米及相關產品，國內生產的有棉籽油和番木瓜，故我國市場上有大豆等的轉基因產品。【解析】目前我國市場上的轉基因食品，從原料來源看，進口的主要有大豆、油菜籽和玉米及相關產品，國內生產的有棉籽油和番木瓜。23、略

【分析】【詳解】

生物之間存在（種間）競爭多關系，該區域的棉鈴蟲與盲蝽蟓之間共同以棉花為食，種植轉基因抗蟲棉后，棉鈴蟲不能存活，盲蝽蟓的食物等資源充足，故大量繁殖，爆發成災。【解析】該區域的棉鈴蟲與盲蝽蟓之間存在競爭關系，種植轉基因抗蟲棉后，棉鈴蟲不能存活，盲蝽蟓大量繁殖四、判斷題(共4題，共32分)24、A【分析】【詳解】

轉基因生物可能會破壞生態平衡，特別是對生物多樣性的影響。大自然經過億萬年的演化，各種生物相對處于一種和諧的生態平衡狀態。但是，如果我們用轉基因技術把某種生物人為地變得更加“強悍”，那其他物種就會衰敗以至滅絕，故本題正確。25、A【分析】【詳解】

雄性動物剛剛排出的精子并不具有受精能力，必須獲能后才具備受精能力，精子獲能的過程不是獲得能量的過程，是獲得受精能力的過程，可在獲能液或受精液中完成，故正確。26、A【分析】【詳解】

目前，基因工程技術已被廣泛用于改良動植物品種、提高作物和畜產品的產量等方面，例如轉基因抗蟲植物；將植物花青素代謝相關的基因導入牽牛花中，使其呈現自然界沒有的顏色，提高了觀賞價值；將外源生長素基因導入鯉魚體內，轉基因鯉魚生長速率加快等，所以正確。27、A【分析】【詳解】

生物武器是利用生物戰劑殺傷人員、牲畜、毀壞植物的武器。生物武器種類包括致病菌、病毒、生化毒劑以及經過基因重組的致病菌等。故該說法正確。五、實驗題(共4題，共32分)28、略

【分析】【分析】

1；利用動物細胞進行DNA的粗提取與鑒定的實驗原理：①DNA在氯化鈉溶液中的溶解度；是隨著氯化鈉的濃度變化而改變的．當氯化鈉的物質的量濃度為0.14mol/L時，DNA的溶解度最低．利用這一原理，可以使溶解在氯化鈉溶液中的DNA析出；②DNA不溶于酒精溶液，但是細胞中的某些物質則可以溶于酒精溶液．利用這一原理，可以進一步提取出含雜質較少的DNA；②DNA遇二苯胺（沸水浴）會染成藍色，因此，二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。

2；利用動物細胞進行DNA的粗提取與鑒定的實驗步驟是：①制備雞血細胞液；②提取雞血細胞和物質，③細胞核物質中DNA的溶解，④析出含有DNA的粘稠物，⑤過濾獲取紗布上的粘稠物，⑥DNA的再溶解，⑦加冷卻酒精使DNA析出，⑧二苯胺鑒定DNA分子。

【詳解】

（1）DNA的粗提取和鑒定步驟是：加入蒸餾水；破碎細胞→過濾，獲取含DNA的濾液→去除濾液中雜質→DNA的析出→鑒定．所以正確的操作順序是C→B→E→D→A。

（2）C加入蒸餾水的目的是使雞血細胞吸水漲破；釋放細胞核物質；E步驟甲蒸餾水是降低NaCl溶液的濃度，使DNA析出。

（3）鑒定A中所得到的絲狀物的主要成分為DNA；可滴加二苯胺試劑，在沸水浴加熱的條件下如果出現藍色則該絲狀物的主要成分為DNA。

（4）圖中A步驟的目的是獲取含雜質較少（或較純凈）的DNA。

【點睛】

本題結合圖解，考查DNA的粗提取和鑒定，要求考生識記DNA粗提取和鑒定的原理、操作步驟、實驗中采用的試劑及試劑的作用等，再結合所學的知識準確答題，難度適中。【解析】C→B→E→D→A使雞血細胞吸水漲破，釋放出細胞核物質降低NaCl溶液的濃度，使DNA析出二苯胺藍色提取含雜質較少（或較純凈）的DNA29、略

【分析】【詳解】

本題以雜交瘤細胞為背景；考查了動物細胞融合；細胞分裂和細胞分化。

（1）在第四次免疫后；Y的血清抗體效價大于16000，所以最少需要經過四次免疫.由圖可知，血清抗體效價均達到16000以上時，Y的效價最大，最適合用于制備B淋巴細胞。

（2）B細胞與骨髓瘤細胞在一起融合時；可能發生B細胞與骨髓瘤細胞融合，B細胞之間的融合，骨髓瘤細胞之間的融合和B細胞與骨髓瘤細胞融合。由于細胞細胞融合是隨機的，且融合率達不到100%，故體系中會出現多種類型的細胞。

（3）由于核膜也具有流動性；故小鼠的免疫B淋巴細胞核與其骨髓瘤細胞核會融合形成一個雜交的細胞核。B細胞有40條染色體，骨髓瘤細胞有60條染色體，融合后的雜交瘤細胞有100條染色體。

（4）未融合的B淋巴細胞是已分化的細胞；不能無限增殖，所以多次培養后不能存活。

【點睛】

本題考查動物細胞工程，意在考查考生識記所列知識點，并能運用所學知識做出合理的判斷或得出正確的結論的能力。【解析】4YY小鼠的血清抗體效價最高B淋巴細胞相互融合形成的細胞、骨髓瘤細胞相互融合形成的細胞細胞融合是隨機的，且融合率達不到100%1100不能無限增殖30、略

【分析】【分析】

基因突變是指DNA分子中發生堿基對的替換；增添和缺失；而引起的基因結構的改變。翻譯是指在核糖體上，以mRNA為模板、以氨基酸為原料合成蛋白質的過程，該過程還需要tRNA來運轉氨基酸。

密碼子由位于mRNA上決定一個氨基酸的三個相鄰的堿基組成。終止密碼子的作用是終止翻譯過程。

基因工程中檢測目的基因在受體細胞內是否成功表達可以用抗原-抗體雜交技術。

【詳解】

（1）由題干信息可知；黏多糖貯積癥患者細胞中IDUA基因突變后，轉錄出的mRNA長度不變，說明其沒有發生堿基對的增添和缺失，因為這兩者改變會導致轉錄出的mRNA長度改變，因此推測其基因突變是由于堿基對替換。由于終止密碼子提前出現，導致翻譯提前終止，肽鏈變短，IDUA酶分子量變小，空間結構改變而失活。

（2）由題干可知；抑制性tRNA（sup-tRNA）可以最終誘導核糖體通讀mRNA上的遺傳信息合成具有功能的全長蛋白，并且抑制性tRNA（sup-tRNA）與普通tRNA的結構；功能相同，據此推測該抑制性tRNA可以攜帶氨基酸至核糖體并與終止密碼子堿基配對使翻譯過程繼續。

（3）本實驗目的是比較攜帶不同氨基酸的sup-tRNA的通讀效果；需要保證實驗組細胞含有突變IDUA基因，即其不能合成具有正常功能的IDUA酶（防止正常IDUA酶對實驗結果產生干擾），同時保證在不同的實驗組細胞中可以轉錄出攜帶不同中氨基酸的sup-tRNA，因此實驗組中受體細胞中應該含有導入攜帶不同氨基酸的sup-tRNA基因和突變IDUA基因。若要判斷各個實驗組細胞中攜帶不同氨基酸的sup-tRNA是否成功誘導了具有功能的IDUA酶，可以采用該酶的特異性抗體對其進行檢測，即進行抗原-抗體雜交。分析題圖可知，與對照組（含正常IDUA基因的組）相比，含攜帶酪氨酸的sup-tRNA的受體細胞中表達的全長IDUA蛋白量比其他實驗組都多，說明其能有效恢復細胞中全長IDUA蛋白的合成，且效果最好。

（4）由以上實驗可知，攜帶酪氨酸的sup-tRNA能有效誘導核糖體對突變IDUA基因轉錄出的mRNA進行通讀，進而產生具有正常功能的IDUA酶，因此利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對IDUA突變基因純合小鼠進行治療，與不進行治療的IDUA突變基因純合小鼠相比，治療組小鼠的IDUA酶活性高，組織黏多糖積累量少；同時，利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對IDUA基因敲除小鼠進行治療，與不進行治療的IDUA基因敲除小鼠相比，由于二者都不含有IDUA基因，則其細胞內都沒有相應mRNA，因此攜帶酪氨酸的sup-tRNA無法發揮作用，最終導致治療組與不治療組的IDUA酶活性與組織黏多糖積累量無明顯差異。【解析】(1)替換減少。

(2)識別終止密碼子并攜帶氨基酸至核糖體使翻譯過程繼續。

(3)攜帶不同氨基酸的suptRNA基因和變IDUA抗原一抗體雜交恢復細胞中全長IDUA蛋白的合成；且效果最好。

(4)IDUA突變基因純合小鼠IDUA酶活性高，組織黏多糖積累量少；IDUA基因敲除小鼠IDUA酶活性與組織黏多糖積累量無明顯差異31、略

【分析】【分析】

參與果酒的制作的微生物主要是酵母菌；其新陳代謝的類型為異養兼性厭氧型，較適宜的發酵溫度為18~30℃。在無氧的環境中酵母菌把糖類分解為酒精和二氧化碳。在果酒制作過程中檢測發酵液是否含有酒精，取樣后滴加適量酸性重鉻酸鉀溶液并振蕩，若觀察到溶液顏色的變化是橙色變成灰綠色，則說明發酵液中含有酒精。

【詳解】

（1）傳統發酵釀酒與現代工業發酵釀酒都是利用了酵母菌的無氧呼吸。酵母菌屬于真核生物；其代謝類型是兼性厭氧型，在有氧條件下進行大量增殖，在無氧條件下將葡萄糖分解為酒精。

橙色的重鉻酸鉀溶液在酸性條件下與乙醇（即酒精）發生化學反應；變成灰綠色，該實驗目的是驗證發酵過程中產生了酒精，因此實驗自變量是是否加入發酵液，因變量為溶液顏色變化。對照組中應加入酒精作為陽性對照。實驗過程中應遵循等量原則；單一變量原則等，因此實驗思路是：取兩支試管分別標號A、B，A試管中各加入2ml發酵液，作為實驗組，B試管中各加入2ml酒精，作為對照組，兩試管中都加入適量酸性重鉻酸鉀，振蕩后觀察試管中顏色變化，AB兩試管都變為灰綠色，即可驗證發酵過程中產生了酒精。

（2）傳統發酵技術一般不進行嚴格滅菌操作；因此其發酵菌種為天然的混合菌種。現代工業發酵釀制果酒不同于自制果酒，需要經過沉淀；過濾、滅菌、裝瓶等過程才能獲得成品酒。

（3）25×16型的血細胞計數板計算公式：酵母細胞個數/1mL=1個中方格中酵母菌數×25×10000×稀釋倍數，因此該實驗中每毫升發酵液中酵母菌數量=9×25×10000×1000=2.25×109。

（4）釀酒利用酵母菌的無氧呼吸，需要關閉充氣口，釀醋利用醋酸菌，醋酸菌是需氧型微生物，因此需向充氣孔中充入無菌空氣。【解析】(1)酵母菌是兼性厭氧微生物；在無氧條件下將葡萄糖分解為酒精實驗思路：取兩支試管分別標號A；B，向A試管中各加入2ml發酵液，向B試管中各加入2ml酒精，向AB兩試管各滴加0．5ml溶有0．1g重鉻酸鉀的濃硫酸溶液（或酸性重鉻酸鉀），并輕輕震蕩，觀察試管中溶液顏色變化。

(2)混合菌種沉淀；過濾、滅菌。

(3)2.25×109

(4)釀酒時需關閉充氣口，釀醋時則需向充氣孔中充入無菌空氣六、綜合題(共3題，共6分)32、略

【分析】【分析】

基因工程技術的基本步驟：

（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取；利用PCR技術擴增和人工合成。

（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因；啟動子、終止子和標記基因等。

（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同；導入的方法也不一樣。將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：

分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術；

個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

（1）以RNA為模板獲得DNA的過程稱為逆轉錄；將cDNA片段導入到受體菌的群體中儲存，這樣能獲得部分基因文庫或cDNA文庫。

（2）由圖分析可得，①是用限制酶XbaⅠ來切割；得到兩個黏性末端，而Klenow酶將XhaⅠ切割獲得的黏性末端催化產生平末端，③是用限制酶HindⅢ切割，得到含黏性末端的目的基因，可與④切割后的C1質粒構建成基因表達載體。若直接用HindⅢ；XhaⅠ同時切割，產物兩端都是黏性末端，而經過①→②→③可使目的基因兩端分別為平末端和黏性末端，才能與被SmaⅠ與HindⅢ打開的載體連接。

（3）細胞體外培養所需營養物質與體內基本相同；例如，需要有糖；氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。將細胞所需的上述營養物質按其種類和所需數量嚴格配制而成的培養基，稱為合成培養基。為保證細胞生長，應在合成培養基中添加血清、血漿等天然成分，為避免污染，應在合成培養基中添加抗生素。細胞在傳至10代后，增減減緩乃至停止，部分細胞的細胞核型可能發生變化，故傳代培養不宜超過10代。

【點睛】

本題結合圖解，考查基因工程的相關知識，要求考生識