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文檔簡介

1、BCA蛋白濃度測定試劑盒使用說明書產品簡介蛋白質定量是蛋白質研究的基礎工作之一。博奧森開發的BCA蛋白質檢測試劑(bicinchoninicacid)是理想的蛋白質定量方法;是當前比Lowry法更優越的專用于檢測總蛋白質含量的產品。該方法以快速靈敏、穩定可靠,對不同種類蛋白質檢測的變異系數非常小而倍受專業人士的青睞。BCA法測定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的化學物質的影響。在組織細胞裂解實驗中,常用濃度的去垢劑SDS,TritonX-100,Tween不影響檢測結果,但受螯合劑(EDTA,EGTA)、還原劑(DTT,巰基乙醇)和脂類的影響。實驗中,若發現樣品稀釋液或裂解液本身背景值較高,可試用B

2、radford蛋白濃度測定試劑盒。該產品不受此影響,因此與之配合使用,可免除您實驗中的許多煩惱。基本原理堿性條件下,蛋白將Cu2+還原為Cu+,Cu+與BCA試劑形成紫顏色的絡合物,測定其在562nm處的吸收值,并與標準曲線對比,即可計算待測蛋白的濃度。主要特點1準確靈敏,線性范圍廣:BCA試劑的蛋白質測定范圍是102000ug/ml;2快速:45分鐘內完成測定,比經典的Lowry法快4倍而且更加方便。3經濟實用:在微孔板中進行測定,可大大節約樣品和試劑用量。4不受樣品中離子型和非離子型去污劑影響。5檢測不同蛋白質分子的變異系數遠小于考馬氏亮藍。包裝及保存BCA試劑A70ml室溫保存BCA試劑

3、B1.4ml室溫保存蛋白標準C0.5ml-20C保存(5mg/1mlBSA)本試劑盒自訂購之日起一年內有效。注意事項1在低溫條件或長期保存出現沉淀時,可攪拌或37C溫育使溶解,如發現細菌污染則應丟棄2樣品中若含有EDTA、EGTA、DTT、硫酸銨、脂類會影響檢測結果,請試用Bradford蛋白濃度測定試劑盒;高濃度的去垢劑也影響實驗結果,可用TCA沉淀去除干擾物質。3要得到更為精確的蛋白濃度結果,每個蛋白梯度和樣品均需做復孔,每次均應做標準曲線。4當試劑A和B混合時可能會有渾濁,但混勻后就會消失,工作液在密閉情況下可保存1周。5.需準備37C水浴或溫箱、酶標儀或普通分光光度計,測定波長為540

4、-595nm之間,562nm最佳。酶標儀需與96孔酶標板配套使用。使用分光光度計測定蛋白濃度時,試劑盒測定的樣品數量會因此而減少。使用溫箱孵育時,應注意防止因水粉蒸發影響檢測結果。使用說明1.配制工作液:根據標準品和樣品數量,按50體積BCA試劑A加1體積BCA試劑B(50:1)配制適量BCA工作液,充分混勻。BCA工作液室溫24小時內穩定。2稀釋標準品:取10微升標準品用PBS稀釋至100微升(標準品一般可用PBS稀釋),使終濃度為0.5mg/ml。將標準品按0,1,2,4,&12,16,20微升加到96孔板的蛋白標準品孔中,加PBS補足到20微升。3加適當體積樣品到96孔板的樣品孔中,補加

5、PBS到20微升。4.各孔加入200微升BCA工作液,37C放置30分鐘。5冷卻到室溫,用酶標儀測定A562,根據標準曲線計算出蛋白濃度。BCA蛋白濃度測定試劑盒使用說明書產品簡介蛋白質定量是蛋白質研究的基礎工作之一。博奧森開發的BCA蛋白質檢測試劑(bicinchoninicacid)是理想的蛋白質定量方法;是當前比Lowry法更優越的專用于檢測總蛋白質含量的產品。該方法以快速靈敏、穩定可靠,對不同種類蛋白質檢測的變異系數非常小而倍受專業人士的青睞。BCA法測定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的化學物質的影響。在組織細胞裂解實驗中,常用濃度的去垢劑SDS,TritonX-100,Tween不影響檢

6、測結果,但受螯合劑(EDTA,EGTA)、還原劑(DTT,巰基乙醇)和脂類的影響。實驗中,若發現樣品稀釋液或裂解液本身背景值較高,可試用Bradford蛋白濃度測定試劑盒。該產品不受此影響,因此與之配合使用,可免除您實驗中的許多煩惱。基本原理堿性條件下,蛋白將Cu2+還原為Cu+,Cu+與BCA試劑形成紫顏色的絡合物,測定其在562nm處的吸收值,并與標準曲線對比,即可計算待測蛋白的濃度。主要特點1準確靈敏,線性范圍廣:BCA試劑的蛋白質測定范圍是102000ug/ml;2快速:45分鐘內完成測定,比經典的Lowry法快4倍而且更加方便。3經濟實用:在微孔板中進行測定,可大大節約樣品和試劑用量

7、。4不受樣品中離子型和非離子型去污劑影響。5檢測不同蛋白質分子的變異系數遠小于考馬氏亮藍。包裝及保存BCA試劑A70ml室溫保存BCA試劑B1.4ml室溫保存蛋白標準C0.5ml-20C保存(5mg/1mlBSA)本試劑盒自訂購之日起一年內有效。注意事項1在低溫條件或長期保存出現沉淀時,可攪拌或37C溫育使溶解,如發現細菌污染則應丟棄2樣品中若含有EDTA、EGTA、DTT、硫酸銨、脂類會影響檢測結果,請試用Bradford蛋白濃度測定試劑盒;高濃度的去垢劑也影響實驗結果,可用TCA沉淀去除干擾物質。3要得到更為精確的蛋白濃度結果,每個蛋白梯度和樣品均需做復孔,每次均應做標準曲線。4當試劑A和

8、B混合時可能會有渾濁,但混勻后就會消失,工作液在密閉情況下可保存1周。5.需準備37C水浴或溫箱、酶標儀或普通分光光度計,測定波長為540-595nm之間,562nm最佳。酶標儀需與96孔酶標板配套使用。使用分光光度計測定蛋白濃度時,試劑盒測定的樣品數量會因此而減少。使用溫箱孵育時,應注意防止因水粉蒸發影響檢測結果。使用說明1.配制工作液:根據標準品和樣品數量,按50體積BCA試劑A加1體積BCA試劑B(50:1)配制適量BCA工作液,充分混勻。BCA工作液室溫24小時內穩定。2稀釋標準品:取10微升標準品用PBS稀釋至100微升(標準品一般可用PBS稀釋),使終濃度為0.5mg/ml。將標準品按0,1,2,4,&1

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