1、大豆小分子肽抗氧化效應的初步研究【摘要】目的通過動物實驗來初步討論大豆小分子肽分子量300700Da的抗氧化作用。方法采用昆明種小鼠，實驗組小鼠分低、中、高3.0g/kgd、6.0g/kgd、9.0g/kgd三個劑量組灌胃大豆小分子肽25天，測定小鼠耐缺氧才能的影響。老年雄性istar大鼠20只，隨機分為老年對照組10只，老年實驗組10只，老年實驗組灌服大豆小分子肽，按6.0g/kgd劑量，老年對照組灌服同體積的生理鹽水。第60天末取樣測定血紅細胞和肝臟中丙二醛含量和超氧化物歧化酶(superxidediutase，SD)、谷胱甘肽過氧化物酶(glutathineperxidase，GSH-P

2、x)活性。結果大豆小分子肽實驗組中的高劑量組與對照組生理鹽水組相比小白鼠死亡只數，耐低壓缺氧才能增強，老年實驗組與老年對照組比擬，血紅細胞SD酶活性升高(P0.05)，肝臟組織SD酶活性有升高的趨勢，但無統計學意義(P0.05)。血紅細胞與肝臟組織丙二醛含量有減低趨勢，但無統計學意義(P0.05)；GSH-Px酶活性升高(P0.05)。結論大豆小分子肽分子量300700Da具有一定的進步老齡大鼠體內抗氧化酶活性、抑制脂質過氧化的作用。【關鍵詞】大豆小分子肽；抗氧化；耐缺氧才能；SD丙二醛；GSH-PxPreliinarystudynanti-xidativeapabilityfsybeanin

3、rpeptides【Abstrat】bjetiveTstudyanddisusstheanti-xidatineffetsandtheantiagingeffetfsybeaninrpeptides300-700DainldratsethdsSybeaninrpeptidesasadinisteredtieintreatedgrupfr25daysby3.0g/(kgd，6.0g/kgd，9.0g/kgdrespetively，andthehangesfthebearanxiaabilityereeasured.Tentyisterldratsererandlydividedint2grups

4、：ldntrlgrupandtestingldgrupith10ratsineahgrupTestingldgrupereperfusedithsybeaninrpeptides6.0g/(kgdfr60daysTheratsldntrlgruperefedithaterinthesaevlueAttheendfthe60thdaysbiheialindexereeasured:theativitiesfsuperxidedisutase(SD)andglutathineperxidase(GSHPx)andthenentratinfalndialdehyde(DA)inHbandliver.

5、Resultsparedithntrlgrup，thebearanxiaabilityftheadinisteredieintreatedgruperelnger，parediththseintheldntrlgrupTheativitiesfS0DinHberedereased(P0.05)，theativityfSDinliverhadainreasetendeny，butithutanysignifiantdifferene(P005)，andthenentratinsfDAinHbandliverhadalsainreasetendeny，butithutanysignifiantdi

6、fferene(P0.05).AsparediththseinntrlthetheativitiesfGSHpxhadainreasetendeny，(P0.05).nlusinSybeaninrpeptides300700Dahavethetendenyininreasingtheativityfantixidantenzyesanddereasinglipidperxidatin【Keyrds】sybean；inrpeptides；anti-xidatin；bearanxiaability；SD，GSH-Px；DA在20世紀4年代，一些西方學者用酶法改性蛋白質來補充極其缺乏的動物蛋白質，當

7、時由于技術程度的限制，大豆肽的研究無多大進展。到6年代末，隨著生物技術的進步和生命科學的開展，生理活性肽的生理功能逐步被人們發現，并受到越來越多的重視，尤其是一些活性肽的構造和生理功能逐漸明確，推動了活性肽的研究，也促進了大豆肽的研究與開發1。大豆多肽是大豆蛋白質的水解產物，能有效刺激甲狀腺激素分泌，促使膽固醇代謝生成膽汁酸。膽汁酸又被食物纖維所吸附，排出體外從而阻礙對膽固醇的吸收，起到降低膽固醇作用。我國于20世紀80年代中后期開場了大豆多肽的研究。目前在大豆多肽的研究與開發中存在的主要問題是大豆多肽與生理功能的關系2。大豆小分子肽的抗氧化以及抗衰老作用僅見體外實驗報道，而動物體內實驗尚少見

8、報道。本實驗是用我們實驗室自己研制的大豆小分子肽，通過動物實驗模型來討論其抗氧化的作用，為更好地開發大豆小分子肽提供初步的理論根據。1材料與方法1.1原料及處理大豆小分子肽的消費工藝：脫脂大豆餅水提鰓豆乳粗胰酶預酶解酶解乳中性蛋白酶水解酶解液別離大豆多肽脫色脫鹽超濾大豆小分子多肽液經濃縮噴霧枯燥大豆小分子肽粉用去離子水配成透明溶液以備灌胃用。該工藝制成大豆小分子肽采用高效凝膠過濾色譜法HPGF測定：小分子多肽峰值分子量范圍為300700Da之間。1.2實驗動物實驗動物昆明種小白鼠由本學院實驗動物中心提供。istar種老齡大白鼠由沈陽藥檢所提供。昆明種小白鼠80只，雌雄各半，體重182g，按性別

9、、體重隨機分為1個對照組和3個試驗組。分組后飼養觀察3天，剔除不合格個體后灌胃，空白對照組灌胃適量生理鹽水，各實驗組灌胃大豆小分子肽溶液，劑量分別為每天3.0g/kg、6.0g/kg、9.0g/kg。連續25天，實驗期間，小鼠自由攝食及飲水3。取鼠齡為20個月，體重為381.7539.23g，istar老齡雄性大白鼠20只，按體重隨機分為1個對照組和1個實驗組。分組后飼養觀察3天后灌胃，對照組灌胃生理鹽水5l/d，試驗組灌胃大豆小分子肽溶液6.0g/(kgd。飼養60天，實驗期間，大鼠自由攝食及飲水4。1.3低壓缺氧狀態的影響組小鼠連續給樣第25天后，于末次給樣后2h將小白鼠放入減壓至負壓80

10、Hg，持續時間為5in，記錄小白鼠死亡只數5。1.4對大白鼠各組SD、GSH-Px活性和脂質過氧化產物丙二醛(DA)含量的影響6大鼠連續給樣60天后，分別剪斷股動脈，血用肝素抗凝，取肝臟用冰生理鹽水沖洗，濾紙吸干，準確稱重，參加冰生理鹽水，玻璃勻漿器制成10的組織勻漿，離心后汲取上清液備用。按微量鄰苯三酚快速測定紅細胞，肝臟的SD活性。而GSH-Px活性和脂質過氧化產物丙二醛(DA)含量測定采用南京建成生物工程研究所消費的試劑盒。1.5統計學處理所有數據輸入計算機，用SPSS10.0Frinds統計軟件進展單因素方差分析，統計處理數據用xs表示。組間比擬用t檢驗，顯著性程度為P0.05。2結果

11、2.1大豆小分子肽對低壓缺氧的影響大豆小分子肽實驗組中的高劑量組與對照組生理鹽水組相比小白鼠死亡只數，耐低壓缺氧才能是否明顯增強，差異有顯著性P0.05。見表1。2.2大豆小分子肽對老年大白鼠SD活性的影響大豆小分子肽實驗組與對照組相比，實驗組的紅細胞HbSD活性顯著增加(P0.05)，而肝臟的SD活性有增加趨勢，但兩組沒有統計學意義(P0.05)。見表2。表1大豆小分子肽對低壓缺氧的影響表2大豆小分子肽對的紅細胞Hb肝臟的SD活性影響U/g2.3大豆小分子肽對老年大白鼠谷胱甘肽過氧化物酶GSH-Px活性的影響大豆小分子肽實驗組與對照組相比，實驗組的紅細胞HbGSH-Px活性顯著增加(P0.0

12、5)，而肝臟的GSH-Px活性有增加趨勢，但兩組沒有統計學意義(P0.05)。見表3。表3大豆小分子肽對的紅細胞Hb肝臟的GSH-Px活性影響U/g2.4大豆小分子肽對老年大白鼠的血紅細胞與肝臟組織中丙二醛含量的影響大豆小分子肽實驗組與對照組相比，實驗組的紅細胞Hb和肝臟中的DA含量雖有降低的趨勢，但兩組沒有統計學意義(P0.05)，見表4。表4大豆小分子肽對的紅細胞Hb肝臟的丙二醛含量影響l/L3討論目前一般認為，機體的衰老與自由基有很大的關系。機體在正常代謝過程中可以產生多種活性氧，如超氧陰離子(.2-)、羥自由基(.H)、過氧化氫H22)等，其中.H與機體中的多不飽和脂肪酸(LH)作用，

13、可以產生LP。LP的最終代謝產物，如小分子的醛、酮等可以與生物大分子作用，使其失去生理功能，最終導致機體損傷。生物體內的抗氧化物酶，如SD、GSH-Px可以去除活性氧，對生物體起保護作用，因此SD、GSHPx活性大小，LP濃度的上下可反映出機體被氧化損傷的程度7。丙二醛(DA)是脂質過氧化(脂褐素)LP代謝物，其含量上下可反映體內自由基的反響程度，脂質過氧化物可引起細胞代謝及功能障礙甚至死亡，故丙二醛(DA)的含量常可間接反映出機體受自由基攻擊程度8。實驗說明：大豆小分子肽可明顯增加血紅細胞HbSD、GSHPx活性，而對肝組織中二酶的活性卻不明顯，對DA含量的抑制作用亦不明顯。有關活性肽的抗氧

14、化機制還不清楚，可能是通過增加SD、GSH-Px的活性，加快體內自由基的去除，從而抑制肝臟內過氧化脂質的二級分解產物DA的含量，有利于保護細胞免受過氧化損傷，對自由基有關的疾病有一定的防治作用。但詳細是哪種物質對抗氧化起主要作用，尚需進一步的研究9。本實驗大豆小分子肽只能增加血紅細胞HbSD、GSHPx活性，而對肝組織的活性卻不明顯，并對DA含量幾乎沒有抑制作用。仍需進一步實驗研究來解釋。肽類功能性食品被國內外專家稱為21世紀食品。功能性食品是高附加值產品，關系到各年齡段人們的安康保健，市場潛力宏大。東北地區又是大豆的主產區，大豆小分子肽的開發可為食品工業提供了更為優質的食品輔料，同時為功能性食品的開發，提供了強大的物質基矗在實現經濟和社會效益同時，又拉動了大豆種植業，激活了大豆初加工工業，也會促進交通運輸、水、電、煤等根底產業的開展。【參考文獻】1蔡木易.大豆肽的國外開發現狀.中國食品報，2022，3：18.2趙芳芳，張日俊.大豆肽的研究進展.中國飼料，2022，1：22-24.3李茂輝，金山，孟玉玲.東北油松花粉酶法提取液抗疲勞作用的實驗.中國公共衛生，2002，5：610.4李茂輝，葉麗杰，盧桂華，等.心肌多肽抗疲勞效應的實驗研究.現代預防醫學，2022，337：1097-1099.5GpalakrishnanJ，DekerEA，eansJAntixida