萬曉軍生物工作室1專題2微生物的培養與應用萬曉軍生物工作室2課題2

土壤中分解尿素的細菌的分離與計數萬曉軍生物工作室3課題背景

尿素是一種重要的農業氮肥。但是尿素并不能直接被農作物吸收。只有當土壤中的細菌將尿素分解成氮之后，才能被植物利用。土壤中的細菌之所以能分解尿素，是因為它們能合成脲酶。尿素最初是從人的尿液中發現的。1828年，德國化學家維勒成功地通過無機物的化學反映合成了尿素，揭開了歷史上人工合成有機物的新篇章。萬曉軍生物工作室4尿素萬曉軍生物工作室5研究思路

篩選菌株

PCR的自動化需要耐高溫的DNA聚合酶，這種酶要能忍受93℃左右的高溫。科學家從水生耐熱細菌Taq中分離到耐高溫的TaqDNA聚合酶。為什么Taq細菌能從熱泉中被篩選出來呢？因為熱泉70--80℃的高溫條件淘汰了絕大多數微生物，而使耐高溫的Taq細菌脫穎而出。萬曉軍生物工作室6實驗室微生物的篩選原理

應用篩選Taq細菌的原理，人為提供有利于目的菌株生長的條件（包括營養、溫度、pH等），同時抑制或阻止其他微生物生長。萬曉軍生物工作室7統計菌落數目

常用稀釋涂布平板法統計樣品中活菌的數目。樣品的稀釋度足夠高時，培養基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統計平板上的菌落數，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。為保證結果準確，一般選擇菌落數30—300的平板計數。萬曉軍生物工作室8培養基上的菌落萬曉軍生物工作室9設置對照設置對照的主要目的是排除實驗組中非測試因素對實驗結果的影響，提高實驗結果的可信度。萬曉軍生物工作室10實驗設計結合課本上給出的資料與實驗流程示意圖，思考有關問題，然后進行實驗設計，并且些出詳細的實驗方案。資料一土壤取樣資料二樣品的稀釋資料三微生物的培養與觀察萬曉軍生物工作室11操作提示無菌操作

1.取土樣的小鐵鏟和盛土樣的信封在使用前都需要滅菌。2.應在火焰旁稱取土壤。在火焰附近將稱好的土樣倒入燒瓶中，塞好棉塞。3.在稀釋土壤溶液的過程中，每一步都要在火焰旁操作。萬曉軍生物工作室12做好標記本實驗使用的平板和試管比較多。為避免混淆，最好在使用前就做好標記。例如：在標記培養皿時，應注明培養基種類、培養日期以及平板上培養樣品的稀釋度。

萬曉軍生物工作室13規劃時間對于耗時較長的生物實驗，我們需要實現規劃時間，以便提高工作效率，在操作時更加有條不紊。萬曉軍生物工作室14結果分析與評價結合對照，分析培養物總共是否有雜菌污染以及選擇培養基是否篩選出一些菌落？是否獲得了某一稀釋度下，菌落數目在30—300的平板。在這一稀釋度下，是否至少有兩個平板的菌落數相接近？你統計的每克土壤中含有能分解尿素的細菌的菌落數是多少？與其他同學的結果接近嗎？如果差異很大，可能是什么原因引起的？萬曉軍生物工作室15課題延伸本課題對能分解尿素的細菌進行了初步的篩選，這只是純化菌種的第一步。對分離菌種作進一步的鑒定，還需要借助生物化學的方法。我們可以通過檢測培養基pH的變化來判斷細菌是否分解尿素的化學反應是否發生。指示劑也可以幫助我們準確地鑒定該種細菌能否分解尿素。萬曉軍生物工作室16相關鏈接活菌計數技術廣泛應用于土壤含菌亮的測定、食品衛生和水源污染度的檢驗等方面。如果你趕興趣，可以從下列項目中選做一個