標準解讀

《GB/T 25876-2010 牛早期胚胎性別的鑒定 巢式PCR法》是一項國家標準，旨在提供一種通過巢式聚合酶鏈反應（Nested PCR）技術來鑒定牛早期胚胎性別的方法。該標準適用于實驗室條件下對牛早期胚胎進行性別鑒定。

根據此標準，首先需要從牛的早期胚胎中提取DNA。然后，采用特定引物通過兩輪PCR擴增目標序列，第一輪使用一對外部引物擴增較大片段，第二輪則利用內部引物對第一輪產物中的特定區域進一步放大。這種方法能夠提高檢測靈敏度和特異性，從而更準確地識別胚胎性別相關基因片段。

整個過程包括樣品準備、DNA提取與純化、設計合適的引物序列、執行巢式PCR反應以及最后的結果分析等步驟。其中，選擇恰當的引物對于確保實驗成功至關重要。此外，還需注意控制實驗條件如溫度循環參數等，以保證擴增效率和準確性。

本標準還詳細規定了質量控制措施和技術要求，比如如何避免污染、怎樣設置陽性對照和陰性對照實驗等，確保每次測試結果可靠有效。通過遵循這些指導原則，研究人員可以有效地利用巢式PCR技術來進行牛早期胚胎性別鑒定工作。


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....

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  • 現行
  • 正在執行有效
  • 2011-01-10 頒布
  • 2011-06-01 實施
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GB/T 25876-2010牛早期胚胎性別的鑒定巢式PCR法_第1頁
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文檔簡介

ICS6502030

B43..

中華人民共和國國家標準

GB/T25876—2010

牛早期胚胎性別的鑒定巢式PCR法

MethodofnestedPCRforsexidentificationofearlycattleembryo

2011-01-10發布2011-06-01實施

中華人民共和國國家質量監督檢驗檢疫總局發布

中國國家標準化管理委員會

中華人民共和國

國家標準

牛早期胚胎性別的鑒定巢式PCR法

GB/T25876—2010

*

中國標準出版社出版發行

北京復興門外三里河北街號

16

郵政編碼

:100045

網址

電話

:6852394668517548

中國標準出版社秦皇島印刷廠印刷

各地新華書店經銷

*

開本印張字數千字

880×12301/160.57

年月第一版年月第一次印刷

2011220112

*

書號

:155066·1-41599

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版權專有侵權必究

舉報電話:(010)68533533

GB/T25876—2010

前言

本標準的附錄為規范性附錄附錄為資料性附錄

B,A。

本標準由中華人民共和國農業部提出

。

本標準由全國畜牧業標準化技術委員會歸口

。

本標準起草單位華中農業大學

:。

本標準主要起草人張淑君楊利國李翔劉輝劉文舉胡修忠

:、、、、、。

Ⅰ

GB/T25876—2010

牛早期胚胎性別的鑒定巢式PCR法

1范圍

本標準規定了牛早期胚胎性別鑒定的巢式方法

PCR。

本標準適用于奶牛和肉牛胚胎或胎兒的性別鑒定

。

2規范性引用文件

下列文件中的條款通過本標準的引用而成為本標準的條款凡是注日期的引用文件其隨后所有

。,

的修改單不包括勘誤的內容或修訂版均不適用于本標準然而鼓勵根據本標準達成協議的各方研究

(),,

是否可使用這些文件的最新版本凡是不注日期的引用文件其最新版本適用于本標準

。,。

分析實驗室用水規格和試驗方法

GB/T6682

3術語和定義

下列術語和定義適用于本標準

。

31

.

巢式PCRnestedpolymerasechainreaction

利用兩套引物巢式引物對進行兩輪擴增反應在第一輪擴增中外引物用以產

PCR(PCR)PCR,,

生擴增產物此產物在內引物的存在下作為模板進行第二輪擴增

,,DNA,。

32

.

SRY基因SRYgene

哺乳動物染色體上決定雄性性別的基因

Y。

33

.

HBB基因HBBgene

珠蛋白基因位于常染色體上

β,。

4原理

利用巢式反應的敏感性高和特異性強的特性對少量胚胎細胞的SRY基因片段進行擴增以

PCR,,

HBB基因的擴增作為陽性參照電泳檢測擴增產物根據擴增產物電泳條帶鑒定胚胎性別

,PCR,。

5引物

SRY

15′CTACTCCCCAACCGTCAGAAC3′

5′AGCCCAAACCCATCAACCTA3′

SRY

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