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細菌基因敲除服務介紹技術服務的夢工廠lifesciences創新、科技、價值細菌基因敲除原理示意圖(示例)一、技術原理電話:
技術服務基因敲除結果鑒定(示例)二、敲除結果檢測電話:
技術服務三、革蘭氏陰性菌基因敲除流程自殺載體構建自殺載體導入供體菌供體菌與靶細菌接合作用,自殺載體轉移第一次同源重組及篩選第二次同源重組及篩選基因缺失株鑒定自主知識產權自殺載體之一電話:
技術服務四、革蘭氏陽性菌基因敲除流程自殺載體構建陽性菌電轉化(不同菌培養條件、電轉化程序、電擊緩沖液、恢復培養條件不同,需要摸索)第一次同源重組及篩選第二次同源重組及篩選基因缺失株鑒定電話:
技術服務電轉化儀電擊緩沖液五、本公司細菌基因敲除服務優勢電話:
技術服務獨特的供體菌,可以不要求靶細菌具有抗生素抗性。高效的供體菌接合系統,保證自殺質粒具有高的接合轉移效率。自殺載體為T線性化載體,可直接與純化PCR產物連接,不需要考慮酶切位點,大大節省客戶時間。優化的自殺載體序列,最大化減少冗余區,從而提高接合轉移效率,減少非特異重組的概率。自殺載體具有自主開發的反向篩選基因vmt,用于替換常規的sacB基因,從而大大增加基于自殺載體基因敲除技術的適用范圍,大大減少第二次重組后缺失突變克隆的篩選工作。細菌送樣前請鑒定確認好菌株的種類,以免基因擴增不能匹配靶基因。細菌送樣前請先測試菌株是否具有氨芐青霉素(Ap)、卡那霉素(Kn)、氯霉素(Cm)、四環素(Tc)抗性,并保證至少不具有其中一種抗性。如需委托抗性測試,另需收費300元單個抗性測試。請按附件1要求標識需要敲除的基因,以及上下游500bp左右的序列。細菌樣品以液體或平板劃線形式寄出。在樣品寄出前請以電子郵件形式提供培養條件。六、送樣要求電話:
技術服務七、本公司可以提供的其它實驗服務細菌、真菌的多位點分子鑒定細菌API、Biolog生化鑒
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