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文檔簡介

1、1研究目的人工種子,是細胞工程中最年輕的一項新興技術。利用體細胞胚發生的特征,把它包埋在膠囊中,可以形成具有種子的性能并直接在田間播種。優點1、通過組織培養的方法可以獲得數量很多的胚狀體而且繁殖速度快,結構完整; 2、可根據不同植物對生長的要求配置不同成分的“種皮”; 3、在大量繁殖苗木和用于人工造林方面,人工種子比采用試管苗的繁殖方法更能降低成本,而且方便機械化播種,可節省勞動力; 4、體細胞胚是由無性繁殖體系產生的,因而可以固定雜種; 5、有時可以在人工種子中加入某些農藥、菌肥、有益微生物、激素等; 6、胚狀體發育的途徑可以作為高等植物基因工程和遺傳工程的橋梁。 7、解決了有些作物品種繁殖

2、能力差、結子困難或發芽率低等問題。 2bac研究背景最初是由英國科學家于1978年提出的。 1978年Murashige提出人工種子概念。1984年Kitto首次制作出了胡蘿卜的種子,但存活率很低。1986年Redenbaugh等成功地利用藻酸鈉包埋單個體細胞胚,生產人工種子 。在國內,金翼毅等進行芹菜和苜蓿的人工種子的研究。李修慶建立了胡蘿卜人工種子的基本制作流程,桂耀林等研究了換臉體細胞的胚胎發生并制出了人工種子。番木瓜體細胞胚人工種子(Castillo等,1998);b. 馬鈴薯微芽人工種子(Patel等,2000);c. 人參體細胞種子(Choi和Jeong,2002)。 3培養技術通

3、過組織培養技術,可把植物組織的細胞培養成在形態及生理上與天然種子胚相似的胚狀體,也叫作體細胞胚。這種體細胞胚有于葉、根、莖分生組織的結構。科學家把體細胞胚包埋在膠囊內形成球狀結構,使其具備種子機能。所以,人工種子是一種人工制造的代替天然種子的顆粒體,可以直接播種于田間。 4培養工藝流程外植體(芫荽幼苗的莖)脫分化、去分化,用誘導培養基誘導出芫荽的愈傷組織將顆粒性胚狀愈傷組織轉移到分化分培養基或不含2,4-D的MS培養基上發育(經球形胚,心形胚,魚雷型胚)為成熟的胚狀體胚狀體的包埋人工種子的播種、萌發、幼苗的移栽外植體愈傷組織人工種子體細胞胚5實驗結果及分析激素對芫荽愈傷組織誘導的影響本實驗設計

4、了四種誘導培養基均能誘導出芫荽的愈傷組織。2,4-D 1.0mg/L NAA 1.0mg/L2,4-D 1.0mg/L KT 0.5mg/LNAA 2.0mg/L KT 0.5mg/L1)2,4-D的誘導效果不及NAA2)生長素類與細胞分裂素配合使用比單獨施加生長素的誘導效果要好。 6實驗結果及分析培養基對芫荽胚狀體形成的影響2,4-D去掉是必要的(表二),濃度為1.0mg/L時完全抑制成熟體細胞胚的形成有機添加物對芫荽體細胞胚的發育也有顯著影響,添加一定的酪朊水解物對體細胞的發育極為明顯的促進作用,過多抑制碳水化合物對芫荽體細胞胚的形成和發育也有一定的影響,3%蔗糖含量最適與芫荽成熟體細胞胚的形成,過高抑制7實驗結果及分析包埋芫荽胚狀體在固體培養基上生產的正常成熟胚狀體,可挑出直接進行人工種子的制作;懸浮培養基中形成的成熟的胚狀體則先用18目的不銹鋼網過濾,除去大的愈傷組織塊,用長度為2mm的成熟的胚狀體進行包埋。包埋劑: 3%海藻酸鈉,2%CaCl2H2O固化,二者均用1/2MS配制,胚狀體與包埋劑融合,然后吸管吸取胚狀體并逐一滴入固化液中,待固定成形后用無菌水沖洗,便可得到。包埋球在固化液(2%CaCl2H2O)中停留約2030分鐘。8實驗結果及分析人工種子的播種,萌發及幼苗的移栽播種在1/

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