審核批準(zhǔn)表審核批準(zhǔn)表O方案經(jīng)以下部門審核和批準(zhǔn)后生效工程職責(zé)姓名簽字日期質(zhì)保部起草質(zhì)保部審核質(zhì)保部長批準(zhǔn)質(zhì)量副總無菌檢查用培育基適用性驗(yàn)證報(bào)告驗(yàn)證目的：為證明硫乙醇酸鹽流體培育基、養(yǎng)分肉湯、改進(jìn)馬丁培育基適合于細(xì)菌，真菌的無菌檢查，總結(jié)本驗(yàn)證報(bào)告。參照標(biāo)準(zhǔn)：《中國藥典》2023版二部附錄XIH無菌檢查法。驗(yàn)證工程：硫乙醇酸鹽流體培育基、養(yǎng)分肉湯、改進(jìn)馬丁培育基適用性檢查。驗(yàn)證小組姓名部門姓名部門職責(zé)質(zhì)保部負(fù)責(zé)對驗(yàn)證進(jìn)展總結(jié)和評價(jià)批準(zhǔn)方案及報(bào)告質(zhì)保部負(fù)責(zé)制定確認(rèn)方案及報(bào)告的編制質(zhì)保部質(zhì)保部負(fù)責(zé)確認(rèn)過程的相關(guān)檢測，確保檢驗(yàn)結(jié)論正確牢靠負(fù)責(zé)確認(rèn)過程的相關(guān)檢測，確保檢驗(yàn)結(jié)論正確牢靠4.試驗(yàn)材料：4.1.被驗(yàn)證培育基：品名：硫乙醇酸鹽流體培育基規(guī)格：批號(hào)：生產(chǎn)廠家：品名：養(yǎng)分肉湯培育基規(guī)格：批號(hào)：生產(chǎn)廠家：品名：改進(jìn)馬丁培育基規(guī)格：批號(hào)：生產(chǎn)廠家：壓力蒸汽滅菌器：型號(hào)：雙人凈化工作臺(tái)：型號(hào)：電熱鼓風(fēng)枯燥箱：型號(hào)：4.2.4. 生化培育箱(23～28℃)：型號(hào)：4.2.5. (30～35℃)型號(hào)：稀釋劑：0.9% 無菌氯化鈉溶液

編號(hào)：編號(hào)：編號(hào)：編號(hào)：編號(hào)：驗(yàn)證用培育基：名稱養(yǎng)分瓊脂培育基

生產(chǎn)廠家 批號(hào)玫瑰紅鈉瓊脂培育基驗(yàn)證用菌株：驗(yàn)證菌株CMCC〔B〕10104CMCC〔B〕63501生孢梭菌CMCC(B)64941白色念珠菌黑曲霉菌CMCC(F)98003菌液制備：

代次 培育基 培育溫度30～35℃30～35℃30～35℃30～35℃23～28℃23～28℃

培育時(shí)間〔小時(shí)〕18～2418～2418～2418～2424～485～7天18～24小時(shí)的金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌的養(yǎng)分肉湯穎培育物1ml9ml0.9%10倍稀釋至小于100cfuml的菌懸液備用。取經(jīng)培育24～48小時(shí)的白色念珠菌的改進(jìn)馬丁培育物 1ml參加到9ml0.9%無菌氯化鈉溶液中，10倍稀釋至小于100cfu∕ml的菌懸液備用。菌液計(jì)數(shù)：〔每種菌液接種2個(gè)平皿〕1ml參加培育皿，24515～20ml30～35℃培育箱培育1ml245℃的15～20ml23～28℃培育箱培育三天。無菌培育基的無菌性檢查培育基的配制硫乙醇酸鹽流體培育基的配制：取硫乙醇酸鹽流體培育基 29.25g，加1L蒸餾水，加熱煮沸使其完全溶解，搖勻分裝到試管中，每只試管裝量

12ml，12115min。培育基管數(shù)培育時(shí)間〔天〕備注名稱12345678910111213培育基管數(shù)培育時(shí)間〔天〕備注名稱12345678910111213141硫乙醇酸2鹽流體3培育基4512養(yǎng)分肉湯3培育基4512改進(jìn)馬丁3培育基45結(jié)論28.5g1L蒸餾水，加熱攪拌使其完全溶9ml，12115min。培育基的培育530～3514天；改進(jìn)523～2814天℃，逐日觀看狀況。1培育基的無菌性檢查表注：“+-”為不生長培育基靈敏度檢查硫乙醇酸鹽流體培育基等靈敏度檢查至少應(yīng)進(jìn)展 3次獨(dú)立的平行試驗(yàn)。7.2培育基的配制硫乙醇酸鹽流體培育基的配制：取硫乙醇酸鹽流體培育基 29.25g，加1L蒸餾水，加熱煮沸使其完全溶解，搖勻分裝到試管中，每只試管裝量 12ml，121℃滅菌15min。養(yǎng)分肉湯培育基的配制：取硫乙醇酸鹽流體培育基 18g，加1L蒸餾水，加熱攪拌使其完全溶解，搖勻分裝到試管中，每只試管裝量 12ml，121℃滅菌15min。改進(jìn)馬丁培育基的配制：取改進(jìn)馬丁培育基溶解，搖勻分裝到到試管中，每只試管裝量培育基接種

28.5g1L蒸餾水，加熱攪拌使其完全9ml，12115min。菌種類型菌種類型培育基裝量〔培育基管數(shù)硫乙醇酸鹽流體培育基〔天〕備注金黃色葡萄球菌枯草芽孢桿菌銅綠假單胞菌生孢梭菌空白比照菌種類型培育基裝量培育基管數(shù)養(yǎng)分肉湯培育基〔天〕備注123金黃色葡萄球菌枯草芽孢桿菌銅綠假單胞菌取每管裝量為12ml的硫乙醇酸鹽流體培育基9支，分別接種小于100cfu/ml 的金黃色21支不接種作為空白比照，39ml5100cfu/ml的白色念珠215天。逐日觀看結(jié)果。結(jié)果推斷空白比照管應(yīng)無菌生長，假設(shè)加菌的培育基管生長良好，判該培育基的靈敏度檢查符合規(guī)定。2培育基靈敏度檢查表ml〕〔支〕123121121121121121121121121121〔ml〕〔支〕12112112112112112112 1生孢梭菌12 1空白比照 12 1菌種類型白色念珠菌黑曲霉空白比照結(jié)論

培育基裝量〔ml〕99999

培育基管數(shù)〔支〕11111

改進(jìn)馬丁培育基〔天〕備注1 2 3 4 5注：“+-”為不生長驗(yàn)證周期：同種培育基的不同批號(hào)，不同生產(chǎn)廠家均應(yīng)進(jìn)展適用性驗(yàn)證。結(jié)論：無菌檢查用培育基適用性驗(yàn)證報(bào)告書驗(yàn)證工程 無菌檢查用培育基適用性驗(yàn)證驗(yàn)證目的 無菌檢查用培育基適合于細(xì)菌，真菌的培育2023年 月 日至2023 年月日，驗(yàn)證小組依據(jù)批準(zhǔn)的“驗(yàn)證方案”對無菌檢查用培育基進(jìn)展無菌檢查和靈敏度驗(yàn)證，驗(yàn)證方案在實(shí)施過程中未做修改；依據(jù)《中華人民共和國藥典》2023年版〔二部〕附錄無菌檢查法培育基的適用性檢查，結(jié)果 。驗(yàn)證人員會(huì)簽：部門 職 責(zé) 人員會(huì)簽質(zhì)保部 負(fù)責(zé)對驗(yàn)證進(jìn)展總結(jié)和評價(jià)批準(zhǔn)方案及報(bào)告質(zhì)保部質(zhì)保部質(zhì)保部批準(zhǔn)人：

負(fù)責(zé)制定確認(rèn)方案及報(bào)告的編制負(fù)責(zé)確認(rèn)過程的相關(guān)檢測，確保檢驗(yàn)結(jié)論正確牢靠負(fù)責(zé)確認(rèn)過程的相關(guān)檢測，確保檢驗(yàn)結(jié)論正確牢靠批準(zhǔn)日期：無菌培育基的適用性檢查記錄培育基：1. 硫乙醇酸鹽流體培育基養(yǎng)分肉湯培育基改進(jìn)馬丁培育基一、培育基的無菌性檢查

批號(hào)： 批號(hào)： 批號(hào)：

檢驗(yàn)日期：檢驗(yàn)日期：檢驗(yàn)日期：培育溫度：硫乙醇酸鹽流體培育基 ℃ 改進(jìn)馬丁培育基 ℃培育基管數(shù)名稱 1

培育時(shí)間〔天〕備注2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 141硫乙醇酸 2鹽流體 3培育基 4512養(yǎng)分肉湯3培育基4512改進(jìn)馬丁3培育基45結(jié)論-二、培育基的靈敏度檢查菌液制備：〔1〕金黃色葡萄球菌[CMCC(B)26003]〔2〕枯草芽孢桿菌[CMCC(B)63501]〔3〕銅綠假單胞菌[CMCC(B)10104]〔4〕[CMCC(B)64941]〔5〕白色念珠菌[CMCC(F)98001]〔6〕黑曲霉[CMCC(F)98003]

第代0.9%NaCl溶液至含菌量第代0.9%NaCl溶液至含菌量第代0.9%NaCl溶液至含菌量第代0.9%NaCl溶液至含菌量第代0.9%NaCl溶液至含菌量第代0.9%NaCl溶液至含菌量

CFU/mlCFU/mlCFU/mlCFU/mlCFU/mlCFU/ml檢查結(jié)果細(xì)菌培育溫度

℃ 3天

霉菌及酵母菌培育溫度 ℃5 天菌種類型枯草芽孢桿菌銅綠假單胞菌生孢梭菌空白比照金黃色葡萄球菌

培育基裝量121212121212121212培育基裝量

培育基管數(shù)〔支〕111111111培育基管數(shù)

硫乙醇酸鹽流體培育基〔天〕備注1 2 3養(yǎng)分肉湯培育基〔天〕備注1 2 3〔支〕121121121121121121121121