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微生物:微生物是形體微小、單細(xì)胞或個(gè)體構(gòu)造簡(jiǎn)樸的多細(xì)胞、甚或無細(xì)胞構(gòu)造,用肉眼看不見或看不清的低等生物的總稱。原核微生物:2、簡(jiǎn)述微生物學(xué)發(fā)展史上5個(gè)時(shí)期的特點(diǎn)和代表人物。
①史前期——朦朧階段(約80前-1676)特點(diǎn):人們即使沒有看到微生物,但已經(jīng)不自覺的運(yùn)用有益微生物、避免有害微生物。中國(guó)古代:
②初創(chuàng)期--形態(tài)學(xué)時(shí)期(1676-1861)特點(diǎn):這一時(shí)期微生物學(xué)的研究工作重要是對(duì)某些微生物進(jìn)行形態(tài)描述。代表人物——列文虎克:微生物學(xué)的先驅(qū)者
③奠基期--生理學(xué)時(shí)期(1861-1897)特點(diǎn):這一時(shí)期的重要工作是查找多個(gè)病原微生物,把微生物學(xué)的研究從形態(tài)描述推動(dòng)到生理學(xué)研究的新水平,建立了系列微生物學(xué)的分支學(xué)科。代表人物:巴斯德和科赫。
④發(fā)展期——生化水平研究階段
特點(diǎn):微生物學(xué)的研究進(jìn)入分子水平,微生物學(xué)家的研究工作從上一時(shí)期的查找病原微生物轉(zhuǎn)移到尋找多個(gè)有益微生物的代謝產(chǎn)物。代表人物——E.Büchner生物化學(xué)奠基人
⑤成熟期——分子生物學(xué)水平研究階段特點(diǎn):微生物學(xué)從一門應(yīng)用學(xué)科發(fā)展為前沿基礎(chǔ)學(xué)科,其研究工作進(jìn)入分子水平,而微生物因其不同于高等動(dòng)植物的生物學(xué)特性而成為分子生物學(xué)研究的重要對(duì)象。在應(yīng)用研究方面,向著更自覺、更有效和可認(rèn)為控制的方向發(fā)展,與遺傳工程、細(xì)胞工程和酶工程緊密結(jié)合,成為新興生物工程的主角。代表人物——J.Watson和F.Crick:分子生物學(xué)奠基人3、微生物共有哪五大共性?其中最基本的是哪一種?為什么?
五大共性:①體積小,面積大;②吸取多,轉(zhuǎn)化快;③生長(zhǎng)旺,繁殖快;④適應(yīng)強(qiáng),易變異;⑤分布廣,種類多。其中最基本的是體積小,面積大;因素:由于微生物是一種如此突出的小體積大面積系統(tǒng),從而賦予它們含有不同于一切大生物的五大共性,由于一種小體積大面積系統(tǒng),必然有一種巨大的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸取面、代謝廢物的排泄面和環(huán)境信息的交換面,并由此而產(chǎn)生其它4個(gè)共性。原核生物:即廣義的細(xì)菌,指一大類細(xì)胞核無核膜包裹,只存在稱作核區(qū)的裸露DNA的原始單細(xì)胞生物,涉及真細(xì)菌和古生菌兩大類群。菌落:在適宜的培養(yǎng)條件下,微生物在固體培養(yǎng)基表面(有時(shí)為內(nèi)部)生長(zhǎng)繁殖,形成以母細(xì)胞為中心的一堆肉眼可見的、有一定形態(tài)構(gòu)造的子細(xì)胞集團(tuán),這就是菌落。芽孢:某些細(xì)菌在生長(zhǎng)發(fā)育后期,可在細(xì)胞內(nèi)形成一種圓形或橢圓形的抗逆性休眠體,稱為芽孢(又稱內(nèi)生孢子)。簡(jiǎn)述革蘭氏染色法的機(jī)制并闡明此法的重要性。革蘭氏染色機(jī)制:結(jié)晶紫液初染和碘液媒染:在細(xì)菌的細(xì)胞膜內(nèi)可形成不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物。乙醇脫色:G+細(xì)胞壁較厚、肽聚糖網(wǎng)層次多和交聯(lián)致密且不含類脂,把結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物牢牢留在壁內(nèi),使其保持紫色;G-細(xì)胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄和文聯(lián)度差,結(jié)晶紫與碘復(fù)合物的溶出,細(xì)胞退成無色。復(fù)染:G-細(xì)菌呈現(xiàn)紅色,而G+細(xì)菌則仍保存最初的紫色。重要性:革蘭氏染色有著十分重要的理論與實(shí)踐意義。通過這一染色,幾乎可把全部的細(xì)菌分成革蘭氏陽性菌與革蘭氏陰性菌兩個(gè)大類,因此它是分類鑒定菌種時(shí)的重要指標(biāo)。又由于這兩大類細(xì)菌在細(xì)胞構(gòu)造、成分、形態(tài)、生理、生化、遺傳、免疫、生態(tài)和藥品敏感性等方面都呈現(xiàn)出明顯的差別,因此任何細(xì)菌只要通過簡(jiǎn)樸的革蘭氏染色,就可提供不少其它重要的生物學(xué)特性方面的信息。真核微生物:是指一大類有完整細(xì)胞核、構(gòu)造精巧的染色體和多個(gè)細(xì)胞器的微生物。霉菌:(非分類名詞)絲狀真菌統(tǒng)稱,普通指菌絲體發(fā)達(dá)而又不產(chǎn)生大型子實(shí)體的真菌。2、簡(jiǎn)述真菌的特點(diǎn)。①不能進(jìn)行光合作用;②以產(chǎn)生大量孢子進(jìn)行繁殖;③普通含有發(fā)達(dá)的菌絲體;④細(xì)胞壁多數(shù)含幾丁質(zhì);⑤營(yíng)養(yǎng)方式為異養(yǎng)吸取型;⑥陸生性較強(qiáng)3、簡(jiǎn)述酵母菌的特點(diǎn)。(1)生活史中,個(gè)體重要以單細(xì)胞狀態(tài)存在;(2)多數(shù)營(yíng)出芽繁殖,也有的裂殖;(3)能發(fā)酵糖類產(chǎn)能;(4)細(xì)胞壁常含甘露聚糖;(5)喜在含糖量較高、酸度較大的水生環(huán)境中生長(zhǎng)。5、簡(jiǎn)述酵母菌的繁殖方式繁殖方式:⑴無性繁殖:①芽殖②裂殖③產(chǎn)生擲孢子等無性孢子(2)原生質(zhì)體的制備:用蝸牛消化酶水解細(xì)胞壁。(注:其構(gòu)造特點(diǎn)可能不完善)病毒:是超顯微的,無細(xì)胞構(gòu)造,專性活細(xì)胞內(nèi)寄生,在活細(xì)胞外具普通化學(xué)大分子特性,一旦進(jìn)入宿主細(xì)胞又含有生命特性。噬菌斑:當(dāng)一種噬菌體感染一種敏感細(xì)胞后,隔很快即釋放出一群子代噬菌體,在固體培養(yǎng)基中,它們通過瓊脂層的擴(kuò)散又侵染周邊的宿主細(xì)胞,并引發(fā)它們的裂解,如此通過多次重復(fù),就出現(xiàn)了一種由無數(shù)噬菌體粒子構(gòu)成的群體—噬菌斑,它是透亮不長(zhǎng)菌的小圓斑,每一種噬菌斑是由一種噬菌體粒子形成的。
烈性噬菌體:凡在短時(shí)間內(nèi)能持續(xù)完畢吸附、侵入、增殖、成熟、裂解這五個(gè)階段而實(shí)現(xiàn)其繁殖的噬菌體,稱為烈性噬菌體。
溫和性噬菌體:噬菌體侵染宿主后,并不增殖,裂解,而與宿主DNA結(jié)合,隨宿主DNA復(fù)制而復(fù)制,此時(shí)細(xì)胞中找不到形態(tài)上可見的噬菌體,這種噬菌體稱為溫和性噬菌體或溶源噬菌體。
4、什么是一步生長(zhǎng)曲線?它可分幾期?各期有何特點(diǎn)?
一步生長(zhǎng)曲線:定量描述烈性噬菌體增殖規(guī)律的實(shí)驗(yàn)曲線稱作一步生長(zhǎng)曲線或一級(jí)生長(zhǎng)曲線。
潛伏期
從噬菌體吸附細(xì)菌細(xì)胞至細(xì)菌細(xì)胞釋放出新的噬菌體的最短時(shí)間。又可分為隱晦期和胞內(nèi)累積期。
裂解期
從被感染的第一種細(xì)胞裂解至最后一種細(xì)胞裂解完畢所經(jīng)歷的時(shí)間。
平穩(wěn)期
指被感染的宿主已全部裂解,溶液中噬菌體數(shù)達(dá)成最高點(diǎn)后的時(shí)期。
裂解量
每個(gè)被感染的細(xì)菌釋放新的噬菌體的平均數(shù)培養(yǎng)基:是一種人工配制的適合微生物生長(zhǎng)繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物用的混合養(yǎng)料,它含有微生物所需的六大營(yíng)養(yǎng)元素,且其間比例適宜大量元素:但凡生長(zhǎng)所需濃度在10-3~10-4mol/L范疇內(nèi)的元素,可稱為大量元素,涉及P、S、K、Mg、Ca、Na和Fe等。
微量元素:但凡生長(zhǎng)所需濃度在10-6~10-8mol/L范疇內(nèi)的元素,則稱為微量元素,涉及Cu、Zn、Mn、Mo、和Co等。2、指出四大類微生物的最適生長(zhǎng)pH范疇及慣用的培養(yǎng)基名稱。細(xì)菌(PH7.4—7.6)——牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基;真菌(自然PH)——馬鈴薯培養(yǎng)基;霉菌(PH7.0—7.2)——察氏培養(yǎng)基;放線菌(PH7.4—7.6)——高氏一號(hào)培養(yǎng)基。
3、指出微生物的六大營(yíng)養(yǎng)要素。
(一)碳源(二)氮源(三)能源(四)生長(zhǎng)因子(五)無機(jī)鹽(六)水5、什么是鑒別性培養(yǎng)基?試以EMB培養(yǎng)基為例,分析其鑒別作用的原理。
鑒別性培養(yǎng)基:培養(yǎng)基中加入能于某一菌的無色代謝產(chǎn)物發(fā)生顯色反映的批示劑,從而用肉眼就能使該菌菌落與外形相似的它種菌落相分辨的培養(yǎng)基就稱鑒別性培養(yǎng)基。
EMB作用原理
其中的伊紅和美藍(lán)兩種苯胺染料可克制革蘭氏陽性細(xì)菌和某些難培養(yǎng)的革蘭氏陰性細(xì)菌。在低酸度時(shí),這兩種染料結(jié)合形成沉淀,起著產(chǎn)酸批示劑的作用。因此試樣中的多個(gè)腸道細(xì)菌會(huì)在EMB培養(yǎng)基上產(chǎn)生互相易分辨的特性菌落,因而易于識(shí)別。特別是大腸桿菌,因其強(qiáng)烈分解乳搪而產(chǎn)生大量的混合酸,菌體帶H+故可染上酸性染料伊紅,又因伊紅與美藍(lán)結(jié)合,因此菌落染上深紫色,從菌落表面的反射光中還可看到綠色金屬閃光
Stickland反映:以一種氨基酸作氫供體和以另一種氨基酸作氫受體而實(shí)現(xiàn)生物氧化產(chǎn)能的獨(dú)特發(fā)酵類型,稱為stickland反映。stickland反映的產(chǎn)能效率很低,每分子氨基酸僅產(chǎn)1個(gè)ATP。2、什么是典型生長(zhǎng)曲線?它可分幾期?劃分的根據(jù)是什么?各期特點(diǎn)如何?
典型生長(zhǎng)曲線:將少量純種單細(xì)胞微生物接種到恒容積的液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)。在適宜條件下,其群體就會(huì)有規(guī)律地生長(zhǎng),定時(shí)取樣測(cè)定細(xì)胞含量,以細(xì)胞數(shù)目的對(duì)數(shù)值作縱坐標(biāo),以培養(yǎng)時(shí)間作橫坐標(biāo),就能夠畫出一條有規(guī)律的曲線,這就是微生物的典型生長(zhǎng)曲線。
劃分的根據(jù):?jiǎn)渭?xì)胞微生物。
(1)延滯期(停滯期、調(diào)節(jié)期)特點(diǎn):a.生長(zhǎng)速率常數(shù)為零;b.細(xì)胞形態(tài)變大或增大;c.細(xì)胞內(nèi)RNA特別是rRNA含量增高,原生質(zhì)呈嗜堿性。d.合成代謝活躍;e.對(duì)外界不良條件的反映敏感。
(2)對(duì)數(shù)期特點(diǎn):此時(shí)菌體細(xì)胞生長(zhǎng)的速率常數(shù)R最大,分裂快,代時(shí)短,細(xì)胞進(jìn)行平衡生長(zhǎng),菌體內(nèi)酶系活躍,
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