2020年度江蘇省科學技術獎提名項目公示項目名稱豬繁殖與呼吸綜合征防控新技術與新產品的創制和應用完成人朱善元孫懷昌王安平吳植陳曉蘭徐海秦楓王永娟郭長明蔣春茂黃煜填完成單位江蘇農牧科技職業學院揚州大學廣州粵豐動物保健有限公司項目簡介：1．主要科技內容：（1）建成基于新一代測序（NGS）技術的獸醫診斷實驗室（VDL）和實驗室信息管理（LIMS）系統，建立高效快速的PRRSV濃縮與檢測方法；（2）通過對不同基因型PRRSV全基因組測序，揭示病毒分子流行病學特征和遺傳進化規律；（3）開展抗PRRSV基因工程藥物研發，創制有效防治PRRSV的游離受體、人工微小RNA和抗病毒多肽等產品；（4）利用速效雙相技術，研發新型PRRSV疫苗增強劑產品，篩選并開發中藥免疫增強劑產品；（5）抗PRRSV中藥成分及劑型篩選，研發抗PRRSV中藥制劑產品；（6）創新卵黃抗體制備技術，研發治療用PRRS高效價卵黃抗體產品；（7）開展PRRS防控新技術和新產品的推廣應用。2.主要技術指標（1）獸醫診斷實驗室及LIMS系統的建成與運行：新建了以NGS為核心的VDL和LIMS系統，并用于PRRSV的檢測、監測和分子流行病學調查，為PRRSV的防控提供科學預警預報；建立了PRRSV易感的豬子宮內皮細胞系和PK-15細胞系各1株；建立了簡便、快速的PRRSV濃縮與純化方法，用于病毒的分離純化和環境監測，顯著提高了熒光定量PCR的檢測敏感性和特異性。（2）PRRSV分子流行病學調查和遺傳進化規律研究：建立了不同樣品中PRRSV的NGS測序和分析方法，且可以區分不同基因型或不同毒株PRRSV；獲得了138株PRRSV-2全基因組序列，揭示了不同分支PRRSV-2的重組模式和重組熱點；系統分析了PRRSV-1基因組序列多樣性和遺傳進化規律；首次同時分離到PRRSV變異株及其親本野毒株，發現PRRSV疫苗株的遺傳重組和毒力返強。（3）防治PRRSV基因工程藥物的創制：利用噬菌體隨機肽庫篩選獲得了抗PRRSV多肽兩個；構建了表達唾液酸粘附素（Sn）和CD163游離受體的重組腺病毒兩個，對不同毒株PRRSV感染均有很好的抑制效果；篩選獲得了對不同毒株PRRSV均有抑制效果的人工微小RNA18個。（4）PRRSV疫苗免疫增強劑的研制：獲得了雙相可溶性載體和新型復合動物疫苗佐劑等系列產品5個，篩選并開發中藥免疫增強劑2個，可顯著增強PRRSV疫苗的免疫保護效果。（5）抗PRRSV中藥有效成分的篩選和中藥制劑的開發：從70余種中藥材中篩選獲得了具有顯著抗PRRSV作用的藥物5種，研發產品獲三類新獸藥證書2個。（6）治療用PRRS高效價卵黃抗體產品的研制：利用桑葉和杜仲提取物能顯著提高機體免疫功能的特性，研發高效價治療用PRRS卵黃抗體產品。3.授權專利等知識產權情況本項目共獲授權發明專利13項，其中國際專利1項，其他授權知識產權6項，其中新獸藥證書2個，臨床試驗批文1個。4.應用推廣及效益情況項目組建成并運行基于NGS和LIMS的獸醫診斷實驗室，建立了精準高效的PRRSV檢測方法，創制了一系列PRRS預防和治療用產品，包括新獸藥2個、新型免疫增強劑產品5個、中藥增強劑產品2個、卵黃抗體1個，游離受體、miRNA、特異多肽等治療用新產品3個。在此基礎上，通過示范應用、推廣、定期舉辦技術培訓班、技術咨詢等形式，在江蘇及周邊省份56個示范點推廣檢測技術10余項，檢測臨床發病樣品32600多份，累計推廣應用450萬多頭豬，實驗基地20個，中試線2條，生產線2條。舉辦培訓班25次，培訓技術人員1500多人次，經濟社會效益顯著。代表性論文論著目錄：序號論文著作名稱刊名發表時間第一作者通訊作者1RecombinationbetweenvaccineandfieldstrainsofporcinereproductiveandrespiratorysyndromevirusEmergingInfectiousDiseases2019.12.19AnpingWangGanwuLi2Geneticdiversityofporcinereproductiveandrespiratorysyndromevirus1intheUnitedStatesofAmericafrom2010to2018VeterinaryMicrobiology2019.12.22AnpingWangGanwuLi3AdditiveinhibitionofporcinereproductiveandrespiratorysyndromevirusinfectionwiththesolublesialoadhesinandCD163receptorsVirusResearch2014.1.22YangChenHuaichangSun4Inhibitionofporcinereproductiveandrespiratorysyndromevirusreplicationinporcinealveolarmacrophageswiththe3′UTR-targetedamiRNA微生物學報(英文版)2015.12.10LipingBaoHuaichangSun5中藥多糖增強豬藍耳病卵黃抗體效價研究中國獸醫學報2015.9.15陳曉蘭蔣春茂主要知識產權目錄：序號知識產權類別知識產權具體名稱國家（地區）授權號授權日期證書編號權利人發明人1發明專利TraditionalChineseMedicineMulberryLeavesPolysaccharideandEucommiaPolysaccharideandApplicationThereof美國US10039824B22018.08.07US10039824B2JiangsuChunmaoJiang,XiaolanChen,DeyunWang,HaifengYang,CaihongWu,YiZheng,JianhuaDai,WeiChen,XianglaiHe2發明專利雞蛋花在制備治療畜禽病毒性傳染病的藥物中的應用中國ZL201110084911.32012.10.3證書號第1052713號江蘇農牧科技職業學院朱善元，周廣生，左偉勇，洪偉鳴，秦楓，王永娟，黃文強，王安平3發明專利一種豬藍耳病卵黃抗體的制備方法中國ZL201410827855.12018.5.18證書號第2928536號江蘇農牧科技職業學院蔣春茂，陳曉蘭，武彩紅，賈紀萍，楊海峰，管遠紅，王妲妲，陳毓，周芳4發明專利一種特異性結合豬繁殖與呼吸綜合征病毒的多肽及其篩選方法和應用中國ZL201010209009.52013.1.9證書號第1117120號國家獸用生物制品工程技術研究中心徐海，于轍，呂芳，侯繼波5發明專利一種三七莖葉總皂苷在制備免疫佐劑的應用中國ZL200810155315.82012.10.27證書號第1014750號江蘇農牧科技職業學院秦楓，孫紅祥，葛竹興，朱善元，郁杰，方希修，陳玉勇，于生蘭，鄭義，張成，洪偉鳴，王妲妲6新獸藥證書蜘蛛香膠囊中國（2017）新獸藥證字02號2017.1.20（2017）新獸藥證字02號江蘇農牧科技職業學院江蘇農牧科技職業學院7臨床試驗批文桑杜口服液中國170032017.9.1417003江蘇農牧科技職業學院江蘇農牧科技職業學院8發明專利一種表達豬端粒酶反轉酶轉座子載體及其構建方法與在建立豬永生化細胞系中的應用中國ZL201410193534.02015.5.8證書號第1866246號揚州大學孫懷昌，何姍，張鑫宇，夏曉莉9發明專利一種自聚肽融合CD151蛋白及其制備方法與應用中國ZL201610301779.X2016.5.9證書號第3410591號揚州大學孫懷昌，宗曉銀，李洋洋，張鑫宇，夏曉莉10軟件著作權JSKL畜禽檢測信息管理疫病診斷平臺中國2019SR11073982019.10.23軟著登字第4528155號江蘇農牧科技職業學院吳植，謝軍，曹明鳳，朱善元推廣應用情況：隨著項目的實施和推進，建成并運行包括NGS中心的VDL（獸醫診斷實驗室）公關服務平臺，開發了LIMS系統，創制了一系列PRRS預防和治療用產品，包括新獸藥2個、新型免疫增強劑產品7個、中藥增強劑產品1個、卵黃抗體1個，游離受體、miRNA、特異多肽等治療用新產品3個。在此基礎上，項目研究團隊在江蘇及周邊省份56個示范點推廣檢測技術10余項，檢測臨床發病樣品32600多份。推廣實驗基地20個，中試線2條，生產線2條。舉辦培訓班25次，培訓技術人員1500多人次。2014-2019年間，項目研究團隊在江蘇、上海、