1、2022/10/11第三章 消毒與滅菌理化的方法，殺死細(xì)菌，防止、控制傳染病2022/9/281第三章 消毒與滅菌理化的方法，殺死細(xì)2022/10/12 1、名詞解釋：消毒、滅菌、抑菌、防腐、 無(wú)菌 2、了解常用的物理、化學(xué)消毒方法。 本章要點(diǎn)2022/9/282本章要點(diǎn)2022/10/13根據(jù)作用的對(duì)象、殺滅的程度： 消毒、滅菌、抑菌、防腐、無(wú)菌2022/9/283根據(jù)作用的對(duì)象、殺滅的程度：2022/10/14消毒 disinfection 殺死物體上病原微生物的方法（芽胞及非病原微生物不一定能殺死）。（非活組織）滅菌 sterilization 殺死物體上所有微生物的方法（包括所有細(xì)菌繁

2、殖體及芽胞）。消毒滅菌概念抑菌 bacteriostasis 抑制細(xì)菌在體內(nèi)、外生長(zhǎng)的方法(一般用于活組織）2022/9/284消毒 disinfection 殺死物2022/10/15防腐 antisepsis 防止或抑制體外細(xì)菌生 長(zhǎng)繁殖的方法。（非活組織） 有苯甲酸、苯甲酸鈉、山梨酸、山梨酸鉀、丙酸鈣無(wú)菌 asepsis 不含活菌。防止細(xì)菌進(jìn)入機(jī)體或物品的技術(shù)，稱無(wú)菌操作。2022/9/285防腐 antisepsis 防止2022/10/16第一節(jié) 物理消毒滅菌法一、常用方法1、熱力法（干熱、濕熱）2、輻射消毒（紫外線、電離幅射、微波）3、濾過除菌（除菌濾器、適用物品）4、超聲波（機(jī)制

3、：裂解細(xì)菌，主要用于粉碎細(xì)胞、提取抗原）5、干燥與低溫抑菌2022/9/286第一節(jié) 物理消毒滅菌法一、常用方法2022/10/17熱力滅菌法 一、物理消毒滅菌法高溫殺滅細(xì)菌焚燒-最徹底的滅菌方法燒灼-直接用火焰滅菌方法干烤-加熱160-180 2h干熱滅菌法2022/9/287熱力滅菌法 一、物理消毒滅菌法高溫殺滅2022/10/18濕熱滅菌法加壓蒸汽滅菌法最有效的滅菌方法 121 20-30mim煮沸消毒法水煮100 5mim(繁殖體)-2h(芽胞)流通蒸汽消毒法巴氏消毒法間歇蒸汽滅菌法水蒸汽100 15-30mim(繁殖體)反復(fù)多次流動(dòng)蒸汽間歇加熱滅菌較低的溫度（61 30mim/71

4、30s）殺滅致病菌2022/9/288濕熱滅菌法加壓蒸汽滅菌法最有效的滅菌方法2022/10/19濕熱滅菌與干熱滅菌的比較同一溫度下，濕熱滅菌比干熱滅菌效果好原因1、濕熱中細(xì)菌菌體蛋白較易凝固2、濕熱的穿透力比干熱大3、濕熱的蒸汽有潛熱2022/9/289濕熱滅菌與干熱滅菌的比較同一溫度下，濕熱2022/10/110輻射殺菌法 紫外線殺菌機(jī)理：波長(zhǎng)240-300nm的紫外線具有殺菌作用,其中260-266nm殺菌作用最強(qiáng)干擾DNA的復(fù)制與轉(zhuǎn)錄紫外線穿透力較弱不耐熱物品的表面消毒特 點(diǎn)：應(yīng)用范圍：空氣消毒 手術(shù)室、傳染病房、細(xì)菌實(shí)驗(yàn)室 2022/9/2810輻射殺菌法 紫外線殺菌機(jī)理：波長(zhǎng)240

5、2022/10/111殺菌機(jī)理：應(yīng)用范圍：電離輻射包括高速電子、X射線和 射線產(chǎn)生游離基,破壞DNA。一次性醫(yī)用塑料制品的消毒食品的消毒-不破壞其營(yíng)養(yǎng)成分 2022/9/2811殺菌機(jī)理：應(yīng)用范圍：電離輻射包括高速電2022/10/112濾過除菌法用物理阻留的方法 將液體或空氣中的細(xì)菌除去,以達(dá)到除菌目的濾菌器含有微細(xì)小孔0.22m,只允許液體或氣體及 孔徑0.22m的顆粒通過，細(xì)菌不能濾過 適用范圍血清、毒素、抗生素以及空氣等的除菌 2022/9/2812濾過除菌法用物理阻留的方法濾菌器含有微2022/10/113不銹鋼濾器針式濾器2022/9/2813不銹鋼濾器針式濾器2022/10/11

6、42022/9/28142022/10/115第二節(jié) 化學(xué)消毒滅菌法1、化學(xué)消毒劑的殺菌機(jī)制2、常用消毒劑3、影響消毒劑作用的因素2022/9/2815第二節(jié) 化學(xué)消毒滅菌法1、化學(xué)消毒劑2022/10/116一、化學(xué)消毒劑作用機(jī)制1、促進(jìn)菌體蛋白質(zhì)變性凝固 （酚、醇、醛、酸堿類）2、干擾細(xì)菌酶系統(tǒng)和代謝 （氧化劑、重金屬鹽類）3、損傷細(xì)菌細(xì)胞膜，增加其通透性 （表面活性劑、脂溶劑）2022/9/2816一、化學(xué)消毒劑作用機(jī)制1、促進(jìn)菌體蛋白2022/10/1172022/9/28172022/10/11870%75%高錳酸鉀0. 1%2%0.1%0.2%0.3%2%2.5%2%4%2022/

7、9/281870%75%高錳酸鉀0. 1%2%02022/10/1192022/9/28192022/10/120影響消毒劑作用的因素消毒劑種類濃度時(shí)間細(xì) 菌菌齡種類 環(huán) 境酸堿度有機(jī)物溫度2022/9/2820影響消毒劑作用的因素消毒劑種類濃度時(shí)間2022/10/121本章小結(jié) 消毒 滅菌 抑菌 防腐 無(wú)菌高壓蒸汽滅菌最有效2022/9/2821本章小結(jié) 消毒2022/10/122第四章 遺傳與變異變異： 親代與子代、子代與子代之間性狀出現(xiàn)差異2022/9/2822第四章 遺傳與變異變異： 親代與子代2022/10/123變異： 親代與子代、子代與子代之間性狀出現(xiàn)差異。遺傳： 親代的生物學(xué)性

8、狀相對(duì)穩(wěn)定地傳給子代，使物種得以延續(xù)。 形態(tài)結(jié)構(gòu)、生長(zhǎng)代謝、致病性、耐藥性、抗原性等。遺傳性變異：非遺傳性變異：基因結(jié)構(gòu)改變表型改變2022/9/2823變異： 親代與子代、子代與子代之間性狀2022/10/124名詞解釋轉(zhuǎn)化 接合 轉(zhuǎn)導(dǎo) 溶原性轉(zhuǎn)換本章要點(diǎn)2022/9/2824名詞解釋轉(zhuǎn)化 接合 2022/10/125一、細(xì)菌變異的現(xiàn)象二、細(xì)菌遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ)三、細(xì)菌變異的機(jī)制主要內(nèi)容轉(zhuǎn)化 接合 轉(zhuǎn)導(dǎo) 溶原性轉(zhuǎn)換2022/9/2825一、細(xì)菌變異的現(xiàn)象主要內(nèi)容轉(zhuǎn)化 2022/10/126第二節(jié) 細(xì)菌遺傳變異一、細(xì)菌變異的現(xiàn)象 1 .形態(tài)結(jié)構(gòu)變異 L型菌；鞭毛（H-O變異）、 莢膜、芽胞變異

9、等 2.毒力變異 毒力增強(qiáng)-白喉棒狀桿菌 ； 毒力減弱-疫苗制備(BCG) 3.耐藥性變異 臨床治療中嚴(yán)重問題 痢疾志賀菌 鏈霉素依賴菌 4.菌落變異 從光滑型（S） 粗糙型（R）2022/9/2826第二節(jié) 細(xì)菌遺傳變異一、細(xì)菌變異的2022/10/127細(xì)胞壁缺陷型細(xì)菌L型細(xì)菌L型的命名細(xì)菌L型培養(yǎng)后菌落特征（圖）細(xì)菌L型的臨床意義細(xì)菌L型菌落：A 細(xì)菌型菌落 B 荷包蛋樣L型菌落 C 顆粒型L型菌落 D 絲狀型L型菌落2022/9/2827細(xì)胞壁缺陷型細(xì)菌L型細(xì)菌L型的命名2022/10/128二、 細(xì)菌變異的物質(zhì)基礎(chǔ) 染色體 質(zhì)粒轉(zhuǎn)座子2022/9/2828二、 細(xì)菌變異的物質(zhì)基礎(chǔ) 2

10、022/10/129（一）細(xì)菌染色體 細(xì)菌染色體為一環(huán)狀雙股DNA鏈，呈超螺旋形式纏繞成團(tuán)，構(gòu)成核質(zhì)（染色體長(zhǎng)度約為菌體總長(zhǎng)1000倍）。內(nèi)含細(xì)菌主要的遺傳信息。目前，已完成約80種細(xì)菌全基因序列測(cè)定，對(duì)深入研究細(xì)菌致病機(jī)制及進(jìn)化有重要意義。二 細(xì)菌遺傳的物質(zhì)基礎(chǔ)2022/9/2829（一）細(xì)菌染色體 細(xì)菌染色體為2022/10/130（二）質(zhì)粒 plasmid概念：質(zhì)粒為細(xì)菌染色體外的遺傳物質(zhì)，環(huán)狀雙股DNA。質(zhì)粒攜帶有遺傳信息，控制某些特定的遺傳性狀，可獨(dú)立復(fù)制，與細(xì)菌的遺傳變異有關(guān)。2022/9/2830（二）質(zhì)粒 plasmid概念：質(zhì)粒為2022/10/131種類：致育質(zhì)粒/F質(zhì)粒-

11、(fertility plasmid)F質(zhì)粒， 產(chǎn)生性菌毛-F+耐藥質(zhì)粒- (resistance plasmid) R質(zhì)粒毒力質(zhì)粒- (virulence plasmid) Vi質(zhì)粒，產(chǎn) 生相應(yīng)毒素細(xì)菌素質(zhì)粒-Col質(zhì)粒，產(chǎn)生細(xì)菌素代謝質(zhì)粒-編碼產(chǎn)生相關(guān)酶，如脲酶、枸櫞酸鹽 利用酶等2022/9/2831種類：2022/10/132特征：自我復(fù)制-可與染色體同步/不同步?jīng)Q定細(xì)菌某些生物學(xué)性狀可自行丟失及消除，不影響細(xì)菌存活可轉(zhuǎn)移性-可以各種方式轉(zhuǎn)移到其它菌相容性-幾種質(zhì)粒可存在于同一菌體內(nèi)，稱相容性質(zhì)粒2022/9/2832特征：2022/10/133三、轉(zhuǎn)座因子概念： 是一類在細(xì)菌染色體、

12、質(zhì)粒上 可自行移動(dòng)的特異性的獨(dú)立的DNA片段。種類：1.插入序列2.轉(zhuǎn)座子3.整合子2022/9/2833三、轉(zhuǎn)座因子概念：種類：2022/10/134意義： 改變遺傳物質(zhì)的核苷酸序列 影響插入點(diǎn)附近基因的表達(dá)（失活）均能造成細(xì)菌性狀的變異2022/9/2834意義：2022/10/135轉(zhuǎn)座2022/9/2835轉(zhuǎn)座2022/10/136噬菌體感染細(xì)菌的一類病毒2022/9/2836噬菌體感染細(xì)菌的一類病毒2022/10/137毒性噬菌體： 殺死細(xì)菌溫和噬菌體/前噬菌體：其基因整合到細(xì)菌基因組中2022/9/2837毒性噬菌體： 殺死細(xì)菌2022/10/138噬菌體生活周期前噬菌體形成202

13、2/9/2838噬菌體生活周期前噬菌體形成2022/10/139三、 細(xì)菌變異的機(jī)制基因突變與修復(fù)基因的轉(zhuǎn)移與重組2022/9/2839三、 細(xì)菌變異的機(jī)制基因突變與修復(fù)2022/10/140（一）基因突變概念突變 mutation 指細(xì)菌遺傳物質(zhì)的結(jié)構(gòu)突然發(fā)生的穩(wěn)定性的改變，可遺傳子代。根據(jù)涉及基因的多少分為點(diǎn)突變及染色體畸變二種基因突變2022/9/2840（一）基因突變概念基因突變2022/10/141（二） 基因突變的規(guī)律：1、突變率低2、自發(fā)性和隨機(jī)性基因突變2022/9/2841（二） 基因突變的規(guī)律：基因突變2022/10/1423、回復(fù)突變野生型（自然環(huán)境下的表型株）突變型（發(fā)

14、生了基因突變的菌株）突變回復(fù)突變野生型突變型2022/9/28423、回復(fù)突變突變回復(fù)突變野生型突變型2022/10/143 基因的轉(zhuǎn)移與重組二個(gè)細(xì)菌間部分遺傳基因，可以發(fā)生轉(zhuǎn)移（gene transfer)和重組 (recombination)，使受體菌獲得新的遺傳性狀。細(xì)菌基因轉(zhuǎn)移和重組的方式：轉(zhuǎn)化 （transformation)接合 (conjugation)轉(zhuǎn)導(dǎo) (transduction)溶原性轉(zhuǎn)換 (lysogenic conversion)原生質(zhì)體融合（protoplast fusion)基因的來(lái)源與載體2022/9/2843 基因的轉(zhuǎn)移與重組二個(gè)細(xì)菌間部分遺2022/10/1

15、44（一）轉(zhuǎn)化 transformation概念 供體菌游離的DNA片段直接被受體菌攝取，使受體菌獲得新的性狀小鼠體內(nèi)肺炎球菌轉(zhuǎn)化經(jīng)典試驗(yàn)2022/9/2844（一）轉(zhuǎn)化 transformatio2022/10/145有莢膜肺炎鏈球菌（活菌）IIIS無(wú)莢膜肺炎鏈球菌（活菌）IIR有莢膜肺炎鏈球菌（死菌）IIISIIR活菌+IIIS死菌或IIR活菌+提取的IIIS DNA分離出IIIS型有莢膜的活菌小鼠體內(nèi)肺炎鏈球菌轉(zhuǎn)化試驗(yàn)Griffith(1928)分離出IIIS2022/9/2845有莢膜肺炎鏈球菌IIR活菌+IIIS死2022/10/146轉(zhuǎn)化的DNA片段稱 轉(zhuǎn)化因子轉(zhuǎn)化因子分子量小，不

16、超過1020個(gè)基因，才可能被受體菌攝取攝入的供體菌DNA片段與受體菌相應(yīng)DNA重組 重組菌；重組菌繁殖時(shí)，就可形成重組突變株，獲得供體菌的某些性狀。2022/9/28462022/10/1472022/9/28472022/10/148（二）接合 conjugation概念 供體菌通過性菌毛將遺傳物質(zhì)（質(zhì)粒）傳遞給受體菌（通過接合傳遞的質(zhì)粒有F質(zhì)粒、R質(zhì)粒、Col質(zhì)粒、毒力質(zhì)粒）2022/9/2848（二）接合 conjugation概2022/10/149細(xì)菌接合示意圖 掃描電鏡150002022/9/2849細(xì)菌接合示意圖 掃描電鏡15002022/10/150接合F因子的傳遞 F因子經(jīng)接

17、合傳遞后在受體菌中可有三種存在方式：2022/9/2850接合F因子的傳遞 2022/10/151 F質(zhì)粒在受體菌中單獨(dú)存在，使F- 菌轉(zhuǎn)變?yōu)镕+ 菌，長(zhǎng)出性菌毛。2022/9/2851 F質(zhì)粒在受體菌中單獨(dú)存在，使F-2022/10/1522022/9/28522022/10/153F質(zhì)粒經(jīng)接合傳遞后,與染色體重組, 整合后的細(xì)菌能高效地轉(zhuǎn)移染色體上的基因，故稱高頻重組株 high frequency recombinant,Hfr。 Hfr的細(xì)菌，基染色體上帶有F質(zhì)粒，因此，也可產(chǎn)生性菌毛2022/9/2853F質(zhì)粒經(jīng)接合傳遞后,與染色體重組, 2022/10/1542022/9/2854

18、2022/10/155形成高頻重組株：F質(zhì)粒與細(xì)菌染色體整合，并使細(xì)菌長(zhǎng)出性菌毛高頻重組株Hfr2022/9/2855形成高頻重組株：F質(zhì)粒與細(xì)菌染色體整合2022/10/156Hfr 中的F質(zhì)粒有時(shí)也可從Hfr 中脫離下來(lái)，又形成了質(zhì)粒。脫離下來(lái)的F質(zhì)粒上可以帶有染色體上鄰近的一些基因，這種質(zhì)粒稱為F質(zhì)粒2022/9/2856Hfr 中的F質(zhì)粒有時(shí)也可從Hfr 2022/10/157F因子轉(zhuǎn)移與復(fù)制形成高頻重組株HfrHfrHfr形成F質(zhì)粒F從Hfr上脫離的F2022/9/2857F因子轉(zhuǎn)移與復(fù)制形成高頻重組株Hf2022/10/158因此，帶有F質(zhì)粒、 Hfr、F質(zhì)粒的細(xì)菌均是 F+陽(yáng)性菌

19、，有性菌毛，可與F- 菌接合2022/9/2858因此，帶有F質(zhì)粒、 Hfr、F質(zhì)粒的2022/10/159 R質(zhì)粒的傳遞 目前，臨床上多重耐藥菌株的出現(xiàn)與R質(zhì)粒通過接合傳遞密切有關(guān)。R質(zhì)粒組成： 耐藥傳遞因子（resistance transfer factor,RTF) RTF類似F因子，可編碼產(chǎn)生性菌毛并以接合方式轉(zhuǎn)移。耐藥決定因子（r決定因子） 2022/9/2859 R質(zhì)粒的傳遞 目前，臨床上多重耐2022/10/160RTFISR決定因子Tn9Tn4Tn5Tn9 耐氯霉素Tn4 耐氨芐青霉素、鏈霉素等Tn5 耐卡那霉素R質(zhì)粒組成示意圖2022/9/2860RTFISR決定因子Tn9

20、Tn4Tn52022/10/1612022/9/28612022/10/162（三）轉(zhuǎn)導(dǎo) transduction概念 以溫和噬菌體為載體，將供體菌的遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移到受體菌中，使受體菌獲得新的遺傳性狀。噬菌體種類 毒性噬菌體溫和噬菌體(復(fù)習(xí))2022/9/2862（三）轉(zhuǎn)導(dǎo) transduction2022/10/163轉(zhuǎn)導(dǎo)方式（普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)、局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)）普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)-轉(zhuǎn)導(dǎo)的DNA片段可以是供體菌染色體中任何部分。2022/9/2863轉(zhuǎn)導(dǎo)方式（普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)、局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)）2022/10/164普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)示意圖整合成功完全轉(zhuǎn)導(dǎo)整合失敗流產(chǎn)轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體DNA細(xì)菌DNA細(xì)菌被裂解感染新的細(xì)菌供體菌DNA與受體菌DNA整合2022/9/2864普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)示意圖整合成功整合失敗噬菌體2022/10/165局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)所轉(zhuǎn)導(dǎo)的DNA片段只限于供體菌染色體中個(gè)別特定的基因2022/9/2865局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)2022/10/166galbio噬菌體DNA正常偏離galbio噬菌體DNAgalbio噬菌體DNAgalbio噬菌體DNAgalbio噬菌體DNAgalbio噬菌體DNA局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)示意圖2022/9/2866galb