動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體2.2.2動(dòng)物細(xì)胞融合和單克隆抗體細(xì)胞融合是正常的生命活動(dòng)正在融合的兩個(gè)細(xì)胞

受精作用一、動(dòng)物細(xì)胞融合3.過程：1.概念：兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程融合含不同DNA的兩個(gè)細(xì)胞有絲分裂雜交細(xì)胞2.原理：細(xì)胞膜的流動(dòng)性誘導(dǎo)方式物理法化學(xué)法生物法：滅活的病毒仙臺(tái)病毒紫外線喪失感染性（不感染細(xì)胞）保留融合活性（誘導(dǎo)細(xì)胞融合）誘導(dǎo)方法滅活：指用物理或化學(xué)手段使病毒失去感染能力，但是并不破壞這些病原體的抗原結(jié)構(gòu)過程滅活的病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合的原理：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能夠與細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用，使細(xì)胞互相凝聚，細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布，細(xì)胞膜打開，細(xì)胞發(fā)生融合。植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合的比較比較項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合過程原理細(xì)胞融合的過程誘導(dǎo)方法用途細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞的全能性細(xì)胞膜的流動(dòng)性去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合物理、化學(xué)方法物理、化學(xué)、生物方法獲得雜種植株制備單克隆抗體細(xì)胞融合，植物組織培養(yǎng)細(xì)胞融合意義：突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交（種間、屬間、科間、動(dòng)植物之間）成為可能。應(yīng)用：成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段

特別是利用雜交瘤技術(shù)制造單克隆抗體抗體的傳統(tǒng)生產(chǎn)方法從血清中分離抗體該法制備抗體的特點(diǎn)：

產(chǎn)量低、純度低，且抗體的特異性差、靈敏度低。多種效應(yīng)B細(xì)胞動(dòng)物體內(nèi)多種抗體抗原B淋巴細(xì)胞特點(diǎn)３．每一個(gè)B淋巴細(xì)胞只能產(chǎn)生一種抗體。１．B淋巴細(xì)胞受抗原刺激后，可以產(chǎn)生抗體。２．動(dòng)物體內(nèi)的B淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生百萬種以上的抗體，每種抗體對(duì)特定的抗原具有特異性免疫作用。因此要想獲得大量的單一抗體，怎么呢？二、單克隆抗體

由單個(gè)B淋巴細(xì)胞經(jīng)過無性繁殖（克隆），形成基因型相同的細(xì)胞群，這一細(xì)胞群所產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體

稱為單克隆抗體。1、概念:怎樣才能大量生產(chǎn)單克隆抗體？提示1：僅用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可行嗎？提示2：我們所學(xué)的哪種細(xì)胞是可以無限增殖的？提示3：有什么方法能使B細(xì)胞產(chǎn)生抗體的能力和腫瘤細(xì)胞無限增殖能力同時(shí)具備呢？大量生產(chǎn)單克隆抗體思路B淋巴細(xì)胞具產(chǎn)生抗體的功能骨髓瘤細(xì)胞具無限增殖的特性利用細(xì)胞融合的技術(shù)將兩種細(xì)胞融合獲得具有淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞特性的雜交瘤細(xì)胞利用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)大量培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞B淋巴細(xì)胞注射特定抗原蛋白骨髓瘤細(xì)胞培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞融合（只考慮兩兩融合）培養(yǎng)液中細(xì)胞有幾種類型？融合細(xì)胞幾種類型？骨髓瘤細(xì)胞---骨髓瘤細(xì)胞B淋巴細(xì)胞---B淋巴細(xì)胞B淋巴細(xì)胞---骨髓瘤細(xì)胞多種雜交細(xì)胞在具有篩選作用的培養(yǎng)基上培養(yǎng)專一抗體檢驗(yàn)陽性克隆上述雜交細(xì)胞分開不同雜交細(xì)胞，克隆專一抗體，檢驗(yàn)陽性細(xì)胞單克隆抗體注射到小鼠體內(nèi)體外培養(yǎng)2、單克隆抗體的制備過程第1次篩選目的：得到雜交瘤細(xì)胞（多種）。第2次篩選目的：在雜交瘤細(xì)胞中篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。

該細(xì)胞繼承雙親細(xì)胞的遺傳特性，既能產(chǎn)生專一抗體又能無限增殖。雜交瘤細(xì)胞有何特點(diǎn)？特異性強(qiáng)，靈敏度高①診斷疾病（識(shí)別作用，如同位素標(biāo)記單克隆抗體，可診斷腫瘤、心血管畸形等）

單克隆抗體的應(yīng)用優(yōu)點(diǎn)：準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速②用于治療疾病和運(yùn)載藥物（主要用于癌癥治療，也可運(yùn)載藥物，如“生物導(dǎo)彈”）（導(dǎo)向作用，作為載體，生物導(dǎo)彈=單克隆抗體+藥物，治療腫瘤）（位置準(zhǔn)確、療效高、副作用小）兩個(gè)過程動(dòng)物細(xì)胞融合過程單克隆抗體制備過程三個(gè)“一”一個(gè)誘導(dǎo)細(xì)胞融合的新方法一個(gè)新細(xì)胞一個(gè)優(yōu)勢(shì)課堂小結(jié)你記住了嗎？－－滅活的病毒－－雜交瘤細(xì)胞－－單克隆抗體特異性強(qiáng)、靈敏度高的優(yōu)勢(shì)

看書上53頁圖，分組討論，單抗制備過程分哪幾步？請(qǐng)用箭頭把以下代表單克隆抗體制備過程步驟的圖解的字母按正確順序連接起來。順序是？

1、科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合，得到雜交細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體，與骨髓瘤細(xì)胞融合的是（）A.經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞B.沒經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞

C.經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞D.沒經(jīng)過免疫的Ｂ淋巴細(xì)胞A鞏固練習(xí)2.動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的比較中，正確的是（）誘導(dǎo)融合的方法完全相同B.所用的技術(shù)手段基本相同C.操作步驟基本相同D.都能形成雜種細(xì)胞D5.單克隆抗體制備過程中，骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合后，要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細(xì)胞是（）①淋巴細(xì)胞②小鼠骨髓瘤細(xì)胞③B淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞④小鼠骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞⑤雜交瘤細(xì)胞A.②④B.①③⑤

C.①②③④

D.②③C6.“生物導(dǎo)彈”是指 （）A.單克隆抗體B.雜交瘤細(xì)胞C.產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞D.在單克隆抗體上連接抗癌藥物

D3、單克隆抗體是指（）

A.單個(gè)骨髓瘤細(xì)胞增殖產(chǎn)生的抗體

B.單個(gè)B淋巴細(xì)胞增殖產(chǎn)生的抗體C.單個(gè)雜交瘤細(xì)胞增殖產(chǎn)生的高度單一的抗體D.單個(gè)抗體通過克隆化，產(chǎn)生大量抗體4、生產(chǎn)單克隆抗體時(shí)，在培養(yǎng)液中加入某種試劑能篩選出雜交瘤細(xì)胞，因?yàn)樵撛噭ǎ?/p>

A.能抑制淋巴細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞的DNA復(fù)制B.能阻止淋巴細(xì)胞的原癌基因被激活C.選擇性抑制骨髓瘤細(xì)胞的DNA復(fù)制D.能阻止雜交瘤細(xì)胞核糖體上所有蛋白質(zhì)的合成CC5、“生物導(dǎo)彈”是指（）

A.單克隆抗體B.雜交瘤細(xì)胞C.產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞

D.在單克隆抗體上連接抗癌藥物D6、科學(xué)家們用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合，得到雜交瘤細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量克隆抗體，與骨髓瘤細(xì)胞融合的是（）

A.經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞

B.未經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞

C.經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞

D.未經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞C(2)D細(xì)胞中產(chǎn)生的抗體其化學(xué)本質(zhì)是

,合成該物質(zhì)的場(chǎng)所是

,它是由

控制合成的,合成過程包括

和

兩個(gè)重要步驟.球蛋白核糖體基因轉(zhuǎn)錄翻譯(3)D細(xì)胞中產(chǎn)生的抗體具有

作用,與血清抗體相比其優(yōu)越之處在于

強(qiáng)

高.免疫特異性靈敏度(4)若A為人細(xì)胞,B為鼠細(xì)胞,用同位素標(biāo)記A細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì),B不標(biāo)記,在C細(xì)胞時(shí),檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)整個(gè)細(xì)胞一半有放射性另一半沒有.在D細(xì)胞時(shí),檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)整個(gè)細(xì)胞都有放射性,請(qǐng)解釋原因

.構(gòu)成細(xì)胞膜的蛋白質(zhì)分子大都可以流動(dòng)15、下圖是單克隆抗體制備流程階段示意圖。（1）_______________技術(shù)是單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)。（2）根據(jù)培養(yǎng)基的用途分類，圖中HAT培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。（3）單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比，最大的優(yōu)越性是________________。（4）動(dòng)物細(xì)胞融合除了采用植物細(xì)胞原生質(zhì)體融合常用的誘導(dǎo)劑外，還可以采用________________。（5）選出的雜交瘤細(xì)胞既具備骨髓瘤細(xì)胞的____________