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文檔簡介

1、DNA重組技術的基本工具基因工程實例1.基因工程的優點；2.基因工程成功的基礎；3.基因工程的原理；4.基因工程的三種工具的作用及特點。 指按照人們的愿望,進行嚴格的設計并通過體外DNA重組和轉基因等技術，賦予生物以新的遺傳特性,創造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產品。由于基因工程是在DNA分子水平上進行設計和施工的，因此又叫作DNA重組技術或基因拼接技術?；蚬こ痰母拍顒e名 操作環境操作對象操作水平基本過程原理基因拼接技術或DNA重組技術生物體外基因DNA分子水平剪切拼接導入表達基因重組實例：基因工程培育抗蟲棉的簡要過程抗蟲棉的培育有哪些關鍵步驟？蘇云金芽孢桿菌提取抗蟲基因普通棉花(無

2、抗蟲特性)棉花細胞(含抗蟲基因)與載體拼接，導入棉花植株(有抗蟲特性)表達解決培育抗蟲棉的關鍵步驟需要哪些工具？限制性核酸內切酶、DNA連接酶、載體?！胺肿邮中g刀” 來源主要從原核生物中分離純化而來種類EcoRSam本質蛋白質特點識別特定序列、切割特定位點切割結果黏性末端平末端黏性末端黏性末端EcoR一、限制性核酸內切酶來源主要從原核生物中分離純化而來種類EcoRSam本質蛋白質特點識別特定序列、切割特定位點切割結果黏性末端平末端Sma平末端平末端“分子手術刀” 一、限制性核酸內切酶中心軸線處中心軸線兩側來源主要從原核生物中分離純化而來種類EcoRSam本質蛋白質特點識別特定序列、切割特定位點

3、切割結果黏性末端平末端“分子手術刀” 一、限制性核酸內切酶二、DNA連接酶EcoliDNA連接酶大腸桿菌連接黏性末端T4DNA連接酶T4噬菌體連接黏性末端或平末端功能將雙鏈DNA片段“縫合”起來，恢復被限制酶切開的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵。用同種限制酶切割DNA連接酶“分子縫合針”DNA聚合酶和DNA連接酶的比較DNA連接酶DNA聚合酶連接DNA鏈連接部位雙鏈在兩DNA片斷之間形成磷酸二脂鍵單鏈將單個核苷酸加到已存在的核酸片斷3末端形成磷酸二脂鍵三、基因進入受體細胞的載體功能將目的基因轉移到受體細胞使目的基因在受體細胞內進行大量復制條件在宿主細胞內大量復制并穩定存在具有一個至多個限制酶切割位點，以供外源DNA片段插入具有標記基因，供重組DNA的鑒定和選擇種類質粒噬菌體衍生物動植物病毒去向留在宿主細胞中進行復制整合到受體細胞的染色體的DNA上，并隨染色體DNA進行同步復制“分子運輸車”2、能否用SARS病毒作為基因載體？3、作為載體，若沒有切割位點將怎樣？4、攜帶目的基因的載體是否進入了受體細胞，如何鑒定？5、假如目的基因導入受體細胞后不能復制，將怎樣？1、從化學組成來看，載體應含有什么成分？雙鏈DNA不能不能進行DNA的重組載體上應有標記基因可能造成基因丟失基因工程是在DNA分子水平上進行設計施工的。在基因操作的基本步驟中，不進行堿基互補配對的

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