模塊九菌種的自然選育（二）NaturalBreedingofBacteria(2)菌種的篩選流程初篩文獻調研設計實驗方案較優化3-5株單株純種培養復篩采樣增殖培養平皿分離菌種鑒定一、采樣1、采樣對象以采集土壤為主，也可以是植物、腐敗物品和某些水域等。

一般園田土和耕作過的沼澤土中，以細菌和放線菌為主；富含碳水化合物的土壤和沼澤地中，酵母和霉菌較多，如一些野果生長區和果園內。2、采土方式選好適當地點后，用小鏟子除去表土，取離地面5-15cm處的土約10g，盛入清潔的牛皮紙袋或塑料袋中，扎好，標記，記錄采樣時間、地點、環境條件等，以備查考。為了使土樣中微生物的數量和類型盡少變化，應便及時分離。二、增殖培養指利用不同微生物間生命活動特點的不同，人為地提供一些特定的環境條件，使特定微生物旺盛生長，使其在數量上占優勢，更利于分離出該特定微生物，稱為增殖培養也叫富集培養。方法：1、控制一定的養分；如：為目的菌株提供唯一氮源或碳源2、控制一定的培養條件。如：控制PH●細菌和放線菌要求pH7.0～7.5●霉菌和酵母菌要求pH4.5～6三、培養分離盡管通過增殖培養效果顯著，但還是處于微生物的混雜生長狀態，因此還必須分離純化。在這—步，增殖培養的選擇性控制條件還應進一步應用，而且控制得細一點。純種分離的方法有稀釋分離法、劃線分離法。1.稀釋平皿分離法a.傾注平皿分離法b.涂布平皿分離法2.平皿劃線分離法a.分區劃線分離法b.連續劃線分離法2、控制培養基的酸堿度如：要分離耐高滲透壓酵母菌，在采用含40%葡萄糖的培養基時，PH控制2.0~4.0，幾乎分離出的酵母菌全都是耐高滲透壓的。純種分離時培養條件的控制措施：1、營養成分的控制如：若要分離產淀粉酶的微生物，可以用淀粉作唯一碳源。3、添加抑制劑如分離放線菌時，加10%的酚，可抑制細菌和霉菌4、熱處理根據芽孢對熱的耐性而淘汰不產芽孢的細菌和其他微生物。6、通氣條件的控制5、控制培養溫度純種分離時培養條件的控制措施：四、生產能力的檢測篩選分初篩和復篩。初篩以迅速篩出大量的達到初步要求的分離菌落為目的，以量為主。復篩則是精選，以質為主，也就是以精確度為主。因此在具體方法上就有差異.1、初篩平板篩選如，水解酶產生菌的篩選：將酶的作用底物加在培養基中，接種后適溫培養，根據菌落周圍是否產生水解圈篩選出水解酶產生菌。初篩可以在平皿上直接以菌落的代謝產物與某些染料或基質的作用形成的變色圈或透明圈的大小來挑取參加復篩者，而將大量的菌落淘汰。用剛果紅染色法鑒定篩選降解纖維素的菌株，羧甲基纖維素鈉作培養物2、復篩采用與生產相近的培養基和培養條件，通過三角瓶進行小型發酵試驗，以求得適合于工業生產用菌種。搖床復篩五、毒性試驗自然界的一些微生物是在一定條件下產毒的，將其作為生產菌種應當十分當心，尤其與食品工業有關的菌種，更應慎重。要根據國家規定，進行毒性試驗。六、菌種鑒定經典分類鑒定方法形態特征、生理生化特征、血清學試驗等。現代分類鑒定方法遺傳特性、細胞化學組分、計算機數值分析。增殖培養的概念采樣的特點純種培養時培養條件的控制要點初篩與復篩的區別小結請設計淀粉酶生產菌的篩選方案。作業項目九菌種的自然選育（一）NaturalBreedingofBacteria課程目標菌種選育種子培養發酵生產產物分離純化成品培養基的優化滅菌課程目標工業菌種的育種是運用遺傳學原理和技術對某個用于特定生物技術目的的菌株進行的多方位的改造。通過改造，可使現存的優良性狀強化，或去除不良性狀或增加新的性狀。菌種選育改良的具體目標

?改變生物代謝途徑，提高目標產物的產量?提高目標產物的純度，減少副產物微生物與人類關系經驗育種定向育種提問：生產菌從來源分為哪幾類？野生型菌種、突變菌、基因工程菌微生物與人類關系誘變育種自然選育菌種選育基因工程育種雜交育種定向育種經驗育種微生物與人類關系一、野生型菌株的來源非人工誘變1.從大自然中分離篩選的菌種2.從自發突變的菌種中篩選的菌種。菌種的自發突變的兩種可能：菌種衰退，生產性能下降；菌種代謝更加旺盛，生產性能提高。自然選育：不經過人工誘變處理，而直接進行篩選的育種方法微生物與人類關系二、分離的原則原則：依照生產的要求、菌種的特性，采用各種篩選方法，快速、準確地篩選出目的菌種。如，在篩選分泌某種特定成分的微生物時，根據所需物質的特性和微生物的性質制定篩選方案實驗室或生產用菌種若不慎污染了雜菌，也必須重新進行分離純化。微生物與人類關系三、新菌分離的步驟1.案例篩選能降解石油的菌株時，方法是在受石油污染的土壤或水域中取樣，配置以石油為唯一碳源的合成培養基，篩選出仍能快速生長的菌株，獲得性能優異的單菌落。2.請根據上述案例歸納菌種篩選的步驟微生物與人類關系平板分離確定采集樣品的生態環境（有針對性的采集樣品）確定特定的增殖條件確定特殊的選擇培養基及可能的定性或半定量檢出法調查研究及查閱充分的資料設計實驗方案采樣增殖培養人為地通過控制養分或培養條件，使所需菌種增殖培養后，在數量上占優勢。微生物與人類關系較優化3-5株原種斜面篩選