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文檔簡介
植物組織培養技術組織培養概述1.組織培養定義
組織培養是指用無菌方法使植物體的離體器官、組織和細胞在人為提供的條件下生長和發育的所有培養技術的總稱,也稱之為離體培養。2.組織培養的發展植物組織培養是二十世紀發展起來的新技術。它的發展經歷了四個發展階段:(一)萌芽階段(從20世紀初到30年代中):
1902年德國植物生理學家Haberlandt提出細胞全能性概念,并首次進行離體細胞培養,但沒有成功。1904年,Hanning最先成功地培養了蘿卜和辣根菜的胚。1922年,Knudson采用胚培養法獲得大量蘭花幼苗。(二)奠基階段(從20世紀30年代末到50年代中):1934年,White用番茄根尖建立起第一個活躍生長的無性繁殖系,從而使非胚器官的培養首先獲得成功。1939年,Gautherete培養胡蘿卜根小外植體成功。1943年,White提出了植物細胞“全能性”學說,標志組織培養成為一門新興學科。1952-1953年:美國科學家StewardF.C.用胡蘿卜根的細胞懸浮培養,發現單個細胞能象受精卵發育成胚一樣的途徑,發育成完整植抹。證實了植物細胞“全能性”學說。(三)快速發展和應用階段(從20世紀50年代末到現在)1960年以來組織培養理論、實踐、技術和方法不斷完善和發展,并廣泛應用于生物學的許多分支學科。1960年,Cocking酶解法分離原生質體獲得成功,使植物細胞可以象動物細胞一樣進行細胞融合。1960年,Morel等人通過對蘭花莖尖進行培養,獲得了快速繁殖的脫毒蘭花,隨后在國內外進行了“蘭花試管苗產業化”。1964年,印度學者Guha和Maheshwari成功地培養曼陀羅花藥獲得單倍體再生植株,從而促進了植物花藥培養單倍體育種技術的發展。3.植物組織培養的基礎理論――植物細胞的全能性定義:植物細胞具有該植物體全部遺傳的可能性,在一定條件下具有發育成完整植物體的潛在能力。原理:生物體的每一個細胞都包含有該物種所特有的全套遺傳物質,都有發育成為完整個體所必需的全部基因,從理論上講,生物體的每一個活細胞都應該具有全能性。差異:(1)受精卵的全能性最高;(2)受精卵分化后的細胞中,體細胞的全能性比生殖細胞的低。植物全能性的表達離體的植物器官、組織、細胞游離單細胞或原生質體胚狀體根、芽愈傷組織人工種子再生植株脫分化
培養條件:基本培養基和適宜的植物生長調節物質,適宜的溫度、空氣、無菌環境、適合的PH、適時光照等。
脫分化:將分化組織的已停止分裂的細胞從植物體部分的抑制性影響下解脫出來,恢復細胞的分裂活性。
再分化:經脫分化的組織或細胞在一定的培養條件下可有轉變為各種不同細胞類型的能力。4.植物組織培養分類愈傷組織培養細胞培養器官培養原生質體培養最為常見的組織培養懸浮細胞培養單細胞培養胚、胚乳、珠心、子房、根、莖、葉、花和幼果的部分組織的培養按材料的類別分⑴愈傷組織培養
將外植體接種在人工培養基上,由于植物生長調節劑的存在,而其細胞脫分化形成愈傷組織,然后通過再分化形成再生植株。它是最為常見的。
⑵器官培養:
將植物的器官如胚、胚乳、珠心、子房、根、莖、葉、花和幼果的部分組織接種在無菌培養基上進行培養。⑶細胞和原
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