阿司匹林的質量標準阿司匹林的質量標準阿司匹林的質量標準資料僅供參考文件編號：2022年4月阿司匹林的質量標準版本號：A修改號：1頁次：1.0審核：批準:發布日期：石河子大學小學期制實驗結課論文阿司匹林的質量標準、姓名：王義西班級：藥學（3）班學號：73指導老師：李樂日期：2013年9月3日乙酰水楊酸抗炎藥物的分析王義西石河子大學藥學院小學期藥學第三組第三實驗組摘要阿司匹林，化學名為2-(乙酰氧基)苯甲酸，作為主要的解熱鎮痛抗炎藥收載于《中國藥典》(2010年版)二部，臨床上主要用于治療感冒發燒,牙痛、肌肉痛及神經痛等慢性疼痛，急、慢性風濕病及類風濕病等,是風濕、類風濕關節炎治療的常用藥物。本品主要的副作用是引起幽門痙攣及刺激胃黏膜的胃腸道反應,長期服用導致胃腸出血。隨著現代藥學技術的發展，目前已有片劑、腸溶片、腸溶膠囊、泡騰片和栓劑等多種劑型，以阿司匹林為主藥的復方制劑也層出不窮，形成了阿司匹林含量測定方法的各異性。隨著科學技術的進步，各種儀器設備、新方法也應用到了阿司匹林的鑒別、雜質檢查、含量測定中，本文對其作一綜述。關鍵詞:阿司匹林鑒別雜質檢查含量測定HPLC紫外分光光度法TLC阿司匹林臨床上主要用于治療感冒發燒,牙痛、肌肉痛及神經痛等慢性疼痛，急、慢性風濕病及類風濕病等,是風濕、類風濕關節炎治療的常用藥物。本文主要對阿司匹林做一綜合論述，通過對阿司匹林的性狀、鑒別、雜質檢查、含量測定四個方面對乙酰水楊酸進行藥物分析。1實驗部分儀器與試劑儀器：紫外分光光度計（Cintra404,GBC）、電子天平（AB135-S，梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司METTLERTOLEDO）、微孔濾膜（尺寸25mm，孔徑μ，上海半島實業有限公司凈入器材廠）高效液相色譜儀、紫外檢測器、自動進樣器、色譜數據處理機、UV一260分光光度計、HPLC色譜柱、超純水器、展開槽、水浴鍋、研缽、移液管（1、2、5、10ml）、吸耳球、容量瓶（25、50、100ml）、燒杯（10、100、500ml）、膠頭吸管、直尺試劑：復方乙酰水楊酸片（25mg/片）：阿司匹林貯備液溶液（ml）、無水乙醇、氯仿、丙酮、冰醋酸、甲醇、95%乙醇、酚酞指示液、碳酸鈉試液，稀鹽酸、稀硫酸、三氯化鐵試液、乙醚、硫酸鐵銨試液（新制）、蒸餾水性狀阿司匹林為白色結晶或結晶性粉末；遇濕氣即緩緩水解。在乙醇中易溶，在三氯甲烷或乙醚中溶解，在水或無水乙醚中微溶，在氫氧化鈉或碳酸鈉中溶解，但同時分解。酸性：阿司匹林分子結構中具有鄰為取代苯甲酸結構，故具有酸性。水解性：本類藥物分子結構中具有酯鍵，可發生水解。吸收光譜特性：本類藥物中有苯環和特征取代基，均具有紫外和紅外特征光譜。鑒別試驗與三氯化鐵反應取本品的細粉適量（約相當于阿司匹林），加水10ml，煮沸，放冷，加三氯化鐵試液1滴，即顯紫堇色。薄層色譜鑒別樣品溶液的制備復方乙酰水楊酸片取復方乙酰水楊酸片1片，研細，加氯仿15mI，振搖溶解，濾過，濾液作為樣品溶液。空白溶液的制備復方乙酰水楊酸片取片劑輔料(按生產廠家提供的一片處方量稱取)加氯仿15mI，振搖后濾過，濾液作為空白溶液。乙酰水楊酸對照品溶液的制備復方乙酰水楊酸片稱取水楊酸對照品適量，加氯仿制成每1ml中含水楊酸1．0mg的單一對照品溶液。制法：復方乙酰水楊酸片照薄層色譜法精密量取乙酰水楊酸標準品溶液、乙酰水楊酸對照品溶液各5ul，點于同一硅膠薄層板上，以氯仿一乙醚一丙酮一冰醋酸(27：18：1：2)為展開劑，展距為10cm，展開后，晾干，置紫外燈(254nm)下檢視。樣品溶液所顯的1個斑點的位置與顏色分別與相應的對照品溶液所顯的斑點一致，均顯暗黃色。乙酰水楊酸Rf一0．85。雜質檢查比色法乙酰水楊酸中游離水楊酸的檢查取本品，加乙醇1ml溶解后，加冷水適量使成50ml立即溶液1ml（取1mol/L鹽酸液1ml加稀硫酸鐵銨2ml后，再加適量使成100ml搖勻，30秒鐘內）。如顏色與對照液（精密稱取水楊酸，加水溶解后，加冰醋酸1ml，搖勻，再加水使成1000ml，搖勻）精密量取1ml，加乙醇1ml，水48ml與上述新制的硫酸鐵銨溶液1ml，搖勻比較。不得更深（%）。含量測定水解后滴定法乙酰水楊酸的含量測定藥典規定每片檢品中含乙酰水楊酸應為~。精密稱取上述細粉適量（約相當于乙酰水楊酸），置分液漏斗中，加水15ml，搖勻，用氯仿振搖提取4次（20,10,10,10ml），提取氯仿液用同一份水10ml洗滌，合并氯仿洗液，置水浴上蒸干，殘渣加中性乙醇（對酚酞指示液顯中性）20ml溶解后，加酚酞指示液3滴，用L氫氧化鈉液滴定，即得（每1mlL氫氧化鈉液相當于的C9H8O4）。按下式計算每片含乙酰水楊酸的克數g/片=（T·V·f/W稱樣量）×平均片重高效液相法測定阿司匹林含量色譜條件：ODS為填充劑，流動相：甲醇-冰醋酸-水（8:4:1）檢測波長：276nm理論塔板數不低于3000流速:min柱溫:室溫測定方法：精密稱取藥品，置50ml容量瓶中，加1%冰醋酸的甲醇溶液適量，在40-50攝氏度的水浴中充分振搖使阿司匹林溶解，放冷，用1%冰醋酸的甲醇溶液稀釋至刻度，搖勻，過濾，取續濾液作為供試品貯備液，再量取貯備液5ml，置100ml容量瓶中，用1%冰醋酸的甲醇溶液稀釋至刻度，搖勻，用微孔過濾膜過濾，進樣，記錄色譜圖。取阿司匹林對照品，精密稱取10mg。置于100ml容量瓶中，用1%冰醋酸的甲醇溶液稀釋至刻度，同法測定。標示量=（Cr*Ax/Ar*D*W）/(W*標示量）*100%紫外分光光度法平行稱量樣品、、，分別用無水乙醇溶解，定容至50ml容量瓶中即得。設定好參數后，轉換進入計算模式。先進行空白調零，分別對3個不同濃度的樣品溶液進行3次平行檢測。標示量=A*D*W*1000/E*100*W*B*100%2結果與討論鑒別阿司匹林與三氯化鐵試液在加熱條件下反應生成紫堇色。阿司匹林與碳酸鈉試液加熱水解，得水楊酸鈉及醋酸鈉，加過量稀硫酸酸化后，產生醋酸的臭氣。薄層色譜阿司匹林標準品：Rf=≈阿司匹林供試品：Rf=≈兩者的Rf值基本接近，由此可得供試品中含有阿司匹林。雜質檢查比色法如圖所示:左:標準品右:供試品含量測定兩步滴定法g/片=（T·V·f/W稱樣量）×平均片重=ml××1/×=片法含量測定（圖見附件1）標示量=（Cr×Ax/Ar×D×W）/(W×標示量）×100%=10×1565247×100××=/×100%≈%紫外分光光度法編號濃度（mg/ml）A（平均值）標示量B1%2%3% 計算得平均標示量B%=%。藥典規定制劑規格范圍為95%-105%，所以該藥品不合格。本品不合格可能的原因：①在制備樣品時，樣品未完全溶解；②樣品制備后沒有立即測量，可能有樣品分解。3結論鑒別實驗與三氯化鐵反應本方案設計加熱使阿司匹林水解成水楊酸，水楊酸在中性或弱酸性條件下加熱與三氯化鐵試液反應，酚羥基與三價鐵結合生成紫堇色鐵配合物。實驗結果出現了如上陳述的紫堇色。說明供試品中含有阿司匹林。水解反應本方案利用的是阿司匹林的水解反應，但在實驗操作后只出現了氣泡和醋酸的臭氣，并未析出白色沉淀。分析實驗失敗的原因有以下四點：①實驗室準備的稀硫酸經PH試紙測試為深紅色，表明并不是符合實驗使用的稀硫酸，濃度較高；②所取用的藥片中阿司匹林含量較少，加熱水解后產生的水楊酸就會相應的更少；③水解不充分致使生成的水楊酸很少，無法產生明顯可見的白色沉淀。薄層色譜法TLC法為鑒別阿司匹林方法中最優先選擇的鑒別方法，本實驗結果標準品與供試品試液的Rf值極其相近，說明供試品中含有阿司匹林。雜質檢查比色法阿司匹林的雜質檢查采用了較常用和主觀的比色法，由上圖所示，左（標準品）顏色比右（供試品）顏色深，供試品顏色不得比標準品顏色更深，說明供試品中的雜質限量符合藥典規定，為合格品。含量測定水解后剩余量滴定法水解后剩余量滴定法利用阿司匹林酯鍵在堿性環境下易水解的特性，加入估量的氫氧化鈉滴定液，加熱水解酯鍵后，再用硫酸滴定液回滴定剩余的氫氧化鈉滴定液。實驗結果計算所得阿司匹林的平均片重為，而使用的藥片的規格為，說明所測定的阿司匹林的含量合格。HPLC法HPLC法測定阿司匹林含量的色譜圖見附件一，將原來高濃度的試液稀釋了10倍和100倍再進針后，色譜圖較之前更理想，面積%的值高達100%，說明所測供試品中雜質含量減少，相應阿司匹林的含量較高。數據處理的結果百分標示量約為95%，則表明供試品的阿司匹林含量合格。由于制劑的含量限度較寬，因而對于制劑的含量測定方法應以專一性為主，可更好地測定制劑的成分，以便更好的控制質量，而HPLC法可以滿足所有的要求。故我組采用了專一性與精確度都較好的HPLC法測定阿司匹林的含量。紫外分光光度法利用紫外分光光度法進行阿司匹林的含量測定，計算得平均標示量B%=%。藥典規定制劑規格范圍為95%-105%，所以該藥品不合格，說明實驗失敗，分析失敗的原因有：①在制備樣品時，未完全溶解；②樣品制備后沒有立即測量，可能有樣品分解；③過濾不充分，仍有雜質殘存，影響測定④儀器操作不當。實驗心得：通過本次試驗，使我更加深刻的了解了藥物分析的全部過程，對一個藥物質量的評定，首先通過鑒別，再通過雜質檢查，最后含量測定，每一步都特別關鍵。我們組實驗的完成靠的是我們大家的一起動手，一起思考，團結在一起。實驗過程中也遇到了很多的問題，這時候就需要我們冷靜的思考，哪里出現了問題，是藥品不對還是方法不對，如果一個方法分析三次而且做了三次，還是有很大的問題，我們會選擇另一個方案，并且努力去分析上次實驗的錯誤點。在紫外分光光度法含量測定實驗中，我們小組就遇到了很大的麻煩，連著做了四次，吸光度一直都在1以上，出現相同的錯誤。最大原因就是前面沒有認真思考，只是盲目的在做。后來詢問了老師，也分析出了原因。在做高效液相色譜分析法前，因為我們小組了解到前面小組做很多次都是失敗，于是在做此HPLC法之前我們就去了解別的小組失敗的原因，他們的溶劑試劑，流動性成分及比例。等全部了解完之后，再開始動手，結果一次性成功了，我們出的峰（見附件一）很理想，第一個樣品的峰可能由于雜質太多，出的峰也比較多。后來我們給樣品稀釋，分別稀釋10倍和100倍。使雜質濃度減少，出的峰更是理想。實驗中需要我們嚴謹的態度，發現問題要耐心分析。感受實驗的過程，讓自己通過一次實驗真正有所收獲。參考文獻[1]朱景申.藥物分析安:中國醫藥科技出版社,.[2]何英梅,賀軍權.小劑量阿司匹林腸溶片含量測定商榷[J].中國藥事,2005,19(2):110-111.[3]國家藥典委員會.中國藥典[S].二部.北京:化學工業出版社,附件一阿司匹林HPLC色譜圖標準品HPLC:峰#保留時間面積面積%分離度拖尾因子理論塔板#11000樣品