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文檔簡介

實驗十、細胞電泳10級生物技術一、實驗目的了解細胞電泳的原理及意義。學習細胞(包括細胞器)電泳速度及其ζ電位的測定方法。三、實驗原理細胞電泳，就是將細胞制成懸浮溶液．使其單個游離的細胞分散于等滲的介質中。在外電場的作用下，細胞在特殊的裝置內發生運動．這種現象稱作細胞電泳。細胞表面具有一定的電荷(通常為負電荷)，它能象無機離子一樣均勻地分布在介質中。細胞表面吸附了一層極薄的水膜，它與介質間存在著電位差，此電位差稱為ζ電位。每種細胞在恒定的條件下(如溫度、電壓、電流，介質濃度，溶液的PH值等)其電泳速度和ζ電位十分穩定，但在各種有害因子，病理狀態的影響下，可降低其表面電荷，所以電泳速度和ζ電位值也發生改變(降低)。四、實驗方法（一）

細胞電泳前的準備工作1.目微尺校正。2.毛細管l／10d層的測定及將微調轉動到d／10層的位置。3.細胞(或細胞器)懸液調制，用血球計數板對懸液計數，然后調制細胞(或細

胞器)濃度，全血細胞約2000個／mm3，葉綠體為5000一10000個／nm3。4.顯微鏡固定及毛細管和銀電極的清潔：（1）選可翻轉的顯微鏡以免細胞在電泳時迅速下沉，脫離觀察面。（2）用肥皂水(最好用十二烷基磺酸鈉)沖洗毛細管電泳室，然后用清水沖洗數次。（3）用普通紗布將電泳架兩端的銀電極擦干凈，以免正反兩方向的電泳速度顯著不一樣。顯微細胞電泳系統顯微觀察電泳槽玻璃小室顯微觀察電泳槽固定架觀察窗

（易碎）安放玻璃小室加樣6.將電泳架移至顯微鏡載物臺上，調整焦距，使焦面落在管腔的d／10—d／15處。為了對照可測d／2處的電泳速度。7.通過直流輸出引線夾，分別與兩極接通。8.測量(1)將開關調至“工作”檔，再調節電壓使其達到原來(即操作4中所調)的水平，由于電場作用，在視野內可觀察到管腔內細胞的移動。記錄某個細胞通過目微尺2格的時間。(2)將開關調至“停止”檔，細胞即停止移動。(3)將換向開關調至“負”處，調整高速開關調至“工作”檔，由于電流方向

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