標準解讀

《GB/T 31797-2015 啤酒花潛隱類病毒檢疫鑒定方法》是一項國家標準，主要針對啤酒花中可能存在的潛隱類病毒進行檢測與鑒定。該標準詳細規定了從樣本采集到最終結果分析的一系列流程，旨在為啤酒花的健康狀態提供科學依據，保障農業生產和食品安全。

首先，在樣品采集方面，標準明確了不同生長階段及部位（如葉片、莖部）作為取樣對象，并給出了具體的操作指南，包括如何選取代表性植株以及采樣數量的要求等。這一步驟對于確保后續檢測準確性至關重要。

接著是樣品處理部分，介紹了將收集到的新鮮或干燥植物材料制備成適合實驗條件下的形式，比如通過研磨、過濾等方式獲取細胞液或者提取RNA/DNA。此外還涉及到了保存條件和時間限制等內容，保證待測物質處于最佳狀態。

核心內容之一是關于病毒核酸的提取與純化技術。這部分描述了幾種常用的方法來高效地從復雜背景中分離出目標序列，并強調了減少非特異性吸附的重要性。同時指出應根據實際情況選擇合適的技術路線。

隨后進入到了PCR擴增反應環節，這是整個鑒定過程中最為關鍵的步驟之一。標準不僅列出了推薦使用的引物序列及其對應的目標區域信息，而且對反應體系構建、循環參數設定等方面也做了明確規定。為了提高靈敏度和特異性，還特別提到了多重PCR策略的應用可能性。

最后是對擴增產物進行電泳分析或測序驗證的過程。通過比較條帶大小、位置等特征與預期模式是否一致，可以初步判斷是否存在特定類型的潛隱類病毒；進一步地，通過對陽性樣本進行直接測序并與數據庫比對，則能夠實現更為精確的物種鑒定。


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....

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  • 現行
  • 正在執行有效
  • 2015-07-03 頒布
  • 2015-11-27 實施
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文檔簡介

ICS6502001

B16..

中華人民共和國國家標準

GB/T31797—2015

啤酒花潛隱類病毒檢疫鑒定方法

DetectionandidentificationofHoplatentviroid

2015-07-03發布2015-11-27實施

中華人民共和國國家質量監督檢驗檢疫總局發布

中國國家標準化管理委員會

GB/T31797—2015

前言

本標準按照給出的規則起草

GB/T1.1—2009。

本標準由全國植物檢疫標準化技術委員會提出并歸口

(SAC/TC271)。

本標準起草單位中華人民共和國寧波出入境檢驗檢疫局中華人民共和國北京出入境檢驗檢疫

:、

局中華人民共和國新疆出入境檢驗檢疫局中國農業科學研究院植物保護研究所石河子大學

、、、。

本標準主要起草人郭立新鄧叢良段維軍張祥林李世訪姜冬梅榮德福劉升學

:、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T31797—2015

啤酒花潛隱類病毒檢疫鑒定方法

1范圍

本標準規定了啤酒花潛隱類病毒的檢疫鑒定方法

。

本標準適用于啤酒花Humulusluulus及其無性繁殖材料種子花粉上啤酒花潛隱類病毒的檢

(p)、、

疫鑒定同時也適用于葎草Humulusaonicus和異株蕁麻Urticadioica上啤酒花潛隱類病毒的檢

,(jp)()

疫鑒定

。

2規范性引用文件

下列文件對于本文件的應用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

分析實驗室用水規格和試驗方法

GB/T6682

3儀器設備主要用具和主要試劑

、

31儀器設備

.

電子天平感量普通天平感量高速冷凍離心機小型瞬時離心機普通冰箱超

(0.001g)、(0.1g)、、、、

低溫冰箱制冰機渦旋振蕩器磁力攪拌器高壓滅菌鍋計儀微波爐電泳儀電

(-80℃)、、、、、pH、PCR、、、

泳槽凝膠分析成像系統實時熒光儀雜交爐塑料薄膜封口機紫外交聯儀暗箱搖床可調移

、、PCR、、、、、、

液器

(2.5μL,10μL,20μL,200μL,1000μL,5000μL)。

32主要用具

.

無吸頭無離心管

RNase(10μL,20μL,200μL,1000μL,5000μL)、RNase(1.5mL,5mL,

研缽研棒磁性分離架反應管實時熒光孔反應板雜交瓶雜交膜雜交

10mL)、、、、PCR(200μL)、96、、、

袋光片

、X。

33主要試劑

.

除另有規定外所有試劑均為分析純實驗用水應符合中相關規定檢測試

,,GB/T6682。RT-PCR

劑見附錄實時熒光檢測試劑見附錄斑點雜交檢測試劑見附錄

B;RT-PCRC;D。

4檢測樣品制備

41種子類

.

隨機抽取至少粒種子樣品進行表面消毒后置于鋪有吸水紙的白瓷盤或培養皿中在適宜的發

50,,,

芽溫度條件下催芽直至長出第一對真葉發芽時間大約一周或者在消毒的土壤中直接種植直至長

,();,

出第一對真葉取

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