原發性肝癌primaryhepatocelluarcarcinoma,HCC

是指肝細胞或肝內膽管細胞發生的癌，是惡性程度及轉移率很高的腫瘤之一。其中來源于肝細胞的肝細胞癌最為常見，占肝癌的83%。概念1現在是1頁\一共有27頁\編輯于星期二肝癌發生的“正負”調節原癌基因抑癌基因HBV與肝細胞癌化學誘發及其他致癌因素信號通路的異常活化發病機制2現在是2頁\一共有27頁\編輯于星期二從一個正常細胞轉化成一個增殖失控并具有侵襲，轉移潛能的高度惡性腫瘤細胞是一個多基因參與的，多步驟的復雜而漫長的不斷演進過程。其中包括一系列原癌基因的活化和抑癌基因的失活。一、肝癌發生的“正負”調節3現在是3頁\一共有27頁\編輯于星期二

1.原癌基因的激活

調控細胞生長和增殖的正常細胞基因。突變后轉化成為致癌的癌基因癌基因的激活機制①點突變②病毒誘導與啟動子插入③基因擴增④染色體斷裂與重排4現在是4頁\一共有27頁\編輯于星期二點突變—ras基因家族

ras基因被激活最常見的方式就是點突變.以第12密碼子突變最為常見,而且多為GGT突變成GTT.其編碼的蛋白質是RAS蛋白。在傳遞細胞生長分化信號方面起重要作用5現在是5頁\一共有27頁\編輯于星期二Ras蛋白：單鏈多肽，原癌基因ras編碼，作用類似于G蛋白

RasGTP-活性狀態

RasGDP-無活性狀態

本身無調節活性結構6現在是6頁\一共有27頁\編輯于星期二

ras基因突變使得GAP不能作用Ras-GTP，持久處于活化狀態，從而可不斷傳遞增殖信號至細胞核而使細胞發生惡性轉化。7現在是7頁\一共有27頁\編輯于星期二2.抑癌基因的功能失活或基因缺失、突變抑癌基因是一類編碼對腫瘤形成起阻抑作用的蛋白質的基因。正常情況下抑制細胞增殖，促進細胞分化，抑制癌細胞脫落、侵襲、轉移。當這些基因不能表達，或者當其產物失去活性時，可導致細胞癌變。RB、P21、P53等8現在是8頁\一共有27頁\編輯于星期二

RB基因位于染色體13q14.3，其編碼產物p105RB為核內反式作用因子，RB蛋白的非磷酸化形式通過與轉錄因子結合而抑制細胞周期從G1Ｓ的演進，而一些癌基因產物與之結合，使其失去抑制增殖作用。RB9現在是9頁\一共有27頁\編輯于星期二p21基因是C1P家族中的一員,它是位于p53基因下游的細胞周期素依賴性激酶抑制因子。P21是細胞周期抑制蛋白，可以通過抑制細胞周期蛋白依賴性激酶（CDK）的活性來控制細胞由G1期進入S期，從而抑制DNA的合成，使細胞停止分化，出現凋亡P21現在是10頁\一共有27頁\編輯于星期二

P-53

p53基因定位于17p13，由11個外顯子組成。對于發生DNA損傷的細胞可抑制其在修復之前進行增值，并促進其發生凋亡，從而避免癌變。

突變的P53蛋白不僅喪失以上功能，而且可與非突變的P53蛋白結合，使其失去活性。同時與Ras基因協同，促進癌變。11現在是11頁\一共有27頁\編輯于星期二P53基因編碼P53蛋白，它作為轉錄因子可與特異的DNA序列結合。一些外界刺激如DNA損傷、應激等可引起細胞內P53蛋白水平升高，激活一系列下游靶基因的轉錄，阻滯細胞周期，誘導細胞凋亡，保護基因組的完整性以及抑制腫瘤細胞的生長等。目前已知的下游靶基因包括P21、GADD45、MDM2、BAX、IGF-BP3和PIG3等。12現在是12頁\一共有27頁\編輯于星期二DNA損傷p53活化p21基因轉錄細胞阻滯在G1期

如果DNA損傷不能被修復，p53持續增高引起細胞凋亡。13現在是13頁\一共有27頁\編輯于星期二1、概念二、HBV與肝細胞癌

乙肝病毒結構示意圖乙肝病毒結構示意圖乙型肝炎病毒（HBV）：是嗜肝DNA病毒，為球形顆粒里。外層為外殼蛋白，內含單股雙鏈DNA及DNA多聚酶。14現在是14頁\一共有27頁\編輯于星期二順式激活作用反式激活作用2、致癌機制15現在是15頁\一共有27頁\編輯于星期二順式激活作用

HBV-DNA插入到肝細胞原癌基因附近，直接啟動或增強癌基因的表達。16現在是16頁\一共有27頁\編輯于星期二反式激活作用

即HBV-DNA隨機整合到肝細胞基因組DNA上，通過轉錄并翻譯成蛋白質后，再激活自身基因或肝細胞的原癌基因。現認為反式激活因子(transactivator)可能是HBxAg(乙型肝炎病毒x抗原)17現在是17頁\一共有27頁\編輯于星期二HBx基因特有的反式激活功能被認為是導致HCC發生的主要因素。其自身的調控區域(1—20氨基酸)能夠抑制HBxAg蛋白的反式激活活性，近羧基端的51～154氨基酸為其反式激活區域，是HBxAg蛋白發揮其反式激活作用的基礎。HBVx基因整合后通過反式激活細胞內的原癌基因，并能使抑癌基因p53突變和失活。突變后的HBx基因反式激活功能明顯增強，導致一系列原癌基因激活并且使抑癌基因失活，最終導致肝癌的發生。反式激活作用18現在是18頁\一共有27頁\編輯于星期二黃曲霉毒素B1（AFB1）池塘中藍綠藻產生的藻類毒素華支睪吸蟲感染亞硝胺類(二乙基亞硝胺)、偶氮芥類、有機氯農藥、雄激素、某些類固醇類藥物以及酒精長期持續接受輻射三、化學誘發及其他致癌因素19現在是19頁\一共有27頁\編輯于星期二黃曲霉素

黃曲霉毒素有20多種，其中致癌作用最強的是黃曲霉素B1，其毒性比亞硝胺強75倍，比砒霜強68倍。若低劑量攝入，可造成慢性中毒，它能損害動物的肝臟，引起肝細胞壞死、肝纖維化、肝硬化等病變，可誘發肝癌。20現在是20頁\一共有27頁\編輯于星期二黃曲霉素與P53突變經研究發現，黃曲霉素暴露頻率低的肝癌患者第249號密碼子突變頻率也低黃曲霉素污染是導致P53的第249號密碼子突變的一個重要危險因素。21現在是21頁\一共有27頁\編輯于星期二HBV、AFB1與P53

1、在某些肝癌可因HBV的整合而引起p53基因的一個等位基因丟失

2、暴露于黃曲霉素B1

（AFB1）可導致p53基因第249密碼子第三個堿基的突變（G—>T）,從而使編碼的氨基酸由Ser（絲氨酸）變為Arg（精氨酸），這種突變在HCC的檢出率為8%。HBV對AFB1所致的突變具有協同作用。此外，p53基因還可有多密碼（226,243,244,245,248）的突變，內含子的突變以及內含子與外顯子拼接部位的突變。依突變性質的不同可致p53蛋白不能表達或者不穩定。

3、在早期肝癌p53的失活并非由于p53基因的突變，而是HBV的HBx蛋白或HCV的核心蛋白（core

protein）與p53蛋白相結合所致。

22現在是22頁\一共有27頁\編輯于星期二四、信號通路的異常活化

多種信號通路的異常活化參與了肝癌的發生與演化,選擇性阻斷腫瘤細胞信號傳導通路，破壞其自控性生長調節機制,早已成為腫瘤研究領域的熱點,所以確立信號傳導通路的調節機制至關重要。RAS-MAPK(絲裂原激活蛋白激酶)通路WNT相關通路23現在是23頁\一共有27頁\編輯于星期二

生長因子是一類在細胞增殖中起關鍵作用的信號分子，主要包括上皮生長因子（EGF），肝細胞生長因子（HGF），血小板衍化內皮細胞生長因子等。這些生長因子（可稱為配體）與受體結合后，通過激活受體的酪氨酸激酶活性活化Ras/MAPK信號通路，最終誘導下游基因的轉錄，影響細胞的生長、分化和增殖。RAS-Raf-MAPK(絲裂原激活蛋白激酶)通路

24現在是24頁\一共有27頁\編輯于星期二Raf蛋白：

具有絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶活性

Ras使Raf定位于質膜，激活Raf的激酶活性。MAPK系統（mitogen-activatedproteinkinase)：包括MAPK（MEK，細胞外信號調節激酶）、MAPK激酶（MAPKK）、MAPKK激酶（MAPKKK即Raf蛋白），是一組酶兼底物的蛋白分子。

MAPKK：雙激酶，Ser/Thr及Tyr磷酸化25現在是25頁\一共有27頁\編輯于星期二

在ras/MAPK信號通路中，ras蛋白可以與其下游的絲氨酸/蘇氨酸激酶raf蛋白相互作用，而導致raf蛋白活化。raf蛋白又通過激活MAPK激酶MEK1和MEK2,從而