1、顯微鏡油浸鏡的使用實驗目的熟練掌握顯微鏡油浸鏡的使用和保護方法。一、油浸鏡的原理油浸鏡使用的鏡油折光率與玻片相近似， 能抵消空氣引起的散光現象。 自標本玻片透過的光線，因介質密度（從載玻片至空氣，再進入油鏡）不同，有些光線因折射或全反射， 不能全部進入透鏡， 致使物象顯現不清。 若在油鏡與載物玻片中間加入和玻璃折光率（ n=1.52 ）相仿的香柏油（ n1.5l5 ），則使通過的光線無有損失， 進入透鏡的光通量增多， 視野的亮度也就增強了， 因此便獲得清晰的物像。二、油浸鏡的使用方法1. 雙手托持顯微鏡，輕放于自己面前的實驗臺上，鏡座距實驗臺邊緣約 5 厘米。上升集光器與載物臺相平， 將反光鏡

2、對準光源 （自然光線用平面鏡、 人工光源用凹面鏡），光圈完全打開以增大射入光線強度。用低倍接物鏡調整光線，看染色標本時要求視野達到最亮的程度。在標本上滴一滴香柏油，再將標本置于載物臺上，用彈簧夾固定。轉動旋轉盤， 調換油浸鏡頭， 眼睛從鏡筒側面注視油鏡頭， 再小心轉動粗調節器， 使鏡頭緩慢下降，或緩慢上升載物臺，使鏡頭浸入油中至幾乎與玻片接觸為止，切勿相撞。這樣做的目的是防止鏡頭壓碎玻片而損壞鏡頭。在完成上述操作之后，再一面從接目鏡觀察，一面慢慢轉動粗調節器，使油鏡頭遠離玻片。 當見到視野出現模糊物像時， 立即停止，再用細調節器調到物像清晰為止。鏡檢完畢，轉動粗調節器使油浸鏡頭遠離載物臺，用拭

3、鏡紙輕輕順一個方向擦去油漬，必要時用擦鏡紙蘸少許二甲苯再拭，但應立即用拭鏡紙擦干。取下標本片、下降集光器、豎起反光鏡、轉動旋轉盤，將接物鏡擺成低倍鏡向前， 高倍鏡與油浸鏡頭各向兩側的位置。擦掉載物臺上的油漬，下降鏡筒，雙手托持顯微鏡，放入顯微鏡箱中。三、顯微鏡的保護顯微鏡是貴重精密儀器，使用時要精心愛護，不得隨意拆御和碰撞。1 / 5取送顯微鏡時應輕拿輕放，雙手托持，一手握鏡臂，一手托鏡座，防止因震動使鏡頭受損。顯微鏡的調節器是精密的機件， 只能做有限的旋轉， 當旋轉感到有阻力則表明已達極限，絕不能再繼續向此方向旋轉，必須立即向反方向旋轉退回。顯微鏡放置于干燥、無塵地方。（馬佳毓）思考題使用油

4、浸鏡時，怎樣調節光線和調節器才能使視野清晰、物像清楚？如何保護顯微鏡？2 / 5細菌的藥物敏感性試驗實驗目的熟悉并掌握細菌藥敏測定的基本方法。藥敏試驗的方法主要有擴散法和稀釋法兩種。目前臨床常用紙片瓊脂擴散法，其原理是將含有一定量的抗菌藥物紙片， 平貼在已經接種被測細菌的瓊脂平板表面，紙片中的抗菌藥物溶解于培養基內， 并向四周呈球面擴散， 藥物在瓊脂中的濃度隨離開紙片的距離增大而降低。 同時，經過培養， 瓊脂上的細菌開始生長，當瓊脂內的藥物濃度高于該藥對被檢細菌的最低抑菌濃度（ MIC）時，該菌的生長就受到抑制， 在含藥紙片的周圍形成抑菌環。 抑菌環越大， 說明待檢菌對被檢抗菌藥物越敏感。材料

5、金黃色萄萄球菌臨床分離株多種抗菌藥物干燥紙片MH瓊脂平板方法以無菌棉拭蘸取己制好的標準濃度（ 1.5 億 ml）的菌液，均勻地涂布于MH平板表面，在室溫中干燥數分鐘。或用接種環取少許供試菌純培養物，在 MH 瓊脂平板上反復劃線，使細菌均勻地涂布于整個平板表面。用無菌鑷子將含藥紙片平貼于平板的表面， 輕輕壓實。每個平板均勻地貼 4 種含藥紙片，紙片間距離不小于 24mm。紙片貼后 15min，將平板倒置于培養箱中， 37培養 1618h。結果觀察紙片周圍有無抑菌環，并測量抑菌環的直徑（以mm為單位）。臨床常用抗菌藥物的抑菌環直徑表示該藥的抑菌效果。抑菌環的解釋標準參見表8-1 。抑菌環的大小以敏

6、感、中度敏感、中介度和耐藥的形式報告結果，其意義如下：1. 敏感：表示被測菌株引起的感染可用常用劑量的該抗菌藥物治療， 禁忌癥除外。中度敏感：表示被測菌株可以通過提高劑量或在藥物生理性濃集的部位被抑制，如 - 內酰胺類藥物。3 / 5中介度：這一范圍作為“緩沖域”， 以防止由于微小的技術因素失控而導致結果的解釋錯誤。 抑菌環處于中介度范圍， 認為意義不明確， 如果沒有其它可以替代藥物則須做稀釋試驗。耐藥：被測菌不能被達到組織內或血液中的該抗生素常用劑量所抑制。附錄 MH（Mueller-Hinton ）瓊脂培養基制備成分：牛肉300.0g酪蛋白水解物17.5g可溶性淀粉11.5g瓊脂17.0g

7、蒸餾水1000.0ml制備方法：將牛肉去脂肪、肌腱后絞碎，加蒸餾水 1000ml，先制成牛肉浸湯。 1000ml 肉湯中，加入其它成分，調整 pH為 7.4 ，加熱使瓊脂熔化后分裝于試管或三角瓶中，于 12高壓滅菌 15min 備用。表 8-1抑菌環直徑及其解釋標準抗菌藥物紙片含藥量抑 菌環直徑耐藥中介度中度敏感敏感丁胺卡那霉素30g141516-17氨芐青霉素10g111213-14（腸桿菌）0（葡萄球菌）10g28-29先鋒霉素75g15-162223頭孢噻肟30g14-152223氯霉素30g121317-18強力霉素30g121315-16紅霉素15g131415-18慶大霉素10g121314-15卡那霉素30g131417-18苯唑青霉素1g101112-13青霉素10g28-29鏈霉素10g111214-15磺胺250 g12316-17四