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文檔簡介
1、 HP的檢查南京醫科大學第一附屬醫院消化內科 程文芳HP概述:幽門螺旋桿菌HP的檢查方法1.微生物法2.血清學方法3.尿素酶依賴技術4.形態學方法5.基因診斷1.微生物學方法從胃竇黏膜取組織培養;要求有一定的厭氧要求和技術。通過菌落、形態、生化反應如尿素酶實驗等來鑒定微生物學方法用于:1.細菌分型2.致病機制的研究3.構建動物模型,確定致病性4.評價新的診斷方法5.藥物療效6.體外篩選抗菌藥物7.藥敏實驗、耐藥的檢測2.血清學方法HP菌體、各種細胞毒素(Vac-A,Cag-A)、尿素酶都可作為抗原在感染幾周后刺激機體產生抗體,一旦產生可維持6個月以上。故血清抗體陽性不能確定病人有活動感染,陰性
2、不能排除初期的感染。2.血清學方法1)ELISA法:酶聯免疫,較常用。2)凝集反應:乳膠或明膠凝集實驗、血凝反應等3)免疫反應:放射免疫、熒光免疫等4)Westen-blot2.血清學方法臨床應用:1.流行病學調查2.診斷3.檢測毒力標志: Vac-A(+),Cag-A(+)2.血清學方法新的方法-糞便抗原檢測技術:原理:HP抗原免疫家兔,獲得兔抗HP血清-純化-抗HP多克隆抗體-過氧化物酶標;糞便稀釋+抗體-反應;酶標儀上測450和650nm吸光光度值。2000年以后才試行,未廣泛推廣。3.尿素酶依賴技術原理:HP有尿素酶將尿素-NH3+CO21)快速尿素酶實驗2)C13、C14呼吸實驗3)
3、15N-尿氨排泄實驗1)快速尿素酶實驗原理:各種試紙、試劑中有尿素、PH指示劑、緩沖劑、防腐劑。PH6.8(酸)-黃色 PH8.4(堿)-紅或紫紅色優點:費用低,速度快但假陰性高。用于HP的診斷,臨床上最常用。2)C13、C14呼吸實驗原理:尿素-NH3+CO2,將C13、C14標記尿素, C13O2、C14O2 -小腸吸收-血液循環-呼吸呼出。同位素質譜儀檢測C13O2、C14O2 特點:無創,準確但費用高, C14有放射性。臨床應用:診斷和復查。3)15N-尿氨排泄實驗原理:尿素-NH3+CO2, N15標記尿素, N15H3從尿排除,同位素質譜儀檢測N15H3。我國北京學者發明,價格貴,臨床沒推廣。4.形態學方法組織病理染色的方法:HE染色、米蘭染色、Giemsa染色 Genta染色臨床上不常用。5.基因診斷原理:聚合酶鏈反應(PCR):以HP基因序列進行擴增。包括:16S核糖體RNA、尿嘧啶基因、 Cag-A等。臨床應用:1)新鮮胃活檢標本的快速診斷;2)抗生素敏感試驗;3)分型特點:敏感性、特異性高但方法學要求高。五種常用方法一
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