生物學案:課堂互動專題課題土壤中分解尿素的細菌的分離與計數_第1頁
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學必求其心得,業必貴于專精學必求其心得,業必貴于專精學必求其心得,業必貴于專精課堂互動三點剖析1.選擇性培養基選擇性培養基是根據某種微生物的特殊營養要求或其對某化學、物理因素的抗性而設計的培養基,其功能是使混合菌樣中的劣勢菌變成優勢菌,從而提高該菌的篩選效率。我國勞動人民在12世紀(宋代)時,已根據紅曲霉有耐酸和耐高溫的特性,采用明礬來調節酸度和用酸米來抑制雜菌的方法,培養出純度很高的紅曲霉,這實際上就是一種選擇性培養基。從混合樣品中獲得某種微生物的方法,通常有兩種:第一種辦法可利用該分離對象對某一營養物質有一“嗜好"的原理,專門在培養基中加入該營養物,從而使它成為一種加富培養基。采用這類“投其所好”的策略即可使該微生物大大增殖,在數量上超過原有占優勢的微生物,以達到富集培養的目的。用于加富的一些物質主要是一些特殊的碳源和氮源,如纖維素可被用來富集纖維素分解微生物,甘露醇用來富集自生固氮菌。第二種辦法則可利用該分離對象對某種制菌物質的抗性,在混合培養物中加入該抑制物質,經培養后,由于原來占優勢的他種微生物的生長受到抑制,而分離對象卻可趁機大大增殖,使之在數量上占據優勢.用于抑制他種微生物的選擇性抑制劑有染料、抗生素等。由于在土壤中幾乎可找到任何微生物,所以土壤往往是首選的采集目標。土壤采樣必須考慮以下幾個問題:2.土壤中采集菌樣(1)土壤中有機物的含量有機物含量高,土質就肥,一般在其中微生物數量也越多,反之亦然。(2)采土的深度土壤的深度不同,其通氣、養分和水分的分布情況也不同。表層的土壤由于直接受日光曝曬,故較干燥,微生物也不易大量繁殖。在離地面5~20cm處的土壤,微生物含量最高.(3)植被情況植被的種類與微生物的分布有著密切的關系。例如,在冬天灌水的水稻田土壤中,真菌的分布較多.(4)采土的季節以春秋兩季為宜.這時土壤中的養分、水分和溫度都較適宜,微生物的數量也最多。采土時尤其應注意土壤中的含水量,水分過多會造成厭氧環境,不利于放線菌的生長繁殖.真菌雖需要較高的相對濕度,但基質中的水分卻不宜過多。因此要避免在雨季采集土樣.此外,土壤的pH也應適當注意,細菌和放線菌在中性或微堿性土壤中居多,而真菌則在偏酸性的土壤中較豐富。(5)采土方法選擇好適當地點后,用小鏟子除去表土,取5~20cm處的土樣幾十克,盛入事先滅過菌的防水紙袋內,并在上面記錄采土時間、地點和植被等情況。學以致用【例1】分析下面培養基的配方:KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、瓊脂.請完成下列問題:(1)在該培養基的配方中,為微生物的生長提供碳源和氮源的分別是______和______。(2)想一想這種培養基對微生物是否具有選擇作用?如果具有,又是如何進行選擇的?解題提示:碳源是提供碳元素的物質,氮源是提供氮元素的物質。所以碳源是葡萄糖,氮源是尿素。絕大多數生物都能利用葡萄糖,但是,只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素,所以這種培養基對微生物有選擇作用。選擇的原則是只有能夠利用尿素的微生物才能夠生長。選擇培養基篩選微生物的原理:人為提供有利于目的菌株生長的條件(包括營養、溫度、pH等),同時抑制或阻止其他微生物生長。答案:(1)葡萄糖尿素(2)有選擇作用.因為此配方中尿素是唯一氮源,因此,只有能夠利用尿素的微生物才能夠生長。【例2】用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細菌數,在對應稀釋倍數為106的培養基中,得到以下幾種統計結果,正確的是()A。涂布了一個平板,統計的菌落數是230B。涂布了兩個平板,統計的菌落數是215和260,取平均值238C。涂布了三個平板,統計的菌落數分別是21、212和256,取平均值163D。涂布了三個平板,統計的菌落數分別是210、240和250,取平均值233解題提示:在設計實驗時,一定要涂布至少3個平板作為重復組;在分析實驗結果時,一定要考慮所設置的重復組的結果是否一致,結果不一致,意味著操作有誤,需重新實驗。在設計實驗時,一定要涂布至少3個平板,作為重復組,才能增強實驗的說服力與準確

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