1、第四章植物胚胎培養(yǎng)及離體授粉陳傳紅 制作本章內(nèi)容提要：一、胚胎培養(yǎng)的概念、內(nèi)容與意義二、胚胎培養(yǎng)的方法三、胚乳培養(yǎng)的意義與方法四、植物的離體受精陳傳紅 制作一、胚胎培養(yǎng) 什么是胚胎？植物在受精后，受精卵形成合子，隨即進行第一次分裂，進而形成分生組織和幼胚，再發(fā)育成成熟胚。什么是胚胎培養(yǎng)？是指對植物的胚、子房、胚珠和胚乳進行離體培養(yǎng)，使其發(fā)育成完整植株的技術(shù)。陳傳紅 制作胚胎培養(yǎng)的意義1、通過離體授粉（試管受精）可克服種屬間受精障礙2、打破種子休眠3、縮短育種周期4、克服種子活力低下和自然不育等。5、用于研究胚胎發(fā)育的生理生化變化，以及影響胚發(fā)育的因素陳傳紅 制作植物不育機理1、自然隔離拒絕變異

2、種受精拒絕自花受精2、植物受精不育障礙的幾中形式花粉在柱頭上不萌發(fā)花粉管萌發(fā)，但胚敗育無同源染色體染色體，不能配對陳傳紅 制作應(yīng)用縮短育種周期 如：柑橘克服種子生活力低下，使萌發(fā)率提高克服種子自然不育陳傳紅 制作胚胎培養(yǎng)的內(nèi)容與概念胚胎培養(yǎng)的類型1、成熟胚培養(yǎng)2、幼胚胎培養(yǎng)胚珠培養(yǎng)1、未受精的胚胎培養(yǎng)2、受精后的胚胎的培養(yǎng)3、胚乳培養(yǎng)4、試管受精陳傳紅 制作胚發(fā)育和種子結(jié)構(gòu)合子發(fā)育成胚珠被發(fā)育成種皮受精極核發(fā)育成胚乳陳傳紅 制作離體幼胚的培養(yǎng)方法1、材料的選擇與滅菌不同植物根據(jù)目的的不同，選材會有所不同，如：胚發(fā)育時期，取材時間胚胎滅菌方法。 陳傳紅 制作2、分離與培養(yǎng)幼胚培養(yǎng)的操作方法與成熟

3、胚培養(yǎng)方法基本相同，值得注意的是切取幼胚必須在高倍解剖鏡下進行，操作時要特別細心，盡量取出完整的胚。 3、三種明顯不同的生長方式一是，繼續(xù)進行正常的胚胎發(fā)育，維持“胚性生長”；二是，在培養(yǎng)后迅速萌發(fā)成幼苗，而不繼續(xù)進行胚性生長，通常稱為“早熟萌發(fā)”；三是，多數(shù)情況下，胚在培養(yǎng)基中能發(fā)生細胞增殖形成愈傷組織，并由此再分化形成多個胚狀體或芽原基。 陳傳紅 制作幼胚培養(yǎng)的關(guān)鍵： 提供幼胚所必需的營養(yǎng)和環(huán)境條件。影響培養(yǎng)的條件：(1) 培養(yǎng)基 (2) 生長調(diào)節(jié)物質(zhì) (3) 天然提取物的作用 (4) 溫光條件（以光暗交替培養(yǎng)較為有利） (5) 其他，如有較高的蔗糖濃度，高滲透 壓，較高濃度的氨基酸及無機

4、鹽。 (6) 培養(yǎng)基pH陳傳紅 制作胚齡與胚性發(fā)育的關(guān)系1、培養(yǎng)已經(jīng)分化的成熟胚；2、培養(yǎng)未分化的幼胚；3、早期胚球培養(yǎng)。陳傳紅 制作2、胚乳離體培養(yǎng)的意義胚乳是由兩個單倍的極核和一個單倍的精子結(jié)合而成的3倍體組織。由它可獲得無子結(jié)實的3倍體植株，進而可將它加倍成6倍體植株。 3、胚乳離體培養(yǎng)的研究進展（1）僅能形成愈傷組織；（2）達到器官水平 ；（3）能形成完整植株。陳傳紅 制作4、胚乳培養(yǎng)的方法與技術(shù)關(guān)鍵胚乳培養(yǎng)的方法1）胚乳外植體的置備2）胚乳愈傷組織誘導(dǎo)與形態(tài)建成3）三倍體后代的特征 a、形態(tài)特征；b、再生植株的倍性。關(guān)鍵技術(shù)1）胚乳發(fā)育時期的影響2）胚性因子的作用3）培養(yǎng)基pH對胚乳

5、組織培養(yǎng)的影響陳傳紅 制作5、胚乳培養(yǎng)過程胚乳胚狀體發(fā)育成苗不定芽苗柚，柑桔和棗大麥, 水稻, 玉米, 蘋果, 馬鈴薯愈傷組織形態(tài)發(fā)生陳傳紅 制作胚珠培養(yǎng)：是將授粉的子房在無菌的條件下解剖后， 取出胚珠置于培養(yǎng)基培養(yǎng)的過程。有時也把胚珠連同胎座一起取下來培養(yǎng)。優(yōu)點：可以解決像蘭科植物成熟胚較小不易培養(yǎng)的問題；在未受精的胚珠培養(yǎng)中，可誘發(fā)大孢子發(fā)育成單倍體，用于單倍體育種。三、植物胚珠和子房培養(yǎng)陳傳紅 制作1、作用a. 促進原胚繼續(xù)生長，使雜種幼胚發(fā)育成熟；成功例子：四季桔、柑、鳳仙花、洋蔥成功的植物：西葫蘆、萵苣、百合等b. 未授粉胚珠和子房，誘導(dǎo)孤雌生殖，產(chǎn)生雌性單倍體陳傳紅 制作2、外植體消毒和接種3、培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件4、離體培養(yǎng)胚胎的發(fā)育 胚珠或授粉子房培養(yǎng)，合子胚可以更好地發(fā)育成植株。但如果條件不適，也容易從幼胚或珠心組織產(chǎn)生愈傷組織。 蕓香科易產(chǎn)生珠心胚。培養(yǎng)胚珠，獲得大量珠心胚，用以品種復(fù)壯、快速繁殖和獲得無病毒苗。同時，通過珠心組織培養(yǎng)，產(chǎn)生胚性愈傷組織，建立胚性組織培養(yǎng)實驗體系。陳傳紅 制作四、植物的離體受